|
Terapeutické monitorování léčiv v klinické praxi a výzkumu
Ďuricová, Jana ; Grundmann, Milan (vedoucí práce) ; Mayer, Otto (oponent) ; Vítovec, Jiří (oponent)
Úvod: Enzym cytochrom P450 2D6 (CYP2D6) se podílí na metabolizmu kolem 25% běžně používaných léčiv. Vykazuje velkou interindividuální variabilitu vlivem genetických faktorů i faktorů prostředí. Je proto snaha měřit aktivitu tohoto enzymu. Samotné stanovení genotypu nám však neumožňuje stanovit aktuální aktivitu enzymu, stanovení fenotypu na druhé straně zohledňuje i negenetické faktory. Beta-blokátor metoprolol podléhá extenzivní presystémové eliminaci prostřednictvím enzymu CYP2D6, který se podílí ze 70 - 80 % na jeho metabolizmu. Metoprolol se proto užívá jako jedna ze substrátových látek pro CYP2D6. Metabolický poměr metoprololu k jeho metabolitu - hydroxymetoprololu v plazmě za 3 hodiny po užití metoprololu slouží k určení metabolické aktivity. Cíl: Porovnat metabolickou aktivitu CYP2D6 po jednorázovém a opakovaném užití metoporololu. Dále zjistit vliv aktivity enzymu CYP2D6 na farmakokinetiku a farmakodynamiku metoprololu u pacientů na dlouhodobé terapii metoprololem. Metoda: Do první části práce bylo zařazeno 13 dospělých pacientů s hypertenzí, kterým bylo indikováno nasazení metoprololu. Krevní odběry na hladinu metoprololu byly provedeny po užití první dávky a pak v odstupu nejméně 2 týdnů k zajištění ustálené koncentrace. Vliv CYP2D6 aktivity na dispozici metoprololu při dlouhodobém...
|
|
Modulace ankyrinového receptoru TRPA1 divalentními kationty
Hynková, Anna ; Hudeček, Jiří (vedoucí práce) ; Hodek, Petr (oponent)
TRPA1 je jediným zástupcem ankyrinové podrodiny TRP (transient receptor potential) iontových kanálů. Tento iontový kanál je převážně exprimován na senzorických neuronech, v srdci, mozku a plicních fibroblastech, kde může být aktivován podněty různých senzorických modalit, včetně širokého spektra dráždivých nebo pálivých látek, které potenciálně ohrožují živý organismus: isothiokyanáty, akrolein, cinnamal a jeho deriváty, nikotin a různé produkty oxidativního stresu. Kromě těchto chemických látek může být TRPA1 kanál také aktivován a současně inaktivován nitrobuněčnými vápenatými ionty. Přesné mechanizmy těchto regulačních dějů jsou však zatím neobjasněné. TRPA1 je neselektivním iontovým kanálem, který je propustný pro vápenaté ionty, ale odhady relativní propustnosti získané v různých laboratořích se velmi liší (od 0,84 do 7,9), tyto hodnoty navíc silně závisejí na délce a způsobu aktivace iontového kanálu. Ukazuje se, že míra modulace TRPA1 kanálu dvojmocnými kationty je závislá na typu a celkovém množství procházejících iontů, jež dynamicky modulují jeho aktivitu. Výsledková část předložené diplomové práce přináší nové poznatky týkající se účinku vápenatých iontů, jejichž zvýšená koncentrace v extracelulárním prostředí přechodně zvyšuje a poté následně inhibuje aktivitu TRPA1 receptoru vyvolanou...
|
|
Vliv mykorhizy na tvorbu sekundárních metabolitů u rostlin
Pikorová, Markéta ; Albrechtová, Jana (vedoucí práce) ; Rydlová, Jana (oponent)
Mykorhizní symbióza, mutualistický vztah mezi symbiotickou houbou a kořeny rostlin, je řazena mezi významné mezidruhové interakce. Udává se, že v této symbióze žije kolem 90% terestrických cévnatých rostlin. Arbuskulární mykorhiza (AM) je nejčastěji se vyskytujícím druhem mykorhizy a zároveň nejčastějším druhem symbiózy u vyšších rostlin. Tvoří ji přibližně 80% všech rostlinných druhů. Symbiotickým soužitím s houbou rostlina často získává výhody, jako jsou například vyšší odolnost vůči stresovým faktorům, rezistence k patogenům či zlepšení příjmu živin. V posledních letech řada prací zjišťuje, že mykorhiza pozitivně ovlivňuje produkci sekundárních metabolitů rostlin. Tento vliv se může projevovat jak kvantitativně, zvýšením koncentrace metabolitu v rostlině, tak i kvalitativně, změnou spektra produkovaných látek. Tyto látky mohou mít pro člověka význam v různých oblastech. Medicínský výzkum stále rozšiřuje spektrum látek, vyznačujících se bioaktivním účinkem, jež mají původ právě v rostlinném sekundárním metabolismu. Cílem této práce je formou literární rešerše vytvořit přehled současného stavu výzkumu, týkajícího se vlivu mykorhizní symbiózy na obsah sekundárních metabolitů v rostlinách, především těch s bioaktivním účinkem. V práci bude popsán význam mykorhizní symbiózy a jaký je její vliv na...
|
|
Biologická aktivita obsahových látek rostlin I. Vliv látek na některé zástupce rodu Eimeria
Kvapilová, Jana ; Opletal, Lubomír (vedoucí práce) ; Tilšer, Ivan (oponent)
SOUHRN K přípravě extraktů a následnému testování bylo na základě literatury vybráno několik drog - Caryophylli flos, Curcumae longae radix, Ocimi sancti herba, Origani herba a jedna izolovaná substance knicin (z Cardui benedicti herba). Z těchto drog jsem metodou kontinuální extrakce (perkolace) připravila extrakty a poté u nich stanovila sušinu. Potřebné množství zhomogenizovaného extraktu jsem sorbovala na celozrnnou mouku tak, aby v konečném množství roztěru 200 g byly nasorbovány 2 g suchého extraktu a byl dokonale homogenní. Tento roztěr byl dispergován do krmiva pro myši a krysy tak, aby výsledná koncentrace byla 100 ppm. V případě knicinu jsem obdržela již izolovanou substanci, příprava roztěru probíhala obdobným způsobem. Každý z extraktů a knicin byly testovány v jednom experimentu, jehož délka se pohybovala kolem asi 7 - 8 dnů. Testovaná látka byla podávána pokusné skupině zvířat (mastomyši a myši CD1) v krmivu, kontrolní skupina zvířat dostávala stejné krmivo, ale bez přídavku testované látky. Kokcidiostatický efekt se zjišťoval jako rozdíl v kvantitě vylučovaných oocyst mezi testovanou a kontrolní skupinou. Dle grafu 19 je patrné, že nejlepší kokcidiostatickou aktivitu vykazovaly tři extrakty připravené z drog Ocimi sancti herba, Caryophylli flos a Origani herba. U Ocimi sancti herba bylo...
|
|
Urban interfaces & extensions: sensors, chips, and ad-hoc networks as tools for urban culture
Peterová, Radka ; Kera, Denisa (vedoucí práce) ; Šlerka, Josef (oponent)
Diplomová práce navrhuje DIY přístup k měření znečištění ovzduší, který oživí vztah a zájem lidí o městské prostředí, v němž žijí. Jsou popsány dosavadní měřící metody a komunikace dat ze strany oficiálních institucí a na jejich základě je představen koncept participativního snímání ovzduší osobními mobilními zařízeními. Technologický pokrok sensorů, výpočetní síly, skladování dat a možnosti komunikace dat disponují nyní potenciálem proměnit všudypřítomná mobilní zařízení jako jsou telefony, PDA nebo iPady v globální mobilní snímací zařízení a umožnit participativní paradigma zapojování "amatérů" do sběru dat. Teorie je ověřena na prototypu s výměnným senzorem, v našem případě měřícím koncentrace oxidu uhelnatého, který nabízí jednoduché řešení jak získávat informace o své aktuální expozici, jak ji zaznamenávat a na základě získaných dat případně reagovat. Tvrdíme, že takováto data lidem umožní nové typy interakce s prostředím, zvýší povědomí o zdrojích znečištění a potenciálně umožní i změny v chování nebo podnítí komunitní kampaně. Na základě dotazníku a rozhovorů identifikujeme výhody a nevýhody takovéhoto amatérského sběru dat a zároveň definujeme požadavky na design a funkčnost budoucích mobilních zařízení ke snímání prostředí.
|
|
Enterohepatic circulation of bilirubin
Zelenka, Jaroslav ; Vítek, Libor (vedoucí práce) ; Entlicher, Gustav (oponent) ; Červinková, Zuzana (oponent)
Bilirubin, hlavní produkt degradace hemu, působí fyziologicky jako antioxidant, zatímco ve vysokých koncentracích může být neurotoxický. Z těla je vylučován jako součást žluči do střeva, kde zůstává vázán na střevní obsah a je postupně metabolizován střevní mikroflórou. Část bilirubinu je resorbována zpět do oběhu a prochází tzv. enterohepatální cirkulací (EHC). Náplní této disertační práce je studium metabolismu a EHC bilirubinu. Bilirubin se ve střevě váže s dvoumocnými kationty a tím je utlumena jeho EHC. Nicméně případné terapeutické podávání takových látek může ovlivnit metabolismus anorganických iontů v těle. Výsledky naší první studie ukazují, že pokud byly Gunnovy krysy s vrozenou hyperbilirubinémií krmeny nerozpustným metakrylanem zinečnatým, jejich hladiny sérového bilirubinu poklesly, zatímco koncentrace zinku v krvi zůstala nezměněna a zároveň se neobjevily žádné patologické změny trávicího traktu. EHC bilirubinu je významně ovlivněna také rychlostí redukce bilirubinu střevní mikroflórou, především bakteriemi rodu Clostridium. V naší druhé studii jsme na Gunnových krysách prokázali, že antibiotická terapie vedoucí k eliminaci střevních klostridií vedla k významnému vzrůstu hyperbilirubinémie, zatímco následná kolonizace kmenem C. perfringens s vysokou aktivitou enzymů redukujících bilirubin...
|
|
Objemové změny astrocytů u alfa-syntrofin deficientních myší
Mikešová, Michaela ; Anděrová, Miroslava (vedoucí práce) ; Vargová, Lýdia (oponent)
(CZ) Jednou ze závažných komplikací ischemického a traumatického poškození mozku je vývoj mozkového edému, který vzniká v důsledku narušení iontové homeostázy, což vede k uvolnění velkého množství K+ a neurotransmiterů do extracelulárního prostoru. Zvýšený příjem osmoticky aktivních látek, který je zprostředkován především astrocyty, je kompenzován intracelulární akumulací vody, která rychle proniká do astrocytů prostřednictvím aquaporinu-4 (AQP4). Bylo prokázáno, že změna lokalizace AQP4 v membráně astrocytů prostřednictvím delece genu pro α-sytrofin, jehož protein je zodpovědný za lokalizaci AQP4 v perivaskulárních membránách astrocytů (Neely et al. 2001), má za následek snížení edemického nárůstu mozkové tkáně a pomalejší vychytávání K+ z extracelulárního prostoru (Amiry-Moghaddam et al. 2003). Cílem práce bylo objasnit, jak delece genu pro α-sytrofin ovlivní objemové změny kortikálních astrocytů v průběhu jejich vystavení modelovým patologickým stavům, jako je hypoosmotický a hyperosmotický stres, zvýšená koncentrace extracelulárního K+ (10mM K+ ) a deprivace glukózou a kyslíkem (OGD). Pro vizualizaci jednotlivých astrocytů, které postrádají protein α-syntrofin, jsme křížením GFAP/EGFP myší a α-syntrofin deficientních (α-Syn-/- ) myší vytvořili nový dvojitě- transgenní kmen GFAP/EGFP/α-Syn-/-...
|
|
Vyhledávání biologicky aktivních rostlinných sekundárních metabolitů: testy antioxidační a antiagregační aktivity
Řeháková, Zuzana ; Jahodář, Luděk (vedoucí práce) ; Semecký, Vladimír (oponent) ; Grančai, Daniel (oponent)
SOUHRN Z široké skupiny strukturně rozdílných látek přírodního původu (popř. rostlinných extraktů) a jejich syntetických analogů byly vyhledávány takové látky, které by vykazovaly výrazný antioxidační účinek a které by zároveň disponovaly jinými, terapeuticky využitelnými účinky (antiagregační aktivitou). Radikál zhášecí aktivita látek a extraktů byla měřena pomocí modifikovaného DPPH testu využívajícího programovatelného SIA (sekvenční injekční analýza) systému. Výrazný radikál zhášecí účinek vykázaly látky typu polyfenolů, zejména kyselina gallová (EC50= 0,0025 ± 0,002 mg/ml) a ethyl-gallát (EC50= 0,0038 ± 0,001 mg/ml). Také čistý latex Croton lechleri vykázal radikál zhášecí aktivitu (EC50= 0,0347 ± 0,018 mg/ml). Z testovaných methylkumarinů vykázaly excelentní antioxidační aktivitu orthodihydroxy- 4-methylkumariny, konkrétně 7,8-dihydroxy-4-methylkumarin a jeho deriváty (EC50= 24,9 ± 2,7 μM). Antioxidační aktivita byla dále testována pomocí FRAP metody modifikované za využití mikrodestiček typu P 400 μl. Z testovaných kumarinů vykázaly rovněž (stejně jako v DPPH testu) ortho-dihydroxy-4-methylkumariny výrazný antioxidační účinek. Antiagregační aktivita byla hodnocena in vitro na lidských trombocytech v plazmě bohaté na destičky (PRP, platelets rich plasma; 250×109 destiček/l). Použitá koncentrace...
|
|
Studium metabolismu vzdušných polutantů a mutagenů 3-nitrobenzanthronu a 2-nitrobenzanthronu
Čechová, Tereza ; Stiborová, Marie (vedoucí práce) ; Martínek, Václav (oponent)
Aromatické nitrosloučeniny jsou látky přítomné ve všech složkách životního prostředí. Jsou považovány za jeho toxické a karcinogenní kontaminanty. Většina nitroaromátů vykazuje v bakteriálních a savčích systémech mutagenní aktivitu. Existují karcinogeny vyvolávající nádorové procesy, především v játrech, plicích a prsních žlázách. 3-Nitrobenzanthron (3-NBA, 3-nitro-7H-benz[de]anthracen-7-on) je jednou z polycyklických aromatických nitrosloučenin s vysokými toxickými účinky. 3-NBA se vyskytuje ve složkách životního prostředí a je přítomný i ve výfukových plynech, byl také detekován v půdě a jeho výskyt byl prokázán i v dešťové vodě. 2 Nitrobenzanthron (2-NBA, 2-nitro-7H-benz[de]anthracen-7-on) je izomerem 3-NBA nalezeným jako polutant znečištěného ovzduší. I když je 2-NBA látkou slabě toxickou, jeho vysoká koncentrace v ovzduší by mohla představovat vysoké zdravotní riziko pro lidskou populaci. Diplomová práce rozšiřuje poznatky o metabolismu 3-NBA a jeho izomeru 2 NBA za anaerobních a aerobních podmínek. Ke studiu metabolismu těchto látek byly využívány jaterní mikrosomální systémy kontrolních potkanů (nepremedikovaných žádným induktorem cytochromů P450 - CYP) a potkanů premedikovaných Sudanem I, -naftoflavonem, fenobarbitalem, ethanolem a pregnenolon 16-karbonitrilem (PCN), látek, které indukují CYP 1A,...
|
|
Antimikrobní aktivita selektivních inhibitorů zpětného vychytávání serotoninu
Vlach, Jaromír ; Jílek, Petr (vedoucí práce) ; Buchta, Vladimír (oponent)
1. Souhrn V naší práci jsme prokázali, že paroxetin a fluoxetin, látky ze skupiny selektivních inhibitorů zpětného vychytávání serotoninu (SSRI), mají antibakteriální účinek proti širokému spektru bakteriálních kmenů. Stanovili jsme minimální inhibiční koncentrace (MIC) obou látek mikrodiluční metodou v bujónu. MIC pro jednotlivé kmeny se pohybovaly v řádech desítek až stovek mg/l. Hodnoty MIC jsou vyšší v porovnání s průměrnými plazmatickými hladinami paroxetinu a fluoxetinu (desítky až stovky μg/l). Plazmatické hladiny však mohou stačit k ovlivnění patogenity mikroorganismu. Za určitých okolností, např. při kumulaci v centrálním nervovém sytému se mohou koncentrace in vivo blížit MIC stanoveným in vitro. SSRI vykazují aktivitu i proti houbám, rodům Candida a Aspergillus. Tyto látky jsou schopny potencovat účinek klasických antibiotik a zvrátit rezistenci odolných mikroorganismů. Svým působením na hladinu serotoninu v těle a inhibicí tvorby prostaglandinů ovlivňují a podporují činnost imunitního systému. SSRI mohou být nadějnou skupinou pro léčbu infekčních nemocí, mohou se stát užitečným doplňkem a alternativou stávajícím terapeutickým postupům, je však třeba je podrobit dalším a detailnějším výzkumům.
|
host ::
