|
Možnosti ovlivnění odpovědi buněk přirozené imunity na gliadin
Drašarová, Hana ; Tučková, Ludmila (vedoucí práce) ; Bezouška, Karel (oponent)
Celiakie je chronické zánětlivé onemocnění sliznice tenkého střeva, které se projevuje u geneticky predisponovaných jedinců po požití stravy obsahující lepek. Doposud zůstává jedinou možnou léčbou celiakie celoživotní vyloučení lepku ze stravy. Jednou ze zcela nových terapeutických strategií je použití syntetického polymeru P(HEMA-co-SS), který v gastrointestinálním traktu specificky vyvazuje gliadin a ruší tak jeho škodlivé působení na střevní sliznici. Provedené in vitro testy účinků P(HEMA- co-SS) na lidské PBMC a střevní biopsie ukázaly, že potenciální terapeutická schopnost P(HEMA-co-SS) je velmi ovlivněna stupněm proteolytického zpracování obou komponent a také rozdílnou časovou aplikací P(HEMA-co-SS) do organismu oproti lepku. Další uvažovanou podpůrnou léčbou celiakie je používání prospěšných probiotických bakteriálních kmenů. Naše pokusy vycházely z poznatku skupiny Prof. Y. Sánz, že se liší složení bakteriální flory u pacientů s aktivní formou celiakie, u pacientů léčených bezlepkovou dietou a u zdravých jedinců. Ve spolupráci s touto skupinou jsme testovali účinek vybraných bakteriálních kmenů izolovaných z pacientů s celiakií a probiotických bakteriální kmenů na odpověď buněk přirozené imunity na gliadin. Provedené in vitro pokusy s lidskými dendritickými buňkami ukázaly, že přítomnost...
|
|
Characterization of N-demethyllincomycin-methyltransferase.
Poľan, Marek ; Najmanová, Lucie (vedoucí práce) ; Petříčková, Kateřina (oponent)
Linkomycín je prírodne antibiotikum zaradené do skupiny linkozamidových antibiotík, ktorého zhluk biosyntetických génov je známy a funkcia mnohých génov z tohto zhluku už bola popísaná. Táto práca je zameraná na štúdium záverečného kroku bisyntetickej dráhy linkomycínu, metyláciu na dusíku pyrolového reťazca propylprolínovej podjednotky N-demetyllinkomycínu (NDL). Cieľom práce bolo charakterizovať enzým LmbJ, katalyzujúci tento biosyntetický krok. Všetky stanovenia boli uskutočnené pre enzým LmbJ s histidínovou kotvou, ktorý bol pripravený heterológnou expresiou v bunkách Escherichia coli. Bolo stanovené teplotné a pH optimum metylačnej reakcie, rovnako ako Michelisove konštanty pre oba substráty reakcie: N-demetyllinkomycín a S-adenozylmetionín (SAM - donor metylovej skupiny). S výnimkou pH optima se všetky stanovené parametre výrazne odlišovali od publikovaných údajov pre enzým izolovaný z prirodzeného zdroja. Na základe porovnania výsledkov elektrónovej mikroskopie, natívnej elektroforézy a gélovej filtrácie bol vytvorený predpokladaný model kvartérnej štruktúry enzýmu. Na rozdiel od väčšiny doteraz popísaných metyltransferáz, ktoré sa vyskytujú v monomérnej, dimérnej alebo tetramérnej forme, sa v našom prípade jedná s najväčšou pravdepodobnosťou o hexamér.
|
|
Fytoplankton experimentálních tůní: kolonizace a sezónní vývoj
Hrušková, Lenka ; Nedbalová, Linda (vedoucí práce) ; Lukavský, Jaromír (oponent)
Uměl tůně představuj" ide…ln" syst my pro studium ekologie fytoplanktonu, umožňuj" opakovan nastolen" poč…tečn"ch podm"nek a dostatečn množstv" opakov…n" u nez…visl‰ch experiment…ln"ch jednotek v komplexn"ch pokusech k testov…n" hypot z o kontrole struktury a funkci př"rodn"ch společenstev. V CHKO Kokoř"nsko bylo vytvořeno 20 experiment…ln"ch tůn", z nichž jsem zpracovala vzorky fytoplanktonu, tento v‰zkum byl souč…st" projektu EU BIOPOOL. Během prvn"ch dvou let po naplněn" tůn" jsem zkoumala kolonizaci a sezŠnn" v‰voj společenstev fytoplanktonu v tůn"ch. Provedla jsem kvalitativn" anal‰zu fytoplanktonu tůn", pot jsem stanovila relativn" početnost jednotliv‰ch taxonů. Data o druhov m složen" jsem porovnala s naměřen‰mi parametry prostřed" (teplota, koncentrace kysl"ku, pH, konduktivita, průhlednost, hloubka, koncentrace chlorofylu a, z…stin a zooplankton). Tůně měly na jaře 2007 periodick‰ charakter a jejich v‰voj v čase (‹norduben) byl podobn‰, dominovaly n…sleduj"c" taxonomick skupiny: Dinophyta, Chrysophyta, Cryptophyta a Euglenophyta. Po instalaci fŠli" na dno v červenci 2007 měly tůně trval‰ charakter, z hlediska parametrů prostřed" se jednotliv tůně lišily v konduktivitě, koncentraci kysl"ku, průhlednosti, hloubce, koncentraci chlorofylu a, v druhov bohatosti a složen" zooplanktonu. V...
|
|
Funkční diagnostika hráček ledního hokeje
Zajícová, Veronika ; Heller, Jan (vedoucí práce) ; Perič, Tomáš (oponent)
Název: Zátěžová diagnostika hráček ledního hokeje −−−− Wingate test Cíle: Studie je zaměřena na porovnání antropometrických charakteristik a anaerobní výkonnosti s využitím parametrů 30s Wingate testu u hráček ledního hokeje a hráčů ledního hokeje ve věku 15, 16 a 17 let. Práce má na základě tohoto testu vytvořit obraz o výkonnostní úrovni hráček reprezentace a pro přehlednost tyto výsledky porovnat s těmito třemi věkovými kategoriemi chlapců. Součástí studie je vyhodnocení dotazníku, který měl za úkol získat informace o hokejových zkušenostech těchto hráček. U vybrané skupiny reprezentačních hráček ve věku od 14-26 let (x = 17,8 ± 3,7) byl proveden zátěžový anaerobní 30s Wingate test. Výsledky této skupiny byly porovnány s výsledky tří věkových kategorií hokejistů ve věku 15, 16 a 17 let (x = 14,98 ± 0,81; x = 16,03 ± 0,41; x = 17 ± 0,35). Pracovní hypotézy předpokládaly, že v ukazatelích anaerobní kapacity mezi hráčkami a hráči ve věku 15, 16 a 17 let nebudou rozdíly. Metody: U všech čtyř souborů (žen a 15, 16, 17letých chlapců) jsou vypočítány základní statistické charakteristiky (x-průměr a SD-směrodatná odchylka). Statistická významnost rozdílů průměrných hodnot parametrů mezi soubory byla testována T-testem (též znám jako Studentův test) pro nepárové hodnoty. Byl stanoven stupeň volnosti (v)...
|
|
Studium transportních mechanismů pro xenobiotika
Richtrová, Monika ; Trejtnar, František (vedoucí práce) ; Melicharová, Ludmila (oponent)
Cíl: Diplomová práce byla zaměřena na využití izolovaných potkaních ledvinných buněk ke studiu transportních mechanizmů vybraných receptorově specifických peptidů ze skupiny analogů somatostatinu značených vhodnými radionuklidy - 111In-DOTA-oktreotátu a 125IDOTA- oktreotátu. Byl proveden pokus s vybranými modelovými látkami sacharózou a metylglukózou jako markerů pasivního a aktivního transportu. Průběh akumulace metylglukózy byl zkoušen v ledvinných a pankreatických buňkách. Dále byla studována akumulace radiopeptidů v přítomnosti potenciálních inhibitorů, které by mohly snížit retenci daných radiopeptidů a tím i klinicky nežádoucí radiotoxické poškození ledvin. Metody: Izolované ledvinné buňky potkana byly získány kolagenázovou metodou. Pankreatické exokrinní potkaní buňky byly získány z buněčné linie nádorových buněk. Životnost buněk byla zjištěna testem s trypanovou modří. Míra akumulace modelových látek byla porovnána s mírou akumulace daných radiopeptidů 111In-DOTA-oktreotátu a 125I- DOTAoktreotátu. Povaha transportu byla sledována i za nízkých teplot. Megalin/kubilinový membránový transportní systém byl studován pomocí jejich ligandů (např. albumin, gentamicin), které by kompeticí při transportu mohly inhibovat akumulaci zkoumaných radiopeptidů. Výsledky: Životnost buněk byla dostatečně...
|
|
Šikana na základní škole
Šťastná, Leona ; Stará, Jana (vedoucí práce) ; Hejlová, Helena (oponent)
Diplomová práce "Šikana na základní škole" se v teoretické části zabývá obecnou analýzou problematiky šikany na základní škole, dále pak příčinami šikany, jejími protagonisty, následky setkávání se šikanou pro oběti, agresory a svědky šikany. Samostatná část této kapitoly je věnována také doporučeným strategiím a postupům pro předcházení šikany na školách. V praktické části je práce zaměřena na zjišťování názorů učitelů na způsoby předcházení a řešení šikany na škole. Produktem diplomové práce je informační leták pro učitele, který shrnuje základní "mýty" o šikaně a uvádí relevantní informace, které tyto mýty vyvracejí. V přílohách jsou uvedeny některé doplňující informace o druzích šikanování s popisem příkladů, dále pak informační leták pro děti a mládež, co dělat v případě, jsou-li šikanováni, najdeme zde také přehled stádií negativního vývoje skupiny, dotazníky, které učitelé vyplňovali pro empirickou část a konečně zmíněný leták pro učitele o "mýtech" s šikanou spojených.
|
|
Využití interaktivní tabule při výuce na 1. stupni ZŠ
Koppová, Danuše ; Wildová, Radka (vedoucí práce) ; Křivánek, Zdeněk (oponent)
Diplomová práce má název "Využití interaktivní tabule při výuce na 1. stupni ZŠ". Zabývá se výukou žáků mladšího školního věku. Hodnotí vhodnost a možnosti využití interaktivní tabule při výuce žáků právě této věkové skupiny. Práce žáků s interaktivní tabulí je patrná z přiložených videoukázek a fotografií. K těmto videoukázkám a fotografiím patří popisy jednotlivých částí hodin, ve kterých byla interaktivní tabule využita. V diplomové práci je také zmíněn způsob získávání, využití a dlouhodobého uchování prezentací pro jednotlivá téma výuky. Součástí závěru diplomové práce je shrnutí poznatků týkajících se využití interaktivní tabule při vyučovacích hodinách s žáky mladšího školního věku.
|
|
Interakce přírodních látek s molekulou HSA
Nováková, Anežka ; Dršata, Jaroslav (oponent) ; Boušová, Iva (vedoucí práce)
Vypracovala: Anežka Nováková Místo vypracování: Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Vedoucí diplomové práce: PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Název: Interakce přírodních látek s molekulou HSA Předkládaná diplomová práce se zabývá interakcí vybraných přírodních látek (apigenin, naringenin, kaempferol) s molekulou lidského sérového albuminu. V úvodních experimentech jsem pomocí UV-VIS absorpční spektroskopie sledovala stabilitu zadaných antioxidantů za fyziologických podmínek v průběhu času. Následně jsem pomocí stejné metody zjišťovala, jaký vliv má na stabilitu rozdílná teplota uchovávání. Vlastní interakci vybraných antioxidantů s molekulou albuminu jsem sledovala pomocí UV-VIS absorpční spektroskopie a fluorescenční spektroskopie. Fluorimetrická titrace prokázala, že zmíněné antioxidanty zhášejí tryptofanovou fluorescenci v molekule lidského albuminu. Pomocí Stern-Volmerovy analýzy jsem zjistila, že v rozsahu počátečních koncentrací antioxidantů (2,5 - 10 µM), byl mechanismus zhášení fluorescence statický. Vypočítané vazebné parametry antioxidantů poskytly konkrétnější informace o jejich interakci s albuminem a odhalily vztah mezi jejich chemickou strukturou a afinitou k albuminu. Přítomnost 3-OH skupiny společně s 2,3 nenasyceným kruhem C (struktura kaempferolu)...
|
|
Heterologní exprese ABC transportéru v Catharanthus Roseus (L.) G. Don
Pomahačová, Barbora ; Dušková, Jiřina (vedoucí práce) ; Tůmová, Lenka (oponent) ; Grančai, Daniel (oponent)
SOUHRN předložené práci je studovaná problematika transportu jako limitujícího faktoru v biosyntéze sekundárních metabolitů rostlin. Jako modelový rostlinný systém byl vybrán Catharanthus roseus (L.) G. Don. Zástupcem aktivního transportéru byl vybrán CjMDR1, člen ABC (ATP-Binding Cassette) protein superfamily, jež je výhradním transportérem berberinu v jeho produkující rostlině, Coptis japonica. Získaná data jsou uvedena v následujících bodech. 1. Transport berberinu v nativní suspenzní kultuře katarantu růžového nevykazuje závislost na ATP a vzhledem k inhibičním studiím není substrátem pro nativní ABC transportéry katarantu. Konkrétní mechanismus transportu berberinu na vakuolární či buněčné úrovni se nepodařilo odhalit. Díky vlivu pH na plasmatické membráně na transport berberinu by se mohlo podobně jako v jiných heterologních rostlinách jednat o H+-antiport berberinu anebo effluxní přenašeč patřící do skupiny MATE (multidrug and toxic compound extrusion) (Yazaki, 2005). 2. Biolistickou metodou, mikroprojektilovým bombardováním, byla připravena transgenní kultura katarantu růžového. Transgen pocházel z matečné rostliny Coptis japonica a jednalo se o plasmatický ABC transportér. 3. U obou transgenních systémů, s chemicky indukovatelnou expresí i s konstitutivní expresí transgenu, byla studovaná intenzita...
|
|
Vliv polyfenolických látek na hladký cevní sval
Najmanová, Iveta ; Mladěnka, Přemysl (vedoucí práce) ; Tůmová, Lenka (oponent) ; Klimas, Ján (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Mgr. Iveta Najmanová Školitel: doc. PharmDr. Přemysl Mladěnka, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Marie Vopršalová, CSc. Název disertační práce: Vliv polyfenolických látek na hladký cévní sval Polyfenolické látky jsou jedny z nejrozšířenějších sekundárních metabolitů rostlin. Patří mezi ně široké spektrum látek od jednoduchých látek s jedním benzenovým jádrem až po polymerní sloučeniny. Pro tuto dizertační práci byly vybrány dvě skupiny, a to kumariny a flavonoidy. Cílem práce bylo zjistit jejich vliv na hladký cévní sval v in vitro a in vivo podmínkách. V případě kumarinů toho bylo dosaženo sepsáním reviálního článku. Vliv flavonoidů včetně jejich metabolitů byl experimentálně otestován a některé výsledky již byly publikovány. Prvním krokem mého výzkumu bylo provést screening metabolitů kvercetinu, nejvíce se vyskytujícího flavonolu v lidské potravě, a zjistit jejich vasorelaxační potenciál. Testování bylo prováděno na isolované hrudní aortě potkana. Při tomto testování byl jednoznačně nejúčinnější metabolit kyselina 3-(3-hydroxyfenyl)propionová (3-HPPA), která byla minimálně o řád účinnější než vlastní kvercetin a další metabolity (zejména kyselina 3,4- dihydroxyfenyloctová a 4-methylkatechol)....
|
host ::
