|
|
Biotransformace sekundárních rostlinných metabolitů a jejich modulační účinky na enzymy metabolizující léčiva
Šadibolová, Michaela ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Soukup, Ondřej (oponent) ; Anzenbacherová, Eva (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Školicí pracoviště Katedra biochemických věd Doktorský studijní program Xenobiochemie a patobiochemie Kandidátka / kandidát Mgr. Michaela Šadibolová Školitelka / školitel doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Konzultantka / konzultant Název disertační práce Biotransformácia sekundárnych rastlinných metabolitov a ich modulačné účinky na enzýmy metabolizujúce liečivá Seskviterpény a prenylované flavonoidy predstavujú dve triedy rastlinných sekundárnych metabolitov tvoriace prirodzenú súčasť ľudskej stravy. Majú mnoho prospešných biologických účinkov a sú podľa toho využívané ako aktívne súčasti rastlinných prípravkov. Ako xenobiotiká ale interagujú s množstvom enzýmov metabolizujúcich liečivá, môžu obratom meniť ich aktivitu a/alebo expresiu, čo môže následne vyústiť do liekových interakcií. Seskviterpény a prenylflavonoidy zmienené v tejto dizertácii sú v tomto aspekte málo preskúmané. Tri acyklické seskviterpény (farnezol, cis-nerolidol, trans-nerolidol) a tri cyklické seskviterpény (α-humulén, β-karyofylén, β-karyofylénoxid) aktivovali génovú expresiu sprostredkovanú pregnanovým X receptorom, no nespôsobili významné zmeny v mRNA alebo proteínovej expresii jeho cieľových génov, cytochrómu P450 (CYP) 3A4 a CYP2C, a neovplyvnili ani hlavné...
|
|
|
Exprese a aktivity antioxidačních enzymů v in vivo modelech nealkoholové tukové choroby jater
Sochová, Gabriela ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Gabriela Sochová Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Konzultant: Mgr. Gabriela Svobodová Název diplomové práce: Exprese a aktivity antioxidačních enzymů v in vivo modelech nealkoholové tukové choroby jater Nealkoholová tuková choroba jater je jedno z nejčastějších jaterních onemocnění. Toto onemocnění je způsobeno nerovnováhou mezi příjmem tuků a jejich degradací. Akumulace lipidů může být způsobena několika faktory (genetická predispozice, dieta, metabolická onemocnění atd.). Pokud tyto podněty působí dostatečně dlouhou dobu, může onemocnění vést k jaterní fibróze až cirhóze. Cílem této diplomové práce bylo porovnat expresi a aktivitu antioxidačních enzymů glutathion-S-transferasy (GST), glutathionperoxidasy (GPx), glutathionreduktasy (GR), superoxiddismutasy (SOD) a katalasy ve dvou modelech NAFLD (dietní model (K) - dieta s vysokým obsahem tuku, fruktózy a cholesterolu (FFC); chemický model - navození glutamátem monosodným (MSG)). Dále byl v těchto modelech zjišťován vliv LiPR31 a liraglutidu na expresi a aktivitu antioxidačních enzymů. Exprese a aktivita byly stanoveny ve 20.000×g supernatantu z myších jater. Pro stanovení relativní exprese mRNA byla použita metoda RT-qPCR. Exprese proteinu byla...
|
|
|
Studium transportní aktivity P-glykoproteinu - 9.2 vlasovky slezové
Kohoutová, Kateřina ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Kateřina Kohoutová Školitel: doc. Ing. Petra Matoušková, PhD. Název diplomové práce: Studium transportní aktivity P-glykoproteinu-9.2 vlasovky slezové Hemonchóza je globálně rozšířené onemocnění postihující drobné přežvýkavce. Původcem tohoto onemocnění je gastrointestinální hlístice vlasovka slezová (Haemonchus contortus), která se živí krví svého hostitele. Terapie hemonchóz pomocí anthelmintik je komplikována celosvětově se rozšiřující rezistencí. Jednou z možných příčin rozvoje anthelmintické rezistence je snížení koncentrace anthelmintika v organismu červa v důsledku zvýšené exprese P-glykoproteinů z nadrodiny ABC transportérů. Studium transportní aktivity těchto transportérů by mohlo pomoci pochopit mechanismus rozvoje rezistence a zefektivnit léčbu hemonchóz. Cílem předložené diplomové práce bylo charakterizovat transportní aktivitu P-glykoproteinu-9.2 a jeho interakci s vybraným inhibitorem pomocí heterologního expresního systému. Adherentní buněčná linie HEK293 byla transfekována plazmidem nesoucím gen Pgp-9.2 vlasovky slezové. Úspěšná exprese byla ověřena dot blotem. Transportní eseje bohužel poukazovaly na neschopnost P-glykoproteinu-9.2 přenášet substráty skrz buněčnou membránu v použité...
|
|
|
Interakce antiretrovirálních léčiv s membránovými transportéry
Martinec, Ondřej ; Červený, Lukáš (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent) ; Chládek, Jaroslav (oponent)
Univerzita Kalova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Mgr. Ondřej Martinec Školitel: doc. PharmDr. Lukáš Červený, Ph.D. Název disertační práce: Interakce antiretrovirálních léčiv s membránovými transportéry Perorální podávání léčiv je nejběžnější, nejpohodlnější a nejekonomičtější formou aplikace léčiv. Absorpce perorálně podaných léčiv probíhá zejména ve střevě. Jedním z faktorů ovlivňujících střevní absorpci jsou efluxní lékové ABC transportéry lokalizované na apikální membráně střevního epitelu, přičemž dosud nedůležitější se zdá být p-glykoprotein (ABCB1) a breast cancer resistance protein (ABCG2). Pacienti infikovaní HIV jsou odkázáni na celoživotní farmakoterapii, zahrnující kombinaci tří a více antiretrovirotik. Častou ko-infekcí HIV je hepatitida C (HCV). Díky postupnému stárnutí je navíc HIV pozitivní populace zatížena i dalšími komorbiditami. To vše vede u těchto pacientů k nutnosti indikace polyfarmakoterapie, a tedy zvýšenému riziku lékových interakcí. Řada užívaných antiretrovirotik je substrátem, inhibitorem a/nebo induktorem ABCB1. Proto lze předpokládat, že budou kvantitativně ovlivňovat střevní absorpci současně podaných léčiv (substrátů ABCB1), a tím přispívat k efektivitě/bezpečnosti léčby. V rámci řešení disertační práce jsme se...
|
|
|
Metabolismus a transport 6-prenylnaringeninu in vitro
Horní, Martin ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Raisová Stuchlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Martin Horní Školitel: doc. PharmDr. Boušová Iva, Ph.D. Konzultant: Mgr. Michaela Šadibolová Název diplomové práce: Metabolismus a transport 6-prenylnaringeninu in vitro Prenylflavonoidy představují skupinu rostlinných sekundárních metabolitů s řadou pozitivních účinků na lidské zdraví. Chmel otáčivý (Humulus lupulus L.) představuje bohatý zdroj prenylflavonoidů včetně 6-prenylnaringeninu (6-PN). 6-PN má řadu biologických účinků včetně analgetické, antiproliferativní a estrogen-modulační aktivity. I přes jeho potenciál být využit jako nutraceutikum, jsou farmakokinetické vlastnosti 6-PN stále neznámé. Tato diplomová práce měla proto dva cíle. Prvním cílem bylo stanovit jaterní a střevní metabolismus 6-PN u lidí a jaterní metabolismus 6-PN u potkanů a myší in vitro v modelu ultratenkých tkáňových řezů (PCTS). Vzorky byly analyzovány pomocí UHPLC-MS/MS. 6-PN byl metabolizován převážně na metabolity II. fáze biotransformace se čtyřmi glukuronidy a čtyřmi sulfáty identifikovanými ve studovaných PCTS. Poprvé byl identifikován nový metabolit 6-PN vznikající současnou glukuronidací a sulfatací, který nebyl dosud identifikován u jiných strukturně podobných chmelových prenylflavonoidů. Sulfonace probíhala ve...
|
|
|
Antiproliferativní a anthelmintické účinky extraktů z kapradin
Turoňová, Petra ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Petra Turoňová Školitel: doc. Ing. Petra Matoušková, PhD. Název diplomové práce: Antiproliferativní a anthelmintické účinky extraktů z kapradin Kapradiny patří mezi vyšší výtrusné cévnaté rostliny. V této práci byly zkoumány antiproliferativní a anthelmintické účinky extraktů vybraných druhů kapradin. Antiproliferativní účinky extraktů byly testovány na buněčné linii SW480. Jedná se o buněčnou linii původně získanou z primárního adenokarcinomu tlustého střeva. Anthelmintické účinky extraktů byly studovány na larvách L3 Haemonchus contortus, což je nejrozšířenější vnitřní parazit ovcí a koz. Pro zjištění antiproliferativní aktivity extraktů byl nejprve proveden úvodní screening více druhů kapradin o dvou koncentracích. Cytotoxicita byla vyhodnocena změřením absorbance na spektrofotometru Tecan. Čtyři druhy kapradin, které vykazovaly nejslibnější antiproliferativní aktivitu byly podrobeny testování ve třech časových intervalech a čtyřech koncentracích. Larvy L3 H. contortus byly vystaveny extraktům kapradin po dobu 7 dnů a pomocí mikroskopie bylo stanoveno procento vyvinutých larev L4 z celkového množství použitých larev stádia L3. Nejvyšší antiproliferativní a anthelmintickou aktivitu vykazovaly druhy...
|
|
|
Studium transportní aktivity P-glykoproteinu - 9.2 vlasovky slezové
Kohoutová, Kateřina ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Kateřina Kohoutová Školitel: doc. Ing. Petra Matoušková, PhD. Název diplomové práce: Studium transportní aktivity P-glykoproteinu-9.2 vlasovky slezové Hemonchóza je globálně rozšířené onemocnění postihující drobné přežvýkavce. Původcem tohoto onemocnění je gastrointestinální hlístice vlasovka slezová (Haemonchus contortus), která se živí krví svého hostitele. Terapie hemonchóz pomocí anthelmintik je komplikována celosvětově se rozšiřující rezistencí. Jednou z možných příčin rozvoje anthelmintické rezistence je snížení koncentrace anthelmintika v organismu červa v důsledku zvýšené exprese P-glykoproteinů z nadrodiny ABC transportérů. Studium transportní aktivity těchto transportérů by mohlo pomoci pochopit mechanismus rozvoje rezistence a zefektivnit léčbu hemonchóz. Cílem předložené diplomové práce bylo charakterizovat transportní aktivitu P-glykoproteinu-9.2 a jeho interakci s vybraným inhibitorem pomocí heterologního expresního systému. Adherentní buněčná linie HEK293 byla transfekována plazmidem nesoucím gen Pgp-9.2 vlasovky slezové. Úspěšná exprese byla ověřena dot blotem. Transportní eseje bohužel poukazovaly na neschopnost P-glykoproteinu-9.2 přenášet substráty skrz buněčnou membránu v použité...
|
|
|
Exprese a aktivity antioxidačních enzymů v in vivo modelech nealkoholové tukové choroby jater
Sochová, Gabriela ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Gabriela Sochová Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Konzultant: Mgr. Gabriela Svobodová Název diplomové práce: Exprese a aktivity antioxidačních enzymů v in vivo modelech nealkoholové tukové choroby jater Nealkoholová tuková choroba jater je jedno z nejčastějších jaterních onemocnění. Toto onemocnění je způsobeno nerovnováhou mezi příjmem tuků a jejich degradací. Akumulace lipidů může být způsobena několika faktory (genetická predispozice, dieta, metabolická onemocnění atd.). Pokud tyto podněty působí dostatečně dlouhou dobu, může onemocnění vést k jaterní fibróze až cirhóze. Cílem této diplomové práce bylo porovnat expresi a aktivitu antioxidačních enzymů glutathion-S-transferasy (GST), glutathionperoxidasy (GPx), glutathionreduktasy (GR), superoxiddismutasy (SOD) a katalasy ve dvou modelech NAFLD (dietní model (K) - dieta s vysokým obsahem tuku, fruktózy a cholesterolu (FFC); chemický model - navození glutamátem monosodným (MSG)). Dále byl v těchto modelech zjišťován vliv LiPR31 a liraglutidu na expresi a aktivitu antioxidačních enzymů. Exprese a aktivita byly stanoveny ve 20.000×g supernatantu z myších jater. Pro stanovení relativní exprese mRNA byla použita metoda RT-qPCR. Exprese proteinu byla...
|
|
|
Účinek xanthohumolu a 6-prenylnaringeninu v in vitro modelu nealkoholové tukové choroby jater
Velecká, Eva ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Zárybnický, Tomáš (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Eva Velecká Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Konzultant: Mgr. Michaela Šadibolová Název diplomové práce: Účinek xanthohumolu a 6-prenylnaringeninu v in vitro modelu nealkoholové tukové choroby jater Nealkoholová tuková choroba jater (NAFLD) je chronické onemocnění charakterizované hromaděním triacylglycerolů (TAG) v hepatocytech zahrnující široké spektrum patologických stavů, od prosté steatózy přes nealkoholovou steatohepatitidu (NASH) až po následnou progresi k cirhóze a hepatocelulárnímu karcinomu. Xanthohumol (XH), prenylflavonoid pocházející z chmele otáčivého (Humulus lupulus), je pro své popsané antisteatotické, protizánětlivé, antifibrotické, hypolipidemické a antioxidační účinky v současnosti studován jako potenciální léčivo pro terapii NAFLD. Cílem předkládané diplomové práce bylo studovat potenciální hepatoprotektivní účinky XH a 6-prenylnaringeninu (6PN), minoritně zastoupeného prenylflavonoidu pocházejícího rovněž z chmele. Pro tyto účely byl použit myší in vitro model NAFLD, ve kterém byla steatóza indukována lipogenním médiem obsahujícím kyselinu palmitovou a olejovou, fruktózu, citrát a insulin v ultratenkých jaterních řezech (PCLS). Steatotické i nesteatotické PCLS byly...
|
|
|
Účinek flubendazolu na glioblastoma multiforme in vitro a in vivo.
Šteigerová, Monika ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Macháček, Miloslav (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Monika Šteigerová Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D., RNDr. Veronika Skarková, Ph.D. Název diplomové práce: Účinek flubendazolu na glioblastoma multiforme in vitro a in vivo. Glioblastoma multiforme (GBM) představuje nejčastější maligní gliom centrální nervové soustavy. Průměrná doba přežití se i přes systematickou komplexní terapii pohybuje okolo 14 měsíců. Anthelmintikum flubendazol (FLU), potencionální protinádorové léčivo, je nyní pro své antiproliferační účinky zkoumáno na několika typech nádorových buněk (1). Cílem našeho projektu bylo vyhodnotit vliv FLU na buněčné linie GBM U118MG (stabilizovaná buněčná linie) a GBM69 (primolinie) in vitro, na růst nádorů in vivo, a jeho efekt na úrovni mRNA a proteinů vybraných markerů epitelo-mesenchymální tranzice (EMT) a markerů rezistence. Jako pozitivní kontrola bylo použito cytostatikum první volby, temozolomid (TMZ). Obě testované buněčné linie byly v porovnání s TMZ citlivější na FLU. FLU u těchto linií také oproti TMZ způsobil výraznější morfologické změny. FLU signifikantně ovlivňoval hladiny mRNA a proteinů E-kadherinu, N-kadherinu, vimentinu a stejně tak i MGMT a MRP-1. Subkutánní ektopická implantace buněk U118MG do imunodeficitního...
|
host ::
RSS.