|
Studie retenčního chování neopterinu v HILIC chromatografickém systému s různými typy stacionárních fází
Matula, Aleš ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
NÁZEV: Studie retenčního chování neopterinu v HILIC chromatografickém systému s různými typy stacionárních fází ABSTRAKT: Předmětem této diplomové práce je vývoj analytické metody určené k identifikaci a stanovení biologicky aktivních látek biopterinu, neopterinu a 7,8-dihydroneopterinu za použití metody chromatografie hydrofilních interakcí (HILIC) ve spojení s fluorescenční detekcí. Neopterin představuje důležitý a užitečný parametr monitorování aktivace imunitního systému, který doprovází řadu infekčních a autoimunitních onemocnění. Zvýšená hladina neopterinu se vyskytuje také u různých typů malignit. V poslední době je neopterin spolu s 7,8-dihydroneopterinem spojován s intracelulárním oxidativním stresem a apoptózou buněk. Plně redukovaná forma biopterinu se v lidském organismu uplatňuje jako kofaktor některých enzymů. HILIC je varianta vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC). Testovány byly tři chromatografické kolony (LUNA HILIC, OBELISK R, OBELISK N) za různých chromatografických podmínek. Mobilní fázi tvořila směs vodné (octanový pufr, kyselina octová, voda) a s vodou mísitelné organické složky (acetonitril). Chromatografická kolona OBELISK N poskytla při užití směsi acetonitrilu a 100mM octanového pufru o pH=4,8 chromatogram se zcela separovanými píky biopterinu a neopterinu, pík...
|
|
Termální analýza interakcí epidermálních lipidů IV
Komárková, Radka ; Musilová, Marie (vedoucí práce) ; Doležal, Pavel (oponent)
Termální analýza interakcí epidermálních lipidů IV Radka Komárková, diplomová práce, červen 2009 Abstrakt Hlavní funkcí kůže je ochrana organismu před chemickým a mechanickým poškozením. Kůže se skládá z několika vrstev, z nichž nejvýznamnější bariéru tvoří nejsvrchnější část stratum corneum. Stratum corneum obsahuje buňky vyplněné keratinem, které jsou obklopené lipidovou matrix. Hlavní složkou lipidové matrix jsou ceramidy (50%), cholesterol (25%) a mastné kyseliny (10%). V současnosti se řada výzkumných prací zaměřuje na přípravu in vitro lipidických membrán a cílem této práce je zjistit, zda může koncentrace vody ovlivnit hydrataci lipofilních složek lipidické membrány. Použily jsme vzorky, které měly konstantní složení lipidické směsi (cholesterol : ceramid 14S24,1:5) a lišily se obsahem vody (75%, 50% a 25%).Tyto vzorky byly podrobeny několika cyklům chlazení a ohřevů pomocí DSC, kde byl prokázán pouze jeden směsný pík lipidické směsi. Všechny vzorky vykazovaly interakci s vodou, avšak u vzorku s 25% obsahem, to bylo spíše na hranici analytické chyby.
|
|
Sportovní činnost v interakci člověka a psa
Grbavčic, David ; Gnad, Tomáš (oponent) ; Neuman, Jan (vedoucí práce)
Název diplomové práce Sportovní činnosti v interakci člověka a psa Cíle práce Představit sportovní činnosti, odehrávající se v interakci člověka a psa. Zjistit fyziologické zatížení organismu při vybraných sportovních činnostech, ve kterých se člověk ocitá v součinnosti se psem a porovnat ho s fyziologickým zatížením jiného sportu (horské kolo). Metody Analýza odborných dokumentů. Měření srdeční frekvence (SF) prostřednictvím sporttesteru značky Polar, typ RS400, jehož program zpracovává hodnoty SF a údaje o zatížení organismu. Výsledky Výsledky z jednotlivých měření ukazují, že figurování je pro sportovce fyzicky náročnější, než je jízda na horském kole. To potvrzují rozdíly v hodnotách SF a rozdíl v čase potřebném pro zotavení organismu sportovce. Po tréninku stráveném na horském kole je zotavovací čas čtrnáct hodin. Po stejně dlouho trvajícím tréninku obran (figurování) je potřebný čas pro zotavení organismu sportovce dvacet sedm hodin. Vzhledem k různorodosti tréninkových jednotek obran a malému počtu měření považuji výsledky za orientační. Výsledky však povedou ke zkvalitnění tréninkové přípravy figurantů. Klíčová slova sport se psem, kynologie, fyziologické zatížení, figurant v obranách
|
| |
|
Mapování protein-proteinových interakcí systému cytochromu P-450 metodami chemické modifikace a hmotnostní spektrometrie
Ječmen, Tomáš ; Černá, Věra (oponent) ; Šulc, Miroslav (vedoucí práce)
Cytochromy P-450 (P450) náleží do superrodiny hemoproteinů a v organismu se podílejí na metabolismu široké škály látek, mezi které patří některá léčiva a karcinogeny. V systému oxygenas se smíšenou funkcí plní P450 funkci terminální oxygenasy. Nezbytnou součástí je také NADPH: cytochrom P450 reduktasa (CPR), která je zodpovědná za přenos dvou elektronů na P450 v průběhu jeho katalytického cyklu. Druhý elektron může místo CPR přenášet na P450 také cytochrom b5 (cyt b5). Pro pochopení reakčního mechanismu P450 je nezbytná znalost jeho terciární struktury. V současnosti je v naší laboratoři k dispozici homologní model cytochromu P-450 2B4 (CYP 2B4). Presentovaná diplomová práce měla za cíl označení vazebné domény CYP 2B4 pro cyt b5. Ke studiu bylo použito síťovací činidlo EDC tvořící amidickou vazbu mezi aminokyselinami s opačně nabitými bočními řetězci. Pomocí hmotnostní spektrometrie se nám podařilo nalézt pět párů kovalentně propojených aminokyselin. K ověření a ke zpřesnění modelu CYP 2B4 byla použita metoda fotoafinitního značení se sondou N-(p-azidobenzyl)-N-methyl-p-aminophenylaminu. Tato sloučenina se ligandově váže na centrální atom železa hemu. Po fotoaktivaci byl pomocí MS techniky nalezen adukt argininu 197 s fotoaktivovanou sondou. Oba presentované výsledky ukazují správnost zvolených metodických...
|
|
Možnosti studia (charakterizace) hemocytů měkkýšů
Jindrová, Zuzana ; Skála, Vladimír (oponent) ; Horák, Petr (vedoucí práce)
Hemocyty jsou hlavní imunitní buňky bezobratlých organismů, tedy i měkkýšů. Liší se mezi sebou jak v morfologii, tak i ve svých funkcích. Dva základní všeobecně uznávané morfologické typy, granulocyty a hyalinocyty, se odlišují mírou fagocytózy a enkapsulace, produkcí kyslíkových radikálů a oxidu dusnatého nebo přítomností některých enzymů. Existuje řada metod, pomocí kterých se hemocyty charakterizují. Mikroskopie slouží primárně ke studiu jejich morfologie. Jemné detaily v antigenním složení povrchových struktur je možné rozeznat monoklonálními protilátkami nebo lektinovými sondami. Na základě granularity a velikosti buňky se hemocyty dělí pomocí gradientové centrifugace nebo průtokové cytometrie. Produkce oxidu dusnatého a kyslíkových radikálů se sleduje dodáním vhodného substrátu, který po reakci s radikálem mění své vlastnosti. Může začít fluorescenčně zářit, změnit absorbanci roztoku nebo vytvořit viditelnou sraženinu. Další možností je využití chemiluminiscence. Cílem studia hemocytů je objasnit interakci mezi měkkýšem a jeho patogenem. 1
|
|
Souzení, vůle, chápání. Descartova Čtvrtá Meditace a otázka chybování
Klinka, Tomáš ; Hill, James (oponent) ; Palkoska, Jan (vedoucí práce)
Práce se zabývá teorií chyby a chybování v díle René Descarta a to zejména v kontextu čtvrté meditace Meditací o první .filosofii. Tuto teorii analyzuje na základě objasnění Descartovi teorie souzení a pojmů chápání a vůle. Jako hlavní problém je uvedeno: Je Descartova teorie chyby a chybování udržitelná ve světle námitek Descartových kritiků? Hlavní taková námitka zní: z postulování chyby při souzení jako neadekvátní interakci omezeného chápání a neomezené vůle vyplývá, že jsme schopni naše přesvědčení volně ovlivňovat, tedy věřit, čemu chceme, což se nezdá v souladu s naší intuicí. V závěru se však ukáže, že i tato na první pohled neintuitivní pozice je udržitelná, pokud zmíněný voluntarismus zmírníme takto: vůle neovlivňuje naše přesvědčení přímo (pozice tzv. doxastického voluntarismu), ale pomocí zaměřování pozornosti na specifické evidence (zde nazvaná « pozornostním» voluntarismem). Descartova teorie chyby a chybování je tedy ve výsledku hájena jako udržitelná.
|
|
Možnosti před cestovního poradenství a specifické profylaxe importovaných infekčních onemocnění v Jihočeském kraji
RYTÍŘOVÁ, Zuzana
Teoretická část diplomové práce je zaměřena na problematiku importovaných infekčních onemocnění. Jsou zde uvedeny faktory ovlivňující jejich incidenci a možnosti specifické a nespecifické profylaxe a prevence. Dále jsou v teoretické části práce uvedena vybraná infekční onemocnění, jejich epidemiologické a klinické charakteristiky a trendy výskytu. Tyto nákazy jsou členěny podle možnosti specifické profylaxe. V práci je uveden přehled možností před cestovního poradenství v Jihočeském kraji. Cílem praktické části práce je charakterizovat výskyt importovaných infekčních onemocnění v okresech Jihočeského kraje v letech 2000 ? 2010 a zmapovat počty zdravotnických zařízení a jiných subjektů, které poskytují před cestovní poradenství a specifickou profylaxi zaměřenou na prevenci importovaných infekčních onemocnění. Za celé sledované období bylo v Jihočeském kraji hlášeno a v systému EPIDAT zaregistrováno celkem 351 případů importovaných onemocnění, z toho 205 případů v okrese České Budějovice. (Český Krumlov-47, Jindřichův Hradec-25, Písek-2, Prachatice-17, Strakonice-31, Tábor-24) Nejčastěji byly importovány alimentární nákazy (240 případů tj. 68 %), z toho nejvíce případů tvořila onemocnění způsobená nákazou salmonelami (73 případů), shigellami (71 případů) a kampylobaktery (42 případů). Nejčastější zemí původu importu byl Egypt (43 případů), Chorvatsko (42 případů) a Indie (30 případů). Počty zdravotnických zařízení a jiných subjektů, které poskytují před cestovní poradenství a specifickou profylaxi infekčních onemocnění se v průběhu sledovaného období zvýšily z devíti na třináct. Byly stanoveny čtyři hypotézy. Hypotéza č. 1 ve sledovaném období došlo ke zvýšení celkového počtu importovaných infekčních onemocnění. Hypotéza č. 2 ve sledovaném období došlo ke zvýšení celkového počtu importovaných infekčních onemocnění z exotických destinací. Hypotéza č. 3 ve sledovaném období došlo ke zvýšení celkového počtu zařízení poskytujících před cestovní poradenství, očkování a jinou specifickou profylaxi. Hypotéza č. 4 zvyšující se počet zdravotnických zařízení nebo jiných subjektů poskytujících před cestovní poradenství, očkování či jinou specifickou profylaxi neovlivnil ve sledovaném období nárůst počtu importovaných infekčních onemocnění. Potvrzeny byly pouze hypotézy č. 3 a 4.
|
|
Vliv opakovaného rozmrazení na nutriční účinnost nauplií Artemia salina pro raná vývojová stádia ryb
HULAN, Petr
Účinnost hluboce zamrazených a opakovaně rozmrazených planktonních organismů není úplně objasněná, často bývá zpochybňována, avšak živinové složení a nutriční účinnost takového krmiva chybí. Cíl práce bylo vyhodnotit nutriční účinnost opakovaně rozmrazených nauplií Artemia salina a změny jejich chemického složení na základě růstu, přežití a výskytu případných deformací v průběhu ontogeneze halančíka rýžovištního Oryzias latipes. Jako kontrolní dieta byla zvolena živá, čerstvě nalíhlá artemie. Jako sledované skupiny byly zvoleny nauplie artemií trvale zamrazených na -14 °C, rozmrazených na + 4 °C a opět zamrazených a rozmrazených na + 25 °C a opět zamrazených artemií. Do pokusu byly nasazeny larvy ryb ve věku jednoho týdne po přechodu na vnější výživu. Před zahájení pokusu bylo ve vzorcích artemie stanoveno její živinové složení, a to až na úrovni mastných kyselin a aminokyselin Po ukončení pokusu bylo zjištěno, že halančík rýžovištní Oryzias latipes krmený živou artemií nejenže lépe rostl, ale měl i lepší přežití oproti ostatním skupinám ryb. Deformace ryb nebyly zjištěny žádné. Nutriční hodnota živé artemie se zdá být nejvyšší, avšak zamrazení na - 14 °C, rozmrazení na 25 °C a opětovné zamrazení na - 4 °C se zdá být vhodnější z hlediska obsahu aminokyselin a úprava trvalým zamrazením na - 14 °C se zdá být vhodnější z hlediska obsahu mastných kyselin. Příčinou je pravděpodobně skutečnost, že úpravou zamrazením se koncentrace některých živin snižuje vyplavením, zatímco u jiných se zvyšuje zahuštěním.
|
|
Studium receptorů NKR-P1A a NKR-P1B exprimovaných v eukaryotických organismech
Ivanova, Lyubina ; Rychlovský, Petr (oponent) ; Bezouška, Karel (vedoucí práce)
Důležitou součástí imunitního systému jsou NK (natural killer) buňky, které mají schopnost identifikovat antigeny a cizorodé látky přítomné v organismu prostřednictvím molekulově rozmanitých receptorů. Mezi receptory přirozených zabíječů patří lektinové proteiny NKR-P1A a NKR-P1B, jejichž ligandy jsou převážně terminální oligosacharidy glykoproteinů na cílových (např. nádorových) buňkách. Po interakci sacharidových struktur na povrchu antigenů s jejich vazebnými partnery na NK receptorech jsou spouštěny výkonné mechanismy NK buněk, které příslušné cílové buňky zabíjí. V současné době jsou poznatky v oblasti NK buněk, jejich receptorů a interakcích s ligandy značně využívány při léčbě nádorů, virových a autoimunitních onemocnění. Exprese heterologních proteinů v eukaryotických organismech s sebou přináší mnoho výhod. Methylotrofní kvasinka Pichia pastoris je, na rozdíl od prokaryotických organismů, schopná post-translačních modifikací, jejichž výsledkem jsou biologicky aktivní molekuly exprimovaných proteinů. Expresní systém P. pastoris má obvykle vysokou úroveň exprese proteinů a je obecně pokládán za rychlejší, snažší a levnější ve srovnání s jinými eukaryotními systémy. V této diplomové práci jsou předkládány výsledky přípravy expresního vektoru, vhodného pro expresi potkaních proteinů NKR-P1A a...
|
host ::
