|
|
Produkce a sekrece faktorů virulence Bordetella pertussis
Držmíšek, Jakub ; Večerek, Branislav (vedoucí práce) ; Petráčková, Denisa (oponent)
Bordetella pertussis je lidský patogen, který způsobuje infekční onemocnění nazývané černý či dávivý kašel. K úspěšné infekci a kolonizaci hostitele využívá řadu faktorů virulence, jako jsou toxiny (adenylát cyklázový toxin, pertuzový toxin) a adheziny (filamentózní hemaglutinin, pertaktin, fimbrie). Kromě těchto hlavních faktorů byl u rodu Bordetella nalezen také sekreční systém typu 3 (T3SS), který má schopnost dopravit efektorové proteiny přímo do cytoplazmy hostitelské buňky. V návaznosti na naší předchozí charakterizaci delečního mutanta genu kódujícího RNA chaperonu Hfq (Δhfq), která prokázala, že protein Hfq je nezbytný pro řádnou funkci T3SS, byly připraveny a purifikovány rekombinantní proteiny BopB, BopD, BopC, BopN. Jejich pomocí byly získány specifické protilátky potřebné ke studiu funkčnosti sekrečního systému a buněčné lokalizace těchto proteinů. Pomocí získaných protilátek byla poprvé detekována in vitro sekrece proteinu BopC kmenem B. pertussis po pasáži v lidských makrofázích. Rovněž byly využity izolované rekombinantní translokátory BopB a BopD k testování jejich pórotvorné aktivity. Dále byla porovnána produkce proteinů v divokém a Δhfq kmenu před i po pasáži v lidských makrofázích. Byly zjištěny rozdíly v množství sekretovaných a membránových proteinů a některé z těchto proteinů...
|
|
|
Studium exprese MDR pump u kvasinek Saccharomyces cerevisiae za různých růstových podmínek: metoda s fluorescenční sondou diS-C3(3)
Zahumenský, Jakub ; Gášková, Dana (vedoucí práce) ; Krůšek, Jan (oponent)
V tejto práci sme študovali dva kvasinkové transportéry z rodiny ABC, Pdr10p a Pdr15p. V čase zadania diplomovej práce sa verilo, že tieto proteíny prispievajú ku kvasinkovému MDR fenotypu (PDR) na základe ich vysokej homológie s iným kvasinkovým MDR proteínom, Pdr5p. Aby sme tieto pumpy mohli študovať, boli pripravené dve izogénne skupiny mutantných kmeňov s deletovanými génmi kódujúcimi tieto proteíny, vo všetkých možných kombináciách delécií. Ukázalo sa, že oba tieto proteíny sú veľmi dôležité pri udržiavaní normálneho mikrookolia plazmatickej membrány pre najhojnejší, a esenciálny, kvasinkový membránový proteín, H+ -ATPázu, a tak ovplyvňujú membránový potenciál. Proteíny Pdr10p a Pdr15p tak hrajú doposiaľ neznámu úlohu pri regulácii tohoto enzýmu. Ďalej sa ukázalo, že delécia génov kódujúcich tieto proteíny výrazne znižuje možnosť aktivácie H+ -ATPázy protonofórom CCCP, ktorý je slabou kyselinou. Štúdie s imunosupresantom FK506 ďalej ukazujú, že táto látka znižuje životaschopnosť mutantného kmeňa S. cerevisiae PLY643, ktorý má deletované gény kódujúce Pdr5p, Snq2p a Yor1p. Ďalšie delécie Pdr10p a Pdr15p nezvyšujú letalitu tejto látky. Ani FK506 ani CCCP nie sú substrátmi študovaných púmp. 1
|
|
|
Tectonic evolution of the central part of the Teplá-Barrandian unit
Hajná, Jaroslava ; Žák, Jiří (vedoucí práce) ; Schulmann, Karel (oponent) ; Nance, Richard Damian (oponent)
Hlavním cílem disertační práce je studium tektonického vývoje tepelsko- barrandienské jednotky (TBJ) ve střední části Českého masivu od kadomské subdukce a procesů na aktivním okraji Gondwany, přes kambroordovickou extenzi k variské kolizi. Práce je založena na rozsáhlém terénním výzkumu, detailním strukturním mapování a strukturní analýze kombinované s dalšími analytickými metodami jako je anizotropie magnetické susceptibility (AMS) a s ní související analýza magnetické mineralogie, analýza deformačních mikrostruktur a U, Th a Pb izotopové analýzy prováděné laserovou ablací - LA-ICP-MS. Nejdůležitější výstupy práce jsou následovné: (1) Neoproterozoický (kadomský) podklad tepelsko-barrandienské jednotky odhaluje složitou stavbu a většinou nejasné stratigrafické vztahy jeho jednotlivých částí. Tato jednotka obsahuje pravděpodobně jeden z nejlépe zachovaných fragmentů akrečního klínu v celém avalonsko-kadomském pásu, reprezentovaným nově definovaným blovickým komplexem. V centrální části TBJ tento komplex sestává ze tří litotektonických pásů odlišujících se stylem a intenzitou deformace, magnetickými stavbami a stupněm kadomské regionální metamorfózy. Kromě toho je centrální radnicko-kralupský pás interpretován jako komplex melanží typu Franciscan sedimentárního a tektonického původu....
|
|
|
Substrátem kontrolované fyzikální vlastnosti tenkých vrstev magnetických oxidů pro spintronické aplikace
Maleček, Tomáš ; Veis, Martin (vedoucí práce)
Vývoj klasické elektroniky se přibližuje svým fyzikálním mezím a žádá si nových přís- tupů. Slibným se ukazuje být integrace nových spintronických materiálů s dosavadní křemíkovou technologií. Tato práce představuje možnost růstu relaxovaných textur- ovaných tenkých vrstev La2/3Sr1/3MnO3 (LSMO) na křemíku s vlastnostmi srovnatelnými s epitaxní vrstvou na SrTiO3 (STO). Růstu LSMO bylo dosaženo díky dvoudimenzionální nanovrstvě (NV) Ca2Nb3O10, která epitaxně stabilizovala růst LSMO. Bylo ukázáno, že vzorky LSMO na NV/Si, připravené pulzní laserovou depozicí, vykazují nižší saturační magnetizaci než vzorky LSMO na STO, ale přesto mají vyšší Curieovu teplotu a to o více než 10 K. Optická a magneto-optická měření byla využita na dopočtení kompletního tenzoru permitivity zkoumaného materiálu. Spektra nediagonální složky byla parametri- zována třemi diamagnetickými přechody s energiemi okolo 1.9, 2.9 a 3.5 eV a to pro LSMO na NV/Si i LSMO na STO. Podobnosti fyzikálních vlastností vzorků otevírají možnost integrace LSMO do křemíkové technologie s využitím NV. Dále v této diplomové práci byly studovány optické a magneto-optické vlastnosti vybraného vzorku LSMO na STO v závislosti na teplotě.
|
|
|
Variabilita tvaru krunýře u vybraných zástupců čeledi Geoemydidae
Protiva, Tomáš ; Rehák, Ivan (vedoucí práce) ; Šmíd, Jiří (oponent) ; Široký, Pavel (oponent)
Želvy vždy fascinovaly člověka svou morfologií, unikátní embryogenezí a později i neujasněnou pozicí ve fylogenezi. Tato skupina existuje již 200 milionů let, od prvních zástupců rodů Odontochelys a Proganochelys, ale v současnosti je většina druhů ohrožena především neřízeným lovem. Kritická situace je zejména v Asii, kde obrovskou poptávku po želvích produktech vytvářejí čínské trhy. Řada druhů je na pokraji vyhubení a záchranné chovy v zajetí jsou nutností. K plánování záchranného programu je ale zásadní znalost správného taxonomického zařazení a geografického původu. Variabilita tvaru karapaxu a plastronu, studované pomocí metody geometrické morfometrie a podpořené genetickou analýzou, představují vhodné nástroje k získávání těchto poznatků. V této práci jsme se soustředili především na ověření aplikovatelnosti metody geometrické morfometrie na vybrané zástupce čeledi Geoemydidae, jejichž centrum rozšíření se nachází v Asii a jsou tak touto tzv. "želví krizí" nejvíce ohroženi. U želvy Morenia petersi jsme se zaměřili na neobvykle častý výskyt vmezeřeného vertebrálního štítku na karapaxu. Ten nijak neovlivňuje tvar karapaxu ani plastronu a nenalezli jsme rozdíl ani v celkovém tvaru mezi jedinci s vmezeřeným štítkem a normálními jedinci s pěti vertebrálními štítky. Pravděpodobné zafixování...
|
|
|
Reakce některých oxidoreduktas s vybranými donory oxidu dusnatého
Marounková, Běla ; Ryšlavá, Helena (oponent)
Jednou z klíčových funkcí oxidu dusnatého (NO) v lidském těle je vazodilatace. Trinitroglycerol (GTN) a další dobře známe donory NO nesoucí skupinu >C=N-OH byly testovány pro možnou přeměnu na NO (respektive dusitany) pomocí diaforasy (DP) a lipoamiddehydrogenasy (LAD). Oba enzymy, DP i LAD, nebyly schopné přeměnit Nω- hydroxy-L-arginine (L-NOHA). Ačkoliv se superoxidoý anion (SOD) podílí v různé míře na přeměně donorů (formaldoximu (FAL), acetaldoximu (AO), nitroprusidu (NP), S- nitrosoglutathionu (SNOG), S-nitroso-N-acetylpenicilaminu (SNAP) a hydroxylaminu (HA)), vznikající reaktivní produkt, peroxid vodíku, nemá na tyto reakce vliv. Pro porovnávání jednotlivých reakcí DP a LAD s donory NO je důležité přihlédnout k poměru vynikajících dusitanů a dusičnanů.
|
|
|
Paleobiogeografie a taxonomie rodu Apodemus (Mammalia: Rodentia) v kvartéru střední Evropy
Knitlová, Markéta ; Horáček, Ivan (vedoucí práce) ; Macholán, Miloš (oponent) ; Čermák, Stanislav (oponent)
Myšice rodu Apodemus představují dominantní složku současných savčích společenstev střední Evropy. Minulost jednotlivých druhů a historie jejich areálů je již z tohoto důvodu tématem velmi závažným s výraznými přesahy do sféry obecných interpretačních modelů historických kořenů současné bioty tohoto regionu. Přes výstupy současných fylogeografických analýz a početné zastoupení skupiny ve fosilním záznamu, zůstavá však řada spojených otázek nezodpovězena. Základní příčinou jsou značné komplikace s fenotypovým rozlišením jednotlivých druhů, značná proměnlivost a rozsáhlé mezidruhové přesahy ve všech morfologických znacích. Cílem předloženého projektu bylo vypracování postupů umožňujících spolehlivou druhovou identifikaci fragmentárního fosilního materiálu a zevrubné zhodnocení výpovědních možností fosilního záznamu skupiny pro rekonstrukci její areálové a fylogenetické dynamiky v nejmladší geologické minulosti. Vstupním krokem se stala podrobná morfometrická analýza dentálního fenotypu zohledňující shodnými postupy variační poměry recentních taxonů i fosilních populací a koncepce alternativní parataxonomické klasifikace fenotypového spektra rodu. Těmito postupy byl zpracován obsáhlý soubor dokladů ze souvislých vrstevných sledů z různých oblastí České republiky a Slovenska. Výsledky přinesly...
|
|
|
Použití moderních analytických metod ke stanovení biologicky aktivních látek
Vránková, Alice ; Pacáková, Věra (vedoucí práce) ; Bosáková, Zuzana (oponent) ; Navrátil, Tomáš (oponent)
E E€€ !Ěa E€ií € p'*ÉÉE"ÉH.E Ě E -: ::t i'3E* iT; -ngE g š'*tx F! p E=;;'E Ť.ĚTešŇ ě.íÉTÉ€;ĚgF*1šj*E$IE.Éá *? E : -o'' c € .í.='E € u ax Ě :,; á.'á EšEB r: FE Hů.ť;,es Éě.g9.-E;á8 1ěeg i íiia= itury Ěi[i*íuĚE:EÉšsí g E€ Ťnsgt g šš; *s6.s :ta= š]í€ řE ě É.E E!Ěř E ššÉiĚa€ ĚE"€ Pá;řĚ0s.í €;;aáe se ;l;* Ět at í:ÉřE: : E ",í: €š É ;E..g; €€s € e šĚsš€Ě F ; E E: š E]Eř; ] ř'* E E >.=.P = l,š P 8 t ó F' E= ": ÉĚ € € ťšě Ě E : 5 .g; E E ÉE €;žÉs :iĚ* a É'gEEE! HEE'E€ ĚÉ2 = o-.Ú r o.LJ o..c.Y y' Ji U) tr o.5 a C a
|
|
|
Psychodiagnostika v personální psychologii - výběrové řízení na pozici řídícího letového provozu. (Analýza úspěšnosti uchazeče ve výcviku na základě výsledků vybraných testů).
Šustíková, Klára ; Wagnerová, Irena (vedoucí práce) ; Štikar, Jiří (oponent)
Prvním cílem předkládané práce bylo zmapovat oblast využití psychodiagnostických metod ve výběrovém řízení na pozici řídící letového provozu ve vybraných zemích střední Evropy. Druhým bylo zjistit, nakolik se liší výsledky FEAST a psychologického testování mezi jednotlivými skupinami uchazečů v souvislosti s úspěšností výcviku. Jedná se o kvantitativní výzkum. Použitou metodou sběru dat byla analýza výsledků vybraných testů u jednotlivých uchazečů. Výzkum byl uskutečněn na 93 uchazečích, kteří úspěšně absolvovali výběrové řízení na pozici řídící letového provozu na ŘLP ČR s.p. v letech 2005 - 2009. Data byla zpracována pomocí statistického programu SPSS. V naprosté většině výkonových ani osobnostních testů nebyl odhalen žádný statisticky významný rozdíl mezi skupinou ve výcviku úspěšných a neúspěšných uchazečů. Statisticky významný rozdíl byl odhalen ve škále "Zaznamenané shody" testové baterie FEAST, kde neúspěšní uchazeči skórovali výše. Další byl odhalen v testu CAQ ve faktoru Q1:Radikalismus, kde úspěšní uchazeči dosahovali nižších skórů než neúspěšní. Domníváme se, že uchazeči, kteří výběrové řízení zvládnou, jsou natolik kvalitní, že je nelze použitím výkonových či osobnostních testů dále diferencovat. Úspěch či neúspěch ve výcviku tedy pravděpodobně záleží na nějakých kompetencích či...
|
|
|
Vývoj bioanalytické metody pro stanovení nových potenciálních léčiv odvozených od thiosemikarbazonu v biologickém materiálu
Suprunová, Vlasta ; Stariat, Ján (vedoucí práce) ; Kučera, Radim (oponent)
Vysokoúčinná kapalinová chromatografie se vzhledem k vysoké citlivosti a selektivitě v současnosti řadí mezi nejpoužívanější analytické metody stanovování obsahu léčiv v biologickém materiálu. Je vhodná jak pro kvantitativní, tak pro kvalitativní analýzu. 2-benzoylpyridin-4-ethyl-3-thiosemikarbazon (Bp4eT) je potenciálním léčivem ze skupiny thiosemikarbazonů, které jsou v dnešní době intenzivně studována a vyvíjena jako protinádorová léčiva. Jejich specifický mechanismus účinku, který je založen na chelataci železa, může výrazně přispět k léčbě nádorů rezistentních vůči standardní chemoterapii. Cílem této práce bylo vyvinout a ověřit základní validační parametry HPLC- MS/MS metody pro stanovení Bp4eT včetně jeho hlavních metabolitů v potkaní plazmě a využít ji pro analýzu vzorků z pilotní farmakokinetické studie na potkanech. Separace Bp4eT a jeho metabolitů bylo dosaženo na chromatografické koloně Discovery HS C18 (75 x 4,6 mm, 3 µm) chráněné stejným typem předkolony s použitím mobilní fáze skládající se z 2mM mravenčanu amonného a acetonitrilu v poměru 40:60 (v/v). Byla využita izokratická eluce při průtoku mobilní fáze 0,4 ml/min. Jako detektor byl využit hmotnostní spektrometr, přičemž kvantifikace probíhala v SRM módu. Vzorky plazmy byly upraveny pomocí SPE. Metoda byla úspěšně zvalidována a...
|
host ::
RSS.