|
|
Vývoj UHPLC-MS/MS a UHPSFC-MS/MS metod pro stanovení vybraných ochratoxinů
Kretek, Kristián ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chmelařová, Hana (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Kristián Kretek Školitel: prof. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj UHPLC-MS/MS a UHPSFC-MS/MS metod pro stanovení vybraných ochratoxinů Účel této práce spočíval ve vývoji a srovnání UHPLC a UHPSFC analytické metody ve spojení s tandemovou hmotnostní spektrometrií pro čtyři běžné ochratoxiny. Experimenty byly provedeny na UHPLC systému ACQUITY UPLC a UHPSFC systému ACQUITY UPC2, hmotnostní spektrometr XEVO TQ-XS byl totožný. Na počátku byla provedena optimalizace parametrů iontového zdroje a SRM přechodů. Pro UHPLC byly testovány ve směsi s ACN 3 vodné složky mobilní fáze - kyselina mravenčí, octová a amoniak, při průtoku 0,4 ml/min, gradientové eluci od 2 % do 95 % ACN v 5. minutě, teplotě 40 řC a koloně Acquity UPLC BEH C18. Pro UHPSFC bylo testováno ve směsi s CO2 celkem 6 organických modifikátorů: MeOH a MeOH s vodou, kyselinou mravenčí, amoniakem a mravenčanem amonným, při průtoku 1,5 ml/min, gradientové eluci od 2 % do 45 % MeOH v 5. minutě, teplotě 40 řC a tlaku 2000 psi. Dále byl proveden screening 13 kolon. Optimalizace hmotnostní detekce byla provedena v SFC testováním 8 přídavných kapalin: MeOH, EtOH a MeOH s přídavkem vody, kyseliny mravenčí, amoniaku a mravenčanu a...
|
|
|
Favorit Brno / cyklistický stadion - bikrosová dráha / architektonická studie - design / etapa 2021/22
Nováková, Lucie ; Žalmanová, Petra (oponent) ; Šindlar, Jiljí (vedoucí práce)
Zadáním diplomové práce je architektonická studie cyklistického stadionu – velodromu v městské části Pisárky v Brně pro TJ Favorit Brno. Stávající velodrome je situován jihozápadně na okraji brněnského výstaviště při ulici Křížkovského. Velodrom již neodpovídá nynějším požadavkům dráhové cyklistiky, avšak po historické stránce je cenný a má své genius loci. Nová dřevěná cyklistická dráha o délce 250 m (spolu s dalšími parametry mezinárodní cyklistické unie) a k ní přidružená sportoviště jsou „vložena“ do stávajícího velodromu, který je dle požadavků upraven a rekonstruován. Tribuny zůstaly zachovány stávající. Vestavěný objekt s novou dráhou je pak kompletně zastřešen a vytváří tak uzavřený prostor. V rámci rekonstrukce stadionu došlo také k vytvoření nového zázemí pro TJ Favorit Brno z modulárního kontejnerového systému, jedná se o šatny pro sportovce, prostory pro administrativu, dále zázemí pro hostující kluby a sportovce a VIP prostory. Systém kontejnerové výstavby pro sportovní zázemí je velmi praktický, ekonomický, rychlý, šetrný k životnímu prostředí a variabilní a flexibilní k aktuálním požadavkům sportu, který se neustále vyvíjí. Předprostor a parter v jižní části stávajícího velodromu je vybaven službami pro veřejnost – kavárnou, prodejnou suvenýrů, pokladnou, infocentrem, servisem a prodejnou kol a sportovního vybavení. Nová dráha s tribunami je zastřešena ETFE folií ukotvenou na nové příhradové vazníky, které jsou napojeny na stávající zastřešení.
|
|
|
Stanovení neopterinu a jeho derivátů metodou HPLC s fluorescenční detekcí
Říhová, Lenka ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
NÁZEV: Stanovení neopterinu a jeho derivátů metodou HPLC s fluorescenční detekcí ABSTRAKT: Neopterin, derivát pteridinu, je v lidkém organismu produkován monocyty nebo B - lymfocyty po stimulaci interferonem γ, nebo interleukinem - 2. Tyto působky (interferon γ, interleukin - 2) jsou spojeny s aktivací imunitního systému. Měření neopterinu v tělních tekutinách tedy může sloužit při monitorování cytokiny indukované aktivace různých složek imunitního systému. Imunitní aktivace se objevuje například v průběhu mnoha infekčních chorob, při autoimunitních onemocněních a při maligních onemocněních. V poslední době je ve vědeckých pracích popisována také spojitost neopterinu a 7,8 - dihydroneopterinu s intracelulárním oxidativním stresem a apoptózou buněk. Pteridiny tudíž mají pravděpodobně vztah i k určitým neurologickým onemocněním. Plně redukovaná forma biopterinu se v lidském organismu uplatňuje jako kofaktor některých enzymů. Koncentrace neopterinu, případně jiných příbuzných látek, se v klinické praxi vyjadřuje poměrem neopterin / kreatinin. Tato diplomová práce se zabývá vypracováním analytické metody určené k identifikaci a stanovení biologicky aktivních látek biopterinu, 7,8 - dihydroneopterinu, 5,6,7,8 - tetrahydroneopterinu, neopterinu a kreatininu za použití vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC)...
|
|
|
Stanovení residuí fluorochinolonů v půdách metodou LC-FD
Aufartová, Jana ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Nováková, Lucie (oponent)
8. Abstrakt v češtině Některé látky využívané v humánní a veterinární medicíně jsou detekovatelné v prostředí. Mezi tyto látky patří i fluorochinolony. Naše práce se zabývá 4 flurochinolony (ofloxacin, norfloxacin, ciprofloxacin a enrofloxacin) ve vzorcích půdy. Fluorochinolony byly detekovány metodou LC-FD. Pro extrakci byla použita směs organických rozpouštědel (methanol:aceton; 1:1) a 1.0g EDTA. Vzorky byly 15 minut třepány, 15 minut v ultrazvukové lázni a poté 15 minut centrifugovány. Po odpaření organických rozpouštědel mírným proudem dusíku ve vodní lázni byl odparek rozpuštěn v mQ-H2O byl proveden clean-up (přes kolonu OASIS). Po odpaření methanolu z clean-up byl odparek rozpuštěn v mobilní fázi. Mobilní fáze byla H3PO4: MeOH: ACN (920: 70: 10) a průtok 1.4mL/min. Limit kvantifikace je pro OFLO 5mg/L, pro NOR je 0,083mg/L, pro CIP je 0,116mg/L a pro ENRO je 0,125mg/L. Rozsah hodnot výtěžnosti jsou 75% - 121%, pro OFLO, NOR, CIPRO a ENRO. Z počátku byla prováděna extrakce v kyselém prostředí, ale výtěžnost byla nízká. Extrakce byla prováděna pomocí HCl, H2SO4, H3PO4 a HNO3. Ve všech případech bylo přidáváno EDTA, aby se zabránilo interferencím s jinými látkami obsaženými ve vzorku. Bylo zjištěno, že nevzniká komplex mezi EDTA a fluorochinolony. Pro clean-up je vhodnější OASIS HLB 6cc/200mg. Extrakce v...
|
|
|
Matricové efekty v LC-MS analýze: vznik, hodnocení a jejich odstranění.
Svoboda, Pavel ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Švec, František (oponent) ; Havliš, Jan (oponent)
Abstrakt Univerzita Karlova, Farmaceutické fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Pavel Svoboda Školitel: doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Konzultant: RNDr. Hana Vlčková, Ph.D. Název disertační práce: Matricové efekty v LC-MS analýze: vznik, hodnocení a jejich odstranění Disertační práce se zabývá problematikou matricových efektů v analýze využívající spojení kapalinové chromatografie a hmotnostní spektrometrie (LC-MS). Technika LC-MS je velmi dobře etablovaným nástrojem na poli kvantitativní i kvalitativní analýzy, který nachází uplatnění pro široké spektrum různorodých sloučenin. Přes všechny výhody, jako je citlivost, selektivita a robustnost, spojení LC-MS trpí vážným nedostatkem, jenž je představován matricovými efekty. Tento nežádoucí jev ovlivňuje důležité parametry LC-MS metody, jako je správnost, přesnost, linearita, limit detekce a limit kvantifikace. Z tohoto důvodu by mělo být jejich hodnocení zahrnuto ve validaci každé LC-MS metody a jejich příčina v maximální možné míře odstraněna. Hodnocení matricových efektů se provádí pomocí kvantitativních a kvalitativních přístupů, jako je metoda postextrakčního přídavku, metoda postkolonové infuze a metoda porovnávající směrnice kalibračních křivek. Projevy matricových efektů lze zmírnit nebo zcela odstranit zásahem...
|
|
|
Testování chromatografických vlastností alternativních stacionárních fází
Havlátová, Michaela ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Nováková, Lucie (oponent)
1 Abstrakt Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Michaela Havlátová Konzultant: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, PhD. Název diplomové práce: Testování chromatografických vlastností alternativních stacionárních fází Byly testovány chromatografické vlastnosti HS F5 kolony u vybraných skupin látek. Jako testované skupiny látek byly vybrány látky ze skupiny ß-sympatolytik (acebutolol, bopindolol), neuroleptik (thioridazin, perphenazin), lokálních anestetik (lidokain, prilokain), tetracyklinů (oxytetracyklin, minocyklin), derivátů methylxantinů (kofein, theofylin) a anilin. Při analýze byla sledována retence testovaných skupin látek v závislosti na charakteru mobilní fáze. Některé látky vykazovaly retenci ve tvaru "U". U každé testované skupiny byly provedeny tři série analýz, kdy při analýze č. 1 byla použita mobilní fáze acetonitril - voda, při analýze č. 2 mobilní fáze acetonitril - kyselina fosforečná 0,085% a při analýze č. 3 mobilní fáze acetonitril - acetátový pufr pH 7. Při každé jednotlivé analýze bylo současně měněno procentuální zastoupení acetonitrilu v mobilní fázi. Z testovaných skupin látek vykazovaly retenci ve tvaru "U" ß-sympatolytika acebutolol, bopindolol v sérii analýz č. 2 a č. 3, neuroleptika thioridazin, perphenazin v sérii...
|
|
|
Charakterizace separačních systémů pro dělení enantiomerů
Geryk, Radim ; Tesařová, Eva (vedoucí práce) ; Ševčík, Juraj (oponent) ; Nováková, Lucie (oponent)
(CZ) Dizertační práce je zaměřena na výzkum a charakterizaci retenčních a enantiodiskriminačních mechanismů chirálních chromatografických systémů. Detailní charakterizace systémů s moderními stacionárními fázemi poskytne komplexní pohled na interakce uplatňující se při separaci. Hlubší pochopení retenčního/separačního chování významným způsobem usnadní vývoj a optimalizaci metod pro separaci a stanovení celé řady sloučenin. Enantiodiskriminační potenciál polysacharidových stacionárních fází byl studován v podmínkách reversního a normálního módu HPLC. Stacionární fáze lišící se povahou polymerního řetězce (amylosa versus celulosa), navázáním chirálního polymeru na silikagelový nosič (pokrytá versus imobilizovaná stacionární fáze) či typem derivatizační skupiny byly porovnávány z hlediska retence a selektivity. V obou separačních módech vykazovaly amylosové chirální stacionární fáze vyšší enantioselektivitu především pro kyselé a bifunkční analyty. Chirální stacionární fáze na bázi derivatizované celulosy naopak ukázaly vyšší enantioseparační potenciál pro bazické analyty. Srovnání chromatografických dat získaných v reversním módu ukázalo, že pokrytá i imobilizovaná amylosová stacionární fáze vykazovala podobný enantioselektivitu pro kyselé analyty, zatímco pro enantioseparaci bazických látek byla...
|
|
|
Vývoj metody pro stanovení atorvastatinu a jeho nečistot v tabletách s využitím superkritické fluidní chromatografie
Juchelka, Jan ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Khalikova, Maria (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Jan Juchelka Školitel: doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj metody pro stanovení atorvastatinu a jeho nečistot v tabletách s využitím superkritické fluidní chromatografie Tato diplomová práce se zabývá vývojem a optimalizací metody pro kvalitativní a kvantitativní hodnocení atorvastatinu a jeho nečistot pomocí superkritické fluidní chromatografie. V rámci práce byly optimalizovány chromatografické podmínky, které zahrnovaly zejména výběr dostatečně selektivní stacionární fáze, vhodného modifikátoru a aditiva mobilní fáze. Zkoumán byl i vliv tlaku na výsledek analýzy. Metoda byla na závěr validována. Hodnoceno bylo celkem 7 analytů, později pouze 6. Sedmý analyt jako enantiomer atorvastatinu nebylo možné bez chirální stacionární fáze separovat. Měření bylo prováděno na přístroji Acquity UPC2 s PDA detektorem od firmy Waters. Detekce probíhala při vlnové délce 245 nm. Testované stacionární fáze zahrnovaly kolony určené speciálně pro SFC, konkrétně Acquity UPC2 BEH 1,7 µm, BEH 2-EP 1,7 µm, HSS C18 SB 1,8 µm a CSH Fluoro-Phenyl 1,7 µm (všechny 3,0 x 100 mm). Nedostatečná separace na těchto kolonách vedla k testování kolon primárně určených pro HPLC. Nejlepší separace bylo...
|
|
|
Vývoj UHPLC-MS/MS metody pro stanovení skupiny statinů a jejich metabolitů
Svoboda, Pavel ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Novák, Ondřej (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Pavel Svoboda Školitel: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj UHPLC-MS/MS metody pro stanovení skupiny statinů a jejich metabolitů Tato diplomová práce se zabývá vývojem metody pro stanovení skupiny statinů a jejich metabolitů pomocí ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s tandemovým hmotnostním spektrometrem typu trojitého kvadrupólu. V rámci diplomové práce byly optimalizovány chromatografické podmínky a parametry hmotnostního spektrometru. Na závěr byla hodnocena citlivost, linearita a opakovatelnost metody. Pro separaci byla zvolena kolona BEH C18 (50 x 2,1 mm; 1,7 µm). Výběr kolony byl proveden při použití UV spektrofotometrického detektoru. Mobilní fáze pro gradientovou eluci byla tvořena 0,1 mM octanem amonným o pH = 4 a acetonitrilem v počátečním poměru 70:30. Optimalizace parametrů hmotnostního spektrometru byla započata výběrem prekurzorových iontů po přímé infuzi standardů. Následně byly podrobeny optimalizaci parametry iontového zdroje. Po výběru produktových iontů byly optimalizovány iontové přechody. Optimalizace iontových přechodů byla doplněna hodnocením vlivu aditiv na ionizaci. Všechny zmíněné kroky byly hodnoceny jak v pozitivním, tak...
|
|
|
Optimalizace kroku přípravy vzorku biologického materiálu pro UHPLC-MS/MS analýzu atorvastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů
Pilařová, Veronika ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Veronika Pilařová Školitel: Doc. PharmDr. Lucie Nováková Ph.D. Název diplomové práce: Optimalizace kroku přípravy vzorku biologického materiálu pro UHPLC- MS/MS analýzu atorvastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů. Cílem této diplomové práce bylo optimalizovat UHPLC-MS/MS metodu určenou pro stanovení koncentrace atorvastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů v biologickém materiálu a dále vyvinout a optimalizovat metodu pro přípravu vzorku biologického materiálu technikou MEPS, t. j. mikroextrakcí pomocí tuhého sorbentu, a tuto metodu zvalidovat. K separaci analytů byla využita kolona Acquity BEH C18 (50 x 2,1 mm, 1,7 µm, Waters). Ionizace analytů byla provedena elektrosprejem v pozitivním i v negativním módu. Jako detektor byl použit trojitý kvadrupól. U každého analytu byl zvolen prekurzorový ion, ion fragmentu a optimalizována kolizní energie a napětí na vstupním kuželu pro každou látku zvlášť. Kvantifikace látek byla provedena pomocí SRM (monitorování vybrané reakce). Pro rosuvastatin lakton, který byl stanovován v pozitivním módu, byla prekurzorovým iontem zvolena protonovaná molekula [M+H]+ . Pro zbylé statiny byl v negativním módu vybrán prekurzorový ion [M-H]- , který měl největší...
|
host ::
RSS.