| |
|
Biologická diverzita buněk karcinomu mléčné žlázy ve vztahu k citlivosti na protinádorovou léčbu
Netíková, Irena ; Veselý, Pavel (vedoucí práce) ; Květina, Jaroslav (oponent) ; Abrahámová, Jitka (oponent)
Biologická diverzita nádorových buněk karcinomu mléčné žlázy byla studována v in vitro podmínkách metodou expozice cytotoxickému působení zevních agens. Pro testování byly nejprve použity primární buňky karcinomů mléčné žlázy a maligních výpotků, individuálně odebrané pro experimentální stanovení chemorezistence po krátkodobé kultivaci s cytostatiky standardním MTT testem. V několika dostupných případech byla sledována relace ke klinickému průběhu nádorového onemocnění. U 4 ze 7 vzorků byla pozorována dobrá korelace s výsledky terapie. Dále bylo MTT testem na buňkách primárních nádorů a na linii EM-G3 zjišťováno, jaký vliv má kombinace dvou cytostatik v jedné kultivační jamce na viabilitu buněk a jaké jsou možnosti chemosenzitizace tamoxifenem. Pro modelové řešení vývoje diverzifikace populace maligních buněk byla využita nová buněčná linie EM-G3, která byla v naší laboratoři zachycená a ustavená z kultivovaného vzorku primárního mamárního nádoru pro MTT test. Buňky linie EM-G3 reprezentují unikátní, spontánně imortalizovanou klonální buněčnou linii, prokazatelně odvozenou z premaligních progenitorů karcinomu prsu a schopnou částečně diferencovat in vivo. Linie byla detailně charakterizována pomocí řady cytologických i molekulárně biologických technik. Mnohobarevná fluorescenční in situ hybridizace...
|
|
Assay of fluorescent products in erytrocytes of patients with Alzheimer' s disease
Kohutiar, Matej ; Wilhelm, Jiří (vedoucí práce)
Voľné radikály sú vysoko reaktívne častice s nespárovaným elektrónom v orbitale. Medzi biologicky významné molekuly radikálovej povahy patria reaktívne zlúčeniny kyslíka a dusíka. Pre zachovanie homeostázy je dôležité, aby koncentrácia voľných radikálov bola udržovaná na hladine pre bunky netoxickej. Reaktívne častice majú schopnosť napadnúť celú radu biomolekúl. Produkty radikálového poškodenia sa hromadia v bunkách intra i extracelulárne a vedú k tvorbe pigmentov podobných lipofuscínu. Lipofuscinoidné pigmenty obsahujú fluorofory a sú preto vhodné pre fluorescenčnú analýzu. Alzheimerova choroba predstavuje v súčasnosti významný ekonomický a sociálny problém. Príčina Alzheimerovej demencie nie je známa. Histologickým korelátom Alzheimerovej choroby je nález senilných plakov zložených z amyloidu ?. ROS a RNS prenikajú hematoencefalickou bariérou do lumen mozgových kapilár a dostávajú sa do styku s erytrocytmi. Radikálové napadnutie krviniek vedie k intracelulárnemu zvýšeniu koncentrácie produktov oxidačného stresu v cytosole. Pre analýzu fluorescenčných produktov bol použitý extrakt z červených krviniek pripravený od 30 pacientov a 8 zdravých kontrol. Vyhodnotenie emisných spektier zdravých kontrol ukázalo prítomnosť emisných maxím v oblasti 327-343nm. Patologické vzorky v oblasti nad 380nm vykazovali...
|
|
Bioactive peptides as a component of anti-aging cosmetics
Jatzová, Katarína ; Obruča, Stanislav (oponent) ; Muthný,, Tomáš (vedoucí práce)
Ageing is a natural part of every human life cycle. During ageing there are lots of changes in the organism. One of the main pillars of the cosmetics industry is the development of active compounds that are fighting signs of skin ageing. The components as bioactive peptides are considered to be promising anti-ageing products, mainly because of the possibility to precisely define their chemical structure and therefore achieve more effective biological targeting. One of the signs of skin ageing is the weakening of the connections between epidermal cells and the extracellular matrix, decreasing expression of adhesion molecules and molecular components of dermo-epidermal connection. The most abundant adhesive receptors in the skin are integrins. Their ligands are extracellular matrix molecules, e. g. laminin or fibronectin. The minimal recognition sequence of integrins receptors is the amino acid motif arginine- glycine- aspartic acid (RGD). This sequence is also very interesting in terms of cosmetic applications because it provides the ability to create new and effective bioactive peptides. The subject of present work is basic safety testing of four peptides with RGD motif. A sequence of three peptides was modified by addition of glycine amino acids, or alanine. The expected effect was to improve interaction with integrin receptors. In each of the sample, levels of endotoxin was determined in order to exclude any possible interfering effects on the viability of cells. Subsequently, in NIH3T3 mouse fibroblasts viability was monitored by MTT assay and morphology. The quantity of obtained protein had been determined to increase data interpretation relevance.
|
|
In vitro stanovení antimikrobiální, antioxidativní a protizánětlivé aktivity chinonů ze semen černuchy seté
Kokoška, L. ; Maršík, Petr ; Landa, Přemysl ; Tesařová, H. ; Svobodová, B. ; Halamová, K. ; Flesar, J. ; Přibylová, Marie
V rámci této studie jsme prokázali antimikrobiální, antioxidativní a protizánětlivé účinky chinonů ze semen čemuchy seté. Na základě dosažených výsledků se domníváme, že THQ a TQ jsou perspektivními látkami pro využití v potravinářském nebo ve farmaceutickém průmyslu.
|
|
Příprava elektrokeramiky z nanoprášků
Kachlík, Martin ; Trunec, Martin (oponent) ; Maca, Karel (vedoucí práce)
Byla provedena literární rešerše přípravy objemové EuTiO3 keramiky. Na základě provedených experimentů byly stanoveny experimentální podmínky reakce v tuhém stavu práškových materiálů Eu2O3 s Ti2O3, resp. TiO2 vedoucí k fázově čisté EuTiO3 keramice. Pomocí izostatického lisování a slinování v redukční atmosféře se podařilo připravit objemovou keramiku vhodnou pro měření elektromagnetických vlastností.
|
| |
|
Gene silencing of ICAM-1 by lysine modified oligonucleotides
Kocourková, Aneta ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Nachtigal, Petr (oponent)
SOUHRN V této studii se projevuje nadějná možnost zvýšení genové exprese konjugací ligandů na antisense oligonukleotidy a siRNA. Při modifikaci se využilo 2'-O-lysylaminohexylové skupiny vázané na uridinovou bazi, která nahradila jednu, dvě až tři baze thyminové. Uvedené záměny a modifikace bazí byly testovány pro zlepšení inhibice proteinové exprese. Efektivita modifikací v inhibici proteinové exprese byla zkoušena na alicaforsenové sekvenci (DNA) a siRNA. Alicaforsen, který se nachází ve třetí fázi klinické studie, je phosphorothioát komplementární k ICAM-1, siRNA, jenž nově prokázala afinitu k ICAM-1, čehož bylo využito při porovnání účinnosti výše zmíněných modifikací a objevení následných možností uplatnění alicaforsen a siRNA v terapii. Poprvé byla pozorována a prokázána down-regulace ICAM-1 na buněčné linii ECV304, která imituje prostředí hematoencefalické bariéry. Nemodifikované/modifikované sekvence oligonukleotidů a siRNA byly transfekovány do ECV304 buněk. Po 24 hodinové transfekci byly buňky rozrušeny chemickou lýzou. Koncentrace získaných proteinů byly stanoveny Bradford analýzou a následná inhibice ICAM-1 byla vyhodnocena western blotem. Hodnoty inhibicí byly standardizovány k odpovídajícímu aktinu a kontrolním buňkám. Vyhodnocení genové exprese proběhlo pomocí denzitometrie autoradiogramů a...
|
|
Vliv substrátu při stanovení PAH vázaný na nano-aerosol
Bendl, Jan ; Hovorka, Jan (vedoucí práce) ; Cajthaml, Tomáš (oponent)
Rešeršní část shrnuje problematiku polycyklických aromatických uhlovodíků (PAH), jejich chemické a fyzikálně-chemické vlastnosti, vliv na zdraví, životní prostředí a upozorňuje na odlišné chování různých PAH. Byl sestaven podrobný návod na přípravu měření vysoko- objemovým kaskádním impaktorem BGI 900 (Hi-Vol), čištění, ekvilibrace, vážení, ochrana před kontaminací substrátů a postup měření. Byl proveden experiment, kdy se za teflonový back-upový filtr umístil zvláštní PUF substrát, na který se při expozici zachytily ve významném množství plynné fáze fenanthrenu, anthracenu, fluoranthenu, pyrenu a benzo(a)anthracenu. Míra záchytu stanovených PAH rostla s rostoucí tenzí páry od 10-4 do 10-1 Pa. Ostatní měřené PAH (koronen, benzo(ghi)perylen, chrysen, benzo(b)fluoranthen, benzo(k)fluoranthen, benzo(a)pyren, dibenzo(a,h)anthracen a indeno(1,2,3-cd)pyren) s tenzí páry od 10 -5 do 10-10 Pa nebyly zachyceny. Experiment ukázal, že polyuretanové PUF terče zachytávají ve znatelném množství plynnou fázi těkavějších PAH, a proto byl proveden korekční odpočet záchytu plynné fáze v jednotlivých velikostních frakcích. Odpočet činil pro těkavé PAH jednotky až desítky procent měřených velikostních frakcí částic PAH. Experiment se uskutečnil během zimní inverze 6., 7., 8. a 13. února 2012 v Ostravě - Radvanicích,...
|
|
Optimalizace postupu stanovení obvyklé ceny bytů v developerských projektech
Vlčková, Iva ; Marková, Leonora (oponent) ; Mikš, Lubomír (oponent) ; Bradáč, Albert (vedoucí práce)
Oceňování developerských projektů a bytového fondu je širokou oblastí. Správné stanovení ceny obvyklé je důležité zejména v případě soudních sporů, exekučních řízeních, privatizaci bytového fondu, slučování společností, majetkových vstupů do společnosti, vypořádání majetku, likvidace společnosti atd. Ve všech těchto případech jde o značné finanční hodnoty a proto je pro jejich úspěšné zvládnutí nezbytné pracovat s kvalitními a věcně správnými podklady. Jedním a zároveň nejdůležitějším podkladem je kvalitní znalecký posudek, který by měl být zárukou objektivního zhodnocení všech okolností majících vliv na cenu obvyklou oceňovaného majetku, aby nedošlo k poškození některého z účastníků řízení, nebo se například vyloučily jakékoliv spekulace o možném korupčním jednání. V současnosti neexistuje metodika stanovení obvyklé ceny jednotek (bytů a nebytových prostorů) v rámci většího celku, jež by zohlednila lokalitu, umístění jednotky, její velikost, vybavení a provedení a další parametry, mající vliv na jejich jednotkovou cenu. Je však všeobecně známo, že stejná jednotka má jinou cenu v 1.NP, ve vyšších NP a v posledním NP, s výhodnou a nevýhodnou orientací oken, v objektech s různým okolím atd. Stejně tak se pocitově respektuje, že stejně vybavená a provedená jednotka o větší výměře má menší jednotkovou cenu, než jednotka o menší výměře. Oceňování v těchto případech je prováděno spíše pocitově, než na základě hlubších rozborů a zdůvodnění. Výsledkem dizertace je metodika stanovení cen jednotlivých jednotek v rámci celých objektů, resp. větších celků, která se snaží v současné době subjektivní stanovení ceny zobjektivizovat, aby stanovené obvyklé ceny byly zdůvodnitelné a nezpochybnitelné. Toto je důležité zejména při soudních sporech, exekučních řízeních, privatizaci bytového fondu, aby byla vyloučena jakákoliv předpojatost, příp. podezření z korupčního jednání. Metodika obsahuje také výpočetní program s automatickým matematickým zpracováním zadaných dat, s možností přezkoumatelnosti výsledků.
|
host ::
