|
Anthelmintics in the environment: circulation, metabolism and effects
Navrátilová, Martina ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Pohanka, Miroslav (oponent) ; Česlová, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Školicí pracoviště Katedra biochemických věd Doktorský studijní program Xenobiochemie a patobiochemie Kandidátka / kandidát Mgr. Martina Navrátilová Školitelka / školitel Assoc. Prof. Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Konzultantka / konzultant PharmDr. Ivan Vokřál, Ph.D. Název disertační práce Anthelmintika v prostředí: cirkulace, metabolismus a jejich působení Tato disertační práce se zabývá dopadem anthelmintik na životní prostředí, konkrétně se zaměřuje na jejich cirkulaci, metabolismus a účinky v životním prostředí. Primárním cílem bylo prozkoumat, do jaké míry anthelmintika, zejména albendazol, ovlivňují rostliny v laboratorních a teréních experimentech, a potenciál těchto účinků přispívat k lékové rezistenci parazitů. Laboratorní studie využívala analytickou techniku UHPLC-MS/MS ke sledování příjmu a biotransformace albendazolu a biochemické testy k posouzení fytotoxicity v rostlinách jako vojtěška a jetel. Terénní experimenty prokázaly cirkulaci albendazolu a transformačních produktů z ovčího trusu do rostlin a zpět k ovcím, což ukazuje na kontinuální expozici v životním prostředí. Dále zkoumání parazitické hlístice Haemonchus contortus odhalilo změny v expresi enzymů metabolizujících léčiva a schopnost hlístice metabolizovat albendazol,...
|
| |
| |
|
Sledování exprese aldo-ketoreduktas u vlasovky slezové
Babičková, Markéta ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Markéta Babičková Školitel: doc. Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Název diplomové práce: Sledování exprese aldo-ketoreduktas u vlasovky slezové Vlasovka slezová (Haemonchus contortus) je krev sající hlístice vyskytující se převážně u hospodářských zvířat. Tato hlístice způsobuje onemocnění zvané hemonchóza. Během svého vývoje si vytvořila rozvíjející se rezistenci na anthelmintika, což i přes dobré strategie je stále větší celosvětový problém. Aldo-ketoreduktasy (AKR) se řadí do super rodiny NADPH-dependetních oxidoreduktas katalyzujících oxidačně-redukční reakce aldehydů a ketonů v různých organismech od bakterií po savce. U savců jsou hojně exprimovány v různých tkáních. Jejich zásadní role je hlavně v metabolismu hormonů, xenobiotik, eobiotik, oxidativních molekul anebo role v lékové rezistenci. Některé druhy AKR jako je např. aldosareduktasa (ADR) jsou schopné organismus poškodit. Bohužel je o těchto enzymech v H. contortus popsáno velmi málo, a proto se tato diplomová práce zaobírá zkoumáním domnělých genů AKR v této hlístici. Pomocí sekvenace genomu se určilo 22 genů z nadrodiny AKR. Byly zjištěny exprese všech AKR ve vajíčkách, larvách a dospělcích. Dále se porovnávala exprese AKR ve vývojových...
|
|
Klonování a příprava plasmidu pro expresi reduktasy sdr12 z vlasovky slezové
Jakubcová, Štěpánka ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Zemanová, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Štěpánka Jakubcová Školitel: doc. Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Název diplomové práce: Klonování a příprava plasmidu pro expresi reduktasy sdr12 z vlasovky slezové Vlasovka slezová (Haemonchus contortus) je parazitická hlístice způsobující závažné onemocnění nazývané hemonchóza, které postihuje hospodářská zvířata, zejména ovce a kozy. Problematika rezistence hlístic na léčbu anthelmintiky představuje významný problém v zemědělském sektoru s výraznými ekonomickými dopady spojenými s nižší produktivitou zvířat. Dehydrogenasy/reduktasy s krátkým řetězcem (SDR) jsou významné enzymy podílející se na metabolické přeměně xenobiotik v organismu, které by mohly souviset s anthelmintickou rezistencí. V teoretické části diplomové práce je popsána vlasovka slezová, hemonchóza, rezistence hlístic na léčbu a biotransformace xenobiotik s důrazem na enzymy SDR. Experimentální část práce zahrnuje přípravu vektoru (plasmidu) nesoucího kódující oblast genu sdr12, expresi a izolaci příslušného proteinu. Výsledků bylo dosaženo využitím molekulárně biologických metod, jakými jsou: PCR, ligace insertu do vektoru, transformace kompetentních buněk, restrikční štěpení, sekvenování, agarosová elektroforéza a western blot....
|
|
Klonování a příprava plasmidu pro expresi reduktázy z vlasovky slezové
Klouček, David ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Laštovičková, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: David Klouček Vedoucí: doc. Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Název diplomové práce: Klonování a příprava plasmidu pro expresi reduktázy z vlasovky slezové Vlasovka slezová (Haemonchus contortus) je nejvýznamnější patogenní hlístice malých přežvýkavců, zejména ovcí a koz. Způsobuje haemonchózu, v důsledku čehož dochází k masivnímu úhynu nakažených zvířat. Hlavním řešením nákazy je farmakoterapie schválenými anthelmintiky. V současnosti je stále se zvětšujícím problémem narůstající rezistence vlasovky vůči dostupným anthelmintikům, což vede k dopadům ekologickým, tak ekonomickým. Příčin rezistence vlasovky je několik. Mezi mechanismy rezistence, jiné než v cílové molekule anthelmintika, lze zařadit zvýšenou aktivitu enzymů 1. fáze biotransformace zprostředkovanou karbonyl-redukujícími enzymy. Konkrétně aldoketoreduktázy a dehydrogenázy/reduktázy. Zvýšená aktivita těchto enzymů vede k rychlejšímu metabolismu léčiv, vzniku neúčinných metabolitů a selhání léčby. Cílem diplomové práce byla příprava plasmidu pro expresi vybrané reduktázy, který může být využit pro další studování aktivity a případně tvorbu nových cílených léčiv. Metody použité v experimentální části byly izolace RNA, reverzní transkripce, PCR,...
|
|
Změny v epigenetické regulaci v in vivo modelu NAFLD
Osobová, Klára ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Klára Osobová Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Konzultant: Mgr. Gabriela Svobodová Název diplomové práce: Změny v epigenetické regulaci v in vivo modelu NAFLD Tato diplomová práce se zabývá nealkoholovou tukovou chorobou jater (NAFLD), jedná se o skupinu jaterních onemocnění s různou mírou poškození jaterní tkáně, od prosté steatózy (NAFL) přes steatohepatitidu (NASH) po jaterní fibrózu až cirhózu. Diplomová práce se zaměřuje na popis patogeneze NAFLD a epigenetické změny s ní spojené. Cílem předkládané diplomové práce bylo zmapovat změny v epigenetické regulaci v in vivo myších modelech NAFLD, která byla navozena dietou s vysokým obsahem tuků, fruktózy a cholesterolu (FFC), aplikací glutamátu monosodného (MSG) nebo kombinací těchto faktorů. Na myších modelech byl také zkoumán vliv léčby pomocí liraglutidu a peptidu LipR31. Pomocí kvantitativní PCR (polymerázová řetězcová reakce) byly stanoveny změny v jaterní expresi mRNA pro enzymy regulující epigenetické modifikace (histondeacetylázy, DNA-metyltransferázy, histonacetyltransferázy) a v expresi mikroRNA (miR). Pro stanovení exprese proteinů HDAC8 (histondeacetyláza 8) a HDAC3 (histondeacetyláza 3) byla použita metoda imunoblot. Statisticky...
|
|
Návrh změn konceptu work-life balance ve vybrané společnosti
Grossová, Barbora ; Matoušková, Petra (oponent) ; Petrová, Kateřina (vedoucí práce)
Bakalářská práce se zaměřuje na problematiku work-life balance neboli slaďování pracovního a osobního života ve vybrané společnosti. Cíl práce je zaměřen na realizaci analýzy stávajícího stavu v oblasti work-life balance a následné navrhnutí takové změny, jejíž implementací dojde k harmonizaci pracovního a osobního života zaměstnanců. K dosažení cíle bylo zapotřebí dosáhnout dílčích cílů, které rozdělují práci na tři části – teoretickou, analytickou a návrhovou část. Teoretická část zkoumá charakteristiku problematiky spojenou s tématem bakalářské práce na základě dostupné literatury. Jsou zde definovány základní pojmy work-life balance, nástroje slaďování, flexibilní formy práce, následky špatného slaďování, motivace a odměňování. Analytická část popisuje současnou situaci společnosti, která byla analyzována pomocí metod dotazníkového šetření a analýze získaných dat. Dotazníkové šetření mělo za úkol zjistit spokojenost zaměstnanců s jejich rovnováhou mezi pracovním a osobním životem a tvořilo jej třicet tři otázek. Výsledky dotazníku ukázaly, že více než půlka zaměstnanců si myslí, že správně slaďují svůj pracovní život s osobním. Návrhová část obsahuje vypracované doporučení a odhadované náklady potřebné k aplikaci těchto návrhů za jeden rok. Mezi tyto návrhy jsem zařadila nové alternativní formy práce, semináře pro vedení i zaměstnance, nové formy motivace atd., které mají vést ke zlepšení konceptu work-life balance ve společnosti.
|
|
Anthelmintika v prostředí: cirkulace, metabolismus a jejich působení.
Navrátilová, Martina ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Pohanka, Miroslav (oponent) ; Česlová, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Školicí pracoviště Katedra biochemických věd Doktorský studijní program Xenobiochemie a patobiochemie Kandidátka / kandidát Mgr. Martina Navrátilová Školitelka / školitel Assoc. Prof. Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Konzultantka / konzultant PharmDr. Ivan Vokřál, Ph.D. Název disertační práce Anthelmintika v prostředí: cirkulace, metabolismus a jejich působení Tato disertační práce se zabývá dopadem anthelmintik na životní prostředí, konkrétně se zaměřuje na jejich cirkulaci, metabolismus a účinky v životním prostředí. Primárním cílem bylo prozkoumat, do jaké míry anthelmintika, zejména albendazol, ovlivňují rostliny v laboratorních a teréních experimentech, a potenciál těchto účinků přispívat k lékové rezistenci parazitů. Laboratorní studie využívala analytickou techniku UHPLC-MS/MS ke sledování příjmu a biotransformace albendazolu a biochemické testy k posouzení fytotoxicity v rostlinách jako vojtěška a jetel. Terénní experimenty prokázaly cirkulaci albendazolu a transformačních produktů z ovčího trusu do rostlin a zpět k ovcím, což ukazuje na kontinuální expozici v životním prostředí. Dále zkoumání parazitické hlístice Haemonchus contortus odhalilo změny v expresi enzymů metabolizujících léčiva a schopnost hlístice metabolizovat albendazol,...
|
|
Společenský dům - fara
Loudilová, Martina ; Matoušková, Petra (oponent) ; Šindlar, Jiljí (vedoucí práce)
V rámci diplomové práce je řešena novostavba společenského centra s farou. Předmětem návrhu je vyřešení bytové potřeby faráře, kancelář faráře, vytvoření nových prostor pro setkávání věřících a vytvoření nové zahrady. Na pozemku v blízkosti kostela, kde se uvažuje o nové výstavbě, byl vyčleněn pozemek pro novou faru. Stará fara je na nyní na druhém konci ulice Kostelní v rodinném domě s prodejnou, stávající bytová jednotka nesplňuje nynější požadavky. Charakteristika území Navržený objekt je zasazen na pozemek v lokalitě plánované výstavby rodinných domů. Objekt je situován v blízkosti kostela sv. Mikuláše, v plánované souběžné ulici s ulicí Kostelní. Pozemek je mírně svažitý, sklon svahu je ukloněn od kostela, tzn. jihovýchodně. Pozemek má obdélníkový půdorysný tvar, delší strany jsou situovány na sever a jih. V současnosti je pozemek využíván jako pole. Popis objektu Jedná se o jednopodlažní až dvoupodlažní nepodsklepený objekt. Dům je členěn na tři části: obytná část – byt faráře a byt pro hosty, společenská část – farní sál a hygienické zařízení, služební část – kancelář faráře a klubovna. Jednotlivé části jsou od sebe odlišeny funkcí, vzhledem i použitými materiály. V návrhu byly použity tradiční materiály jako dřevo, beton, zdivo. Tvarově je objekt řešen jako spojení tří různých hmot. Farní sál je obdélníkového půdorysu se dvěma okny. Severozápadní roh místnosti je vyvýšen tak, aby byl vytvořen dostatečný výhled na věž blízkého kostela. Okenní rám okna s výhledem na kostel je navržen se symbolikou dřevěného kříže. Druhé okno v místnosti propojuje vnější zahradu s interiérem. Vnější fasáda části objektu se sálem je tvořena pohledovým hladkým betonem, ve kterém jsou navrženy linky, které vychází ze symboliky kříže. Jedná se o několik křížů, které jsou rozmístěny dle zlatého řezu. Navržené linky navazují i na dřevěný kříž v rámu severnějšího okna. Kancelář s hlavním vstupem do objektu je řešena v příčném řezu jako oblouk, který je tvořen dřevěnými lepenými trámy. Vnější fasáda je tvořena titanzinkovým plechem, který je navržen na obloukové straně a vytváří stěnu přecházející do střešního pláště. Čelní strany kanceláře i klubovny jsou navrženy jako prosklené stěny tak, aby dominantou této části zůstala přiznaná dřevěná konstrukce oblouků. Obytná část objektu je navržena jako dvoupodlažní. Konstrukce je řešena tradiční technologií zdiva a betonových a dřevěných stropů.
|