|
|
Diagnostic potential of piwi-RNA molecules in the process of in vitro fertilization
Šeršeň, Dominika ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Raisová Stuchlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických vied Kandidát: Bc. Dominika Šeršeň, DiS. Školiteľ: doc. RNDr. Lenka Skálová, PhD. Konzultant: doc. RNDr. Miroslava Rabajdová, PhD. Názov diplomovej práce: Diagnostický potenciál piwiRNA molekúl v IVF procese Neplodnosť je v súčasnej dobe veľkým zdravotným problémom, ktorý postihuje milióny párov v reprodukčnom veku na celom svete a využitie techník in vitro oplodnenia sa celosvetovo každoročne zvyšuje. Pre úspešné in vitro oplodnenie je nevyhnutné vybrať kvalitné embryo. Napriek pokrokom pri in vitro fertilizácii je stále nedostatočné množstvo neinvazívnych a spoľahlivých biomarkerov na selekciu embryí s najvyšším vývojovým a implantačným potenciálom. Ako vhodný biomarker sa ukazujú malé nekódujúce RNA, konkrétne piwiRNA (piRNA) a mikroRNA (miRNA), secernované do extracelulárneho prostredia, ktorým je kultivačné médium. Táto práca popisuje hodnotenie kvality embryí, ich morfologické znaky v jednotlivé dni ako aj samotný anotačný systém pomocou TimeLapse systému. V ďalších kapitolách je popísané zloženie médií, ktoré sú vhodné ku kultivácii embryí, a ich analýza na omickej úrovni so zamerením na piRNA a miRNA. Hlavným cieľom tejto práce je preukázať diagnostický potenciál malých nekodujúcích RNA molekúl v in vitro...
|
|
|
Metabolismus a transport 6-prenylnaringeninu in vitro
Horní, Martin ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Raisová Stuchlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Martin Horní Školitel: doc. PharmDr. Boušová Iva, Ph.D. Konzultant: Mgr. Michaela Šadibolová Název diplomové práce: Metabolismus a transport 6-prenylnaringeninu in vitro Prenylflavonoidy představují skupinu rostlinných sekundárních metabolitů s řadou pozitivních účinků na lidské zdraví. Chmel otáčivý (Humulus lupulus L.) představuje bohatý zdroj prenylflavonoidů včetně 6-prenylnaringeninu (6-PN). 6-PN má řadu biologických účinků včetně analgetické, antiproliferativní a estrogen-modulační aktivity. I přes jeho potenciál být využit jako nutraceutikum, jsou farmakokinetické vlastnosti 6-PN stále neznámé. Tato diplomová práce měla proto dva cíle. Prvním cílem bylo stanovit jaterní a střevní metabolismus 6-PN u lidí a jaterní metabolismus 6-PN u potkanů a myší in vitro v modelu ultratenkých tkáňových řezů (PCTS). Vzorky byly analyzovány pomocí UHPLC-MS/MS. 6-PN byl metabolizován převážně na metabolity II. fáze biotransformace se čtyřmi glukuronidy a čtyřmi sulfáty identifikovanými ve studovaných PCTS. Poprvé byl identifikován nový metabolit 6-PN vznikající současnou glukuronidací a sulfatací, který nebyl dosud identifikován u jiných strukturně podobných chmelových prenylflavonoidů. Sulfonace probíhala ve...
|
|
|
Diagnostic potential of piwi-RNA molecules in the process of in vitro fertilization
Šeršeň, Dominika ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Raisová Stuchlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických vied Kandidát: Bc. Dominika Šeršeň, DiS. Školiteľ: doc. RNDr. Lenka Skálová, PhD. Konzultant: doc. RNDr. Miroslava Rabajdová, PhD. Názov diplomovej práce: Diagnostický potenciál piwiRNA molekúl v IVF procese Neplodnosť je v súčasnej dobe veľkým zdravotným problémom, ktorý postihuje milióny párov v reprodukčnom veku na celom svete a využitie techník in vitro oplodnenia sa celosvetovo každoročne zvyšuje. Pre úspešné in vitro oplodnenie je nevyhnutné vybrať kvalitné embryo. Napriek pokrokom pri in vitro fertilizácii je stále nedostatočné množstvo neinvazívnych a spoľahlivých biomarkerov na selekciu embryí s najvyšším vývojovým a implantačným potenciálom. Ako vhodný biomarker sa ukazujú malé nekódujúce RNA, konkrétne piwiRNA (piRNA) a mikroRNA (miRNA), secernované do extracelulárneho prostredia, ktorým je kultivačné médium. Táto práca popisuje hodnotenie kvality embryí, ich morfologické znaky v jednotlivé dni ako aj samotný anotačný systém pomocou TimeLapse systému. V ďalších kapitolách je popísané zloženie médií, ktoré sú vhodné ku kultivácii embryí, a ich analýza na omickej úrovni so zamerením na piRNA a miRNA. Hlavným cieľom tejto práce je preukázať diagnostický potenciál malých nekodujúcích RNA molekúl v in vitro...
|
|
|
Optimalizace extrakce fenbendazolu z environmentálních vzorků
Brodská, Denisa ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Raisová Stuchlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Denisa Brodská Školitel: doc. Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Konzultant: Mgr. Martina Navrátilová Název bakalářské práce: Optimalizace extrakce fenbendazolu z enviromentálních vzorků Anthelmintika jsou léky používané k léčbě a profylaxi infekčních onemocnění způsobených parazitickými červy. V České republice se používají především ve veterinární medicíně. Při biotransformaci účinné látky vznikají metabolity, které se vylučují spolu s parentní látkou stolicí a močí. Fenbendazol a další podobné látky se touto cestou mohou vstřebávat do půdy a následně působit na necílové organismy v prostředí. Široké využití má fenbendazol při chovu hospodářských zvířat a jelikož zvířecí exkrementy jsou často dále využívány i k hnojení, riziko obsahu léčivých látek je třeba cíleně zkoumat. Za tímto účelem bylo zapotřebí vyvinout a optimalizovat extrakční metodu a taktéž provést odpovídající validaci analytické metody, jež budou následně použitelné pro reálné vzorky v životním prostředí. Předmětem samotného výzkumu byla léčivá látka fenbendazol společně s metabolickými produkty, fenbendazol sulfoxidem a fenbendazol sulfonem. Půda byla extrahována pomocí metody QuEChERS, jenž pracuje na principu extrakce na pevné fázi. Metoda...
|
|
|
Metabolomic analysis of bile acids in various biological samples.
Hadravská, Pavlína ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Raisová Stuchlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Univerzita Východního Finska v Kuopiu, Škola Farmacie Katedra farmaceutické chemie Kandidát: Pavlína Hadravská Školitel: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Konzultant: prof. Seppo Auriola Název diplomové práce: Metabolomická analýza žlučových kyselin v různých biologických vzorcích Cílem práce bylo vyvinout vhodnou metodu pro kvalitativní a kvantitativní analýzu vybraných žlučových kyselin v myších játrech, lidské plazmě a především v lidských vlasech. Analyzováno bylo devět vybraných žlučových kyselin (kyselina cholová, deoxycholová, chenodeoxycholová, ursodeoxycholová, lithocholová, taurocholová, taurodeoxycholová, glykocholová a glykochenodeoxycholová). Identifikace a kvantifikace žlučových kyselin byly provedeny pomocí UHPLC přístroje se dvěma typy hybridních hmotnostních spektrometrů (kvadrupólovým analyzátorem spojeným s analyzátorem doby letu a s kvadrupólovým analyzátorem spojeným s orbitrapem). Snažili jsme se vyvinout metodu, která umožňuje detekci jak nekonjugovaných žlučových kyselin, tak i jejich glycinových a taurinových konjugátů v biologických vzorcích. K vývoji a optimalizaci této metody jsme využili myší játra a lidskou plazmu. Poté byla tato metoda použita k detekci žlučových kyselin v lidských...
|
|
|
Vliv vybraných seskviterpenů na antioxidační enzymy u buněčné linie HT-29
Junková, Martina ; Raisová Stuchlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Jansová, Hana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Martina Junková Školitel: RNDr. Lucie Raisová Stuchlíková, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv vybraných seskviterpenů na antioxidační enzymy u buněčné linie HT-29 Kolorektální karcinom patří mezi nejčastější nádorové onemocnění u nás. Jeho onkologická léčba sebou přináší i časté nežádoucí účinky, kvůli kterým je mnohdy pacienty špatně přijímána. Rizikem se jeví i objevující se rezistence na klasická chemoterapeutika (5-fluorouracil). Při hledání nových alternativ se staly předmětem zkoumání i některé slibně se jevící přírodní látky. Subtropický strom Myrica rubra a extrakty z něj získané obsahují mnoho biologicky aktivních látek, které jsou studovány mimo jiné pro své protirakovinné a antiproliferační účinky. Mezi hlavní seskviterpeny v silici listů M. rubra patří β-karyofylen (BCP), β-karyofylenoxid (CAO), α-humulen (HUM), trans-nerolidol (NER) a valencen (VAL). V naší práci byl zkoumán účinek silice M. rubra, HUM a NER v koncentracích 25 a 50 μg/ml po 24 hodinové inkubaci u buněčné linie HT-29 na aktivitu antioxidačních enzymů, jejich transkripci a množství proteinů. Sledovanými enzymy byly glutathionperoxidasa (GPx), glutathionreduktasa (GR), glutathion-S-transferasa (GST), katalasa (CAT),...
|
|
|
HPLC-high resolution mass spectrometry analysis of in vitro and in vivo metabolism of scoparone
Novák, Filip ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Raisová Stuchlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Univerzita Východního Finska, Škola farmacie Katedra farmaceutické chemie Kandidát: Filip Novák Školitel: Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Konzultant: prof. Seppo Auriola Název diplomové práce: In vitro a in vivo analýza metabolismu skoparonu pomocí HPLC a hmotnostní spektrometrie s vysokým rozlišením Skoparon je účinnou složkou v rostlině Artemisia scoparia používané v tradiční čínské medicíně. Byl předmětem studií pro nejrůznější farmakologické účinky jako upregulace konjugačních enzymů zodpovědných za exkreci bilirubinu, snížení hladin prozánětlivých cytokinů, snížení hladin plasmatických lipidů nebo inhibice agregace krevních destiček. V této práci byl studován metabolismus skoparonu pomocí LC-MS metody využívající Q-ToF analysátor. In vitro oxidace skoparonu byla studována po inkubaci s mikrosomy připravenými ze vzorků jater ze šesti různých savčích druhů. Celkem bylo v in vitro vzorcích identifikováno 6 metabolitů. Skopoletin a isoskopoletin byly identifikovány jako hlavní metabolity u každého z vybraných druhů, nicméně celková míra oxidace skoparonu i poměr vznikajícího isoskopoletinu a skopoletinu se lišily. Dále byly studovány in vivo metabolity skoparonu ve vzorcích moči získaných od dvou zdravých...
|
|
|
Vliv monepantelu na expresi vybraných enzymů u vlasovky slezové
Jelenková, Klára ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Raisová Stuchlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Klára Jelenková Školitel: Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv monepantelu na expresi vybraných enzymů u vlasovky slezové Vlasovka slezová (Haemonchus contortus) je parazitická hlístice, která je původcem hemonchózy, celosvětově rozšířeného onemocnění malých přežvýkavců způsobujícího pokles produktivity a v mnoha případech i úmrtí zvířat. Pro prevenci a léčbu tohoto onemocnění jsou dlouhodobě využívaná léčiva - anthelmintika. Vlivem jejich častého používání a nedostatku inovací v této skupině farmak si na ně parazité postupně vybudovali rozsáhlou rezistenci. Novou nadějí v terapii hemonchóz je monepantel, léčivo ze skupiny derivátů aminoacetonitrilu s jedinečným mechanismem účinku uvedené na trh po více než 25 letech od registrace posledního léčiva ze skupiny anthelmintik. I přes počáteční velký úspěch se v posledních letech stále častěji objevují informace o výskytu rezistence na toto léčivo. Současné poznatky o mechanismech rozvoje rezistence a faktorech, které ji ovlivňují, jsou stejně jako informace o působení léčiv na molekulární úrovni stále nedostatečné. Pro omezení rozvoje rezistence v budoucnosti je důležité tyto vědomosti intenzivně rozvíjet. V této práci byl zkoumán...
|
|
| |
|
|
HPLC-high resolution mass spectrometry analysis of in vitro and in vivo metabolism of scoparone
Novák, Filip ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Raisová Stuchlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Univerzita Východního Finska, Škola farmacie Katedra farmaceutické chemie Kandidát: Filip Novák Školitel: Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Konzultant: prof. Seppo Auriola Název diplomové práce: In vitro a in vivo analýza metabolismu skoparonu pomocí HPLC a hmotnostní spektrometrie s vysokým rozlišením Skoparon je účinnou složkou v rostlině Artemisia scoparia používané v tradiční čínské medicíně. Byl předmětem studií pro nejrůznější farmakologické účinky jako upregulace konjugačních enzymů zodpovědných za exkreci bilirubinu, snížení hladin prozánětlivých cytokinů, snížení hladin plasmatických lipidů nebo inhibice agregace krevních destiček. V této práci byl studován metabolismus skoparonu pomocí LC-MS metody využívající Q-ToF analysátor. In vitro oxidace skoparonu byla studována po inkubaci s mikrosomy připravenými ze vzorků jater ze šesti různých savčích druhů. Celkem bylo v in vitro vzorcích identifikováno 6 metabolitů. Skopoletin a isoskopoletin byly identifikovány jako hlavní metabolity u každého z vybraných druhů, nicméně celková míra oxidace skoparonu i poměr vznikajícího isoskopoletinu a skopoletinu se lišily. Dále byly studovány in vivo metabolity skoparonu ve vzorcích moči získaných od dvou zdravých...
|
host ::
RSS.