|
|
Příprava STAT3-knockoutované buněčné linie glioblastoma multiforme pomocí metody CRISPR-Cas9
Papinčáková, Dominika ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Laštovičková, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králová Katedra biochemických vied Kandidát: Bc. Dominika Papinčáková Školiteľ: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Názov diplomovej práce: Príprava STAT3-knockoutovanej bunkovej línie glioblastomu multiforme pomocou metódy CRISPR-Cas9 Glioblastoma multiforme (GBM) je jedným z najčastejších primárnych nádorov mozgu u dospelých a jedným z najfatálnejších nádorových ochorení u ľudí. Kľúčovým onkogénom vo vývoji a progresii GBM je signálny transduktor a aktivátor transkripcie 3 (STAT3), ktorý je jedným z mediátorov tumorgenézy. V GBM je permanentne aktivovaný, čo vedie k zvýšenej bunkovej proliferácii, invazivite a angiogenéze. Cieľom tejto práce bolo vytvoriť bunkovú líniu GBM STAT3-knockout (STAT3-KO). Na tento účel sa použila bunková línia U87MG a metóda na knockoutovanie génov CRISPR- Cas9. V prvom kroku sme skúmali možnosť tlmenia expresie STAT3 pomocou siRNA a vhodnosť tohto typu buniek na presné dourčenie mechanizmu na editáciu génov CRISPR do bunky. V druhom kroku sme transfekovali bunky pomocou súpravy na knockoutovanie génu STAT3 (CRISPR) a testovali úspešnosť knockoutu. Vo vytvorenej STAT3-KO GBM bunkovej línii sme potvrdili STAT3-KO na úrovni DNA, RNAa proteínu. Následne sme na bunkovú líniu U87MG a U87MG-STAT3-KO pôsobili temozolomidom...
|
|
|
Příprava STAT3-knockoutované buněčné linie glioblastoma multiforme pomocí metody CRISPR-Cas9
Papinčáková, Dominika ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Laštovičková, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králová Katedra biochemických vied Kandidát: Bc. Dominika Papinčáková Školiteľ: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Názov diplomovej práce: Príprava STAT3-knockoutovanej bunkovej línie glioblastomu multiforme pomocou metódy CRISPR-Cas9 Glioblastoma multiforme (GBM) je jedným z najčastejších primárnych nádorov mozgu u dospelých a jedným z najfatálnejších nádorových ochorení u ľudí. Kľúčovým onkogénom vo vývoji a progresii GBM je signálny transduktor a aktivátor transkripcie 3 (STAT3), ktorý je jedným z mediátorov tumorgenézy. V GBM je permanentne aktivovaný, čo vedie k zvýšenej bunkovej proliferácii, invazivite a angiogenéze. Cieľom tejto práce bolo vytvoriť bunkovú líniu GBM STAT3-knockout (STAT3-KO). Na tento účel sa použila bunková línia U87MG a metóda na knockoutovanie génov CRISPR- Cas9. V prvom kroku sme skúmali možnosť tlmenia expresie STAT3 pomocou siRNA a vhodnosť tohto typu buniek na presné dourčenie mechanizmu na editáciu génov CRISPR do bunky. V druhom kroku sme transfekovali bunky pomocou súpravy na knockoutovanie génu STAT3 (CRISPR) a testovali úspešnosť knockoutu. Vo vytvorenej STAT3-KO GBM bunkovej línii sme potvrdili STAT3-KO na úrovni DNA, RNAa proteínu. Následne sme na bunkovú líniu U87MG a U87MG-STAT3-KO pôsobili temozolomidom...
|
|
|
Stanovení parametrů ovariální funkce
Jará, Barbora ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Laštovičková, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Název práce: Stanovení parametrů ovariální funkce Vedoucí práce: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Školitelka: RNDr. Michala Vosátková, MBA Vypracovala: Barbora Jará Hladiny hormonů řídících funkce ovarií jsou důležitými ukazateli vývoje i zdravotního stavu ženského organismu. Pro správné diagnostické postupy je důležité laboratorní vyšetření a správná interpretace výsledků. Z hormonů ovariálních funkcí je nejčastěji testována hladina estradiolu, progesteronu, luteinizačního a folikulostimulačního hormonu. Používají se separační a imunochemické metody. Pro běžnou klinickou praxi jsou imunochemické metody vhodné zejména svou dostupností, relativní přesností, nenáročností a rychlostí zpracování. Jejich nedostatkem je nemožnost standardizace jednotlivých metodických přístupů. Sérii vyšetření a interpretaci výsledků získaných pomocí imunochemických metod lze provádět pouze v rámci jednoho pracoviště. Klíčová slova: estradiol, imunochemické metody, ECLIA, CMIA, RIA
|
|
| |
|
|
Ovlivnění antioxidačního systému vojtěšky seté albendazolem v reálných podmínkách
Lisoňková, Monika ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Laštovičková, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Monika Lisoňková Školitel: prof. Ing. Barbora Szotáková, PhD. Název diplomové práce: Ovlivnění antioxidačního systému vojtěšky seté albednazolem v reálných podmínkách Anthelmintika jsou léčiva využívaná k léčbě nemocí způsobených parazitickými červy. V České republice se používají hlavně ve veterinární medicíně. Benzimidazolové anthelminitkum albendazol se používá u skotu a ovcí, během jeho biotransformace se tvoří metabolity, které se vylučují spolu s parentní látkou trusem a močí. Aplikace trusu z ošetřeného skotu na pole může ovlivnit necílové organismy vyskytující se na poli. Příkladem necílových druhů jsou zemědělské plodiny, včetně vojtěšky seté (Medicago sativa). Rostliny nemají schopnost eliminovat absorbované látky a jejich metabolity, proto se v nich ukládají a mohou ovlivnit antioxidační systém roslin. Cílem této studie bylo sledovat účinek albendazolu na antioxidační systém vojtěšky seté (M. sativa) v reálných podmínkách. Rostliny byly ovlivněny trusem ovcí ošetřených albendazolem. Subcelulární frakce byly připraveny z rostlin sklizených v roce 2019 a 2020. V těchto frakcích byly měřeny aktivity vybraných antioxidačních enzymů. U rostlin z roku 2020 byly také změřeny koncentrace...
|
host ::
RSS.