|
|
Rekombinantní příprava receptorů potkaních NK buněk v expresním systému HEK293T.
Celadová, Petra ; Bezouška, Karel (vedoucí práce) ; Půta, František (oponent)
NK buňky hrají důležitou roli v imunitní odpovědi proti nádorovým a virově infikovaným buňkám. Exprimují široké spektrum různých povrchových receptorů, mezi které patří také NKRP1. Jedná se o rodinu C-lektinových receptorů, která zahrnuje receptory jak s inhibiční, tak s aktivační funkcí. Poměrně nedávno byly pro některé molekuly z této rodiny nalezeny ligandy, které patří taktéž do nadrodiny C-lektinových receptorů . Jedná se mj. o potkaní Clr-b, fyziologický ligand pro NKRP1B. Bylo zjištěno, že inhibiční funkce receptorového komplexu NKRP1B-Clr-b může být nabourána proteinem potkaního cytomegaloviru RCTL, virové verze Clr-b, která slouží jako falešný ligand pro NK buňky. Cílem mé diplomové práce bylo klonování a příprava zmíněných C-lektinových receptorů v transientně transfekované HEK293T buněčné linii v suspenzní kultuře. Tento expresní systém umožňuje získat proteiny s uspokojivým výsledkem, a to v jejich nativní konformaci, čímž je odstraněna potřeba časově náročných a často bezvýsledných pokusů o renaturaci proteinů připravených pomocí bakteriálního expresního systému v E. coli. Úspěchu bylo dosaženo v případě Clr-b a NKRP1B receptorů potkaních kmenů WAG i SD. Proteiny byly purifikovány za pomoci chelatační chromatografie následované gelovou filtrací, identifikovány hmotnostní spektrometrií a...
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
|
Multivalentní glykokonjugáty ve studiu interakce lektinových receptorů NK/NKT buněk
Vannucci, Luca ; Pospíšil, Miloslav ; Rossmann, Pavel ; Chernyavskiy, Oleksandr ; Kubínová, Lucie ; Křen, Vladimír ; Luptovcová, Martina ; Svoboda, Jan ; Kuldová, Markéta ; Bezouška, Karel ; Fišerová, Anna
Podání GN8 v in vitro, in vivo a ex vivo podmínkách zvyšuje expresi CD69 antigenu. CD69-dependentní produkce IFNg je ovlivněna rovněž aktivací NKG2D a Ly49 receptorů. Glykodendrimery jsou vhodné pro studium NK/NKT buněčné aktivační sítě lektinových receptorů v potkaních a myších modelech
|
|
| |
host ::
RSS.