|
|
Proteomická analýza vybraných onkohematologických onemocnění
Pimková, Kristýna ; Petrák, Jiří (oponent)
Oxidative stress is an important factor in carcinogenesis of oncohematological diseases. However its role in the pathogenesis of myelodysplastic syndromes (MDS) remains unclear. In this study, we have determined the oxidative status and evaluated proteomic changes in plasma of MDS patients as a consequence of oxidative dysbalance (oxidative modifications, protein-protein interaction and complex forming). We measured the levels of total cysteine, homocysteine, cysteinyglycine, glutathione, nitrites and nitrates in the plasma from 61 MDS patients and 23 healthy donors using high performance liquid chromatography. Glutathione and nitrites levels reduced significantly while other aminothiols levels increased significantly in plasma of MDS patients. This association with oxidative stress did not correlate with iron overload. We also found enhanced levels of asymmetric dimethylarginine in serums of middle aged patients with MDS that correlate to posttranslational modifications of proteins arginyl residues. Furthermore, carbonylated proteins level was significantly elevated in MDS patients compared to healthy donors. Using mass spectrometry, 5 S-nitrosylated blood platelets proteins were identified in plasma and blood platelets of MDS patients and set of 16 plasma proteins with high probability of...
|
|
|
Nové trendy v mezinárodní obchodní arbitráži
Jakoubek, Lukáš ; Brodec, Jan (oponent) ; Pfeiffer, Magdalena (oponent)
Tato práce se zabývá nejnovějšími trendy v mezinárodní obchodní arbitráži. Konkrétně se blíže zaměřuje na transparentnost mezinárodních investičních arbitráží a financování třetích stran v mezinárodní obchodní arbitráži. Cílem práce je poskytnout ucelený výklad postupného vývoje zmíněných trendů a zároveň přiblížit potencionálnímu českému čtenáři aktuální otázky mezinárodní arbitráže čerpající zejména ze zahraničních zdrojů. Práce je rozdělena do 3 kapitol. První kapitola se věnuje obecnému vymezení postavení rozhodčího řízení v systému řešení sporů a poskytuje jeho základní srovnání s mezinárodní rozhodčím řízením. Současně nabízí pohled na výhody a nevýhody tohoto typu řízení a na závěr pojednává o zásadách důvěrnosti a neveřejnosti rozhodčího řízení. Druhá kapitola se dělí na dvě hlavní části. První z nich je zaměřena na definování klíčových pojmů specifické úpravy mezinárodní investiční arbitráže, včetně různých režimů zacházení s mezinárodními investicemi za účelem jejich ochrany. Dále obsahuje podrobný popis nejvýznamnějších pramenů práva mezinárodních investic a blíže rozebírá způsoby řešení investičních sporů. Druhá část druhé kapitoly poskytuje podrobný rozbor sílícího trendu transparentnosti mezinárodních investičních arbitráží v kontextu tzv. Pravidel transparentnosti a Mauricijské...
|
|
|
Vývoj a aplikace afinitního nosiče pro izolaci lidských karbonyl-redukujících enzymů
Andrýs, Rudolf ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Šebela, Marek (oponent) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Mgr. Rudolf Andrýs Školitel: Prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. Název disertační práce: VÝVOJ A APLIKACE AFINITNÍHO NOSIČE PRO IZOLACI LIDSKÝCH KARBONYL-REDUKUJÍCÍCH ENZYMŮ Již po několik tisíciletí tvoří základ lidské medicíny malé bioaktivní molekuly, které byly podávány ve formě rostlinných extraktů nebo syntetický připravených sloučenin. Jejich využití v moderní lékařské vědě ovšem není možné bez detailního porozumění jejich biochemických účinků a identifikace jejich molekulárních cílů. Metody chemické proteomiky, založené na specifické interakci mezi bioaktivní látkou a cílovou molekulou, patří v současné době k nejpoužívanějším technikám při identifikaci molekulárních cílů malých molekul. Oproti klasickým biochemickým metodám (např. 2D elektroforéza) se jedná o citlivé a především velmi selektivní techniky, díky kterým lze z komplexních biologických vzorků úspěšně identifikovat i biomolekuly, které se přirozeně vyskytují jen ve velmi malých koncentracích. Takovými biomolekulami jsou i karbonyl-redukující enzymy, které představují fyziologicky důležitou skupinu proteinů, jelikož se podílí na metabolismu řady endogenních (např. prostaglandiny, steroidní hormony) i xenobiotických (např....
|
|
|
In vitro hodnocení fotodynamické aktivity derivátů tetrapyridoporphyrazinu pro léčbu solidních nádorů
Jedličková, Adéla ; Macháček, Miloslav (vedoucí práce) ; Šimůnek, Tomáš (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Adéla Jedličková Školitel: Mgr. Miloslav Macháček Název diplomové práce: In vitro hodnocení fotodynamické aktivity derivátů tetrapyridoporphyrazinu pro léčbu solidních nádorů Mezi hlavní příčiny úmrtí v dnešní době bezesporu patří nádorová onemocnění, jejichž výskyt stále stoupá. Proto se výzkum v oblasti léčby významně zaměřuje na vývoj nových potenciálních protinádorových léčiv a terapeutických přístupů. Fotodynamická terapie (PDT) dnes patří mezi klinicky schválené terapeutické metody pro léčbu maligních i nemaligních onemocnění. Jejími hlavními složkami jsou fotosenzitizér (PS), světlo a kyslík, které samy o sobě nejsou toxické, ale společnou interakcí vedou ke vzniku vysoce reaktivních molekul. Metoda je založena na absorpci světla o vhodné vlnové délce molekulou PS a následném přenosu energie fotonů na okolní molekuly, především na kyslík, za vzniku cytotoxických reaktivních forem kyslíku (ROS), kde hlavní roli hraje singletový kyslík. ROS následně poškozují okolní buněčné struktury, jejichž destrukce vede k nevratnému poškození buněčných funkcí a následné buněčné smrti, jejíž typ úzce souvisí s lokalizací PS uvnitř buňky. Výsledný efekt léčby je dán třemi propojenými mechanismy - přímým...
|
|
|
Metabolismus anthelmintik v rostlinách
Pavlík, František ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Vokřál, Ivan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: František Pavlík Školitel: Prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Konzultant: RNDr. Radka Podlipná, Ph.D. Název diplomové práce: Metabolismus anthelmintik v rostlinách Anthelmintika vstupují do životního prostředí převážně s exkrementy právě léčených zvířat. Mohou způsobovat mnoho nežádoucích účinků v ekosystému, ovlivňovat necílové živočišné organismy, popřípadě se akumulovat v rostlinách. Po opětovné konzumaci těchto rostlin hospodářskými zvířaty na pastvě může dojít k rozvoji rezistence u helmintů. Tato práce je zaměřena na studium biotransformace často používaných anthelmintik flubendazolu (FLU), albendazolu (ABZ), fenbendazolu (FBZ), ivermektinu (IVM) a monepantelu (MOP) v typických lučních květinách zvonku okrouhlolistém (Campanula rotundifolia) a jitroceli kopinatém (Plantago lanceolata), které mohou na pastvách často přijít do kontaktu s anthelmintiky v exkrementech hospodářských zvířat. Jako in vitro modely byly použity buněčné suspenze zvonku okrouhlolistého a jitrocele kopinatého, dále pak in vitro regeneranty jitrocele kopinatého. Nebyl nalezen žádný toxický efekt anthelmintik na rostliny. Rostliny byly schopny metabolizovat anthelmintika do široké škály různých metabolitů, jejichž...
|
|
|
Vliv vybraných látek ovlivňujících centrální nervový systém na kostní metabolismus
Fekete, Soňa ; Živný, Pavel (vedoucí práce) ; Horák, Petr (oponent) ; Nobilis, Milan (oponent)
Zvýšení průměrné délky života světové populace je spojeno se zdravotními problémy. Jedním z těchto problémů, který se často vyskytuje obzvláště u starších lidí je snížení kvantity a kvality kostní hmoty nebo-li osteoporóza. Je to systémové skeletální onemocnění způsobené úbytkem kostní hmoty a u žen i mužů představuje významný zdravotní problém. Je charakterizována nízkou kostní hmotou, poškozením mikroarchitrektury kostní tkáně a zvýšením křehkosti kostí s náchylností ke zlomeninám. Osteoporotické fraktury významně zvyšují morbiditu a mortalitu pacientů. Mezi rizikové faktory, které mohou mít vliv na vznik osteoporózy patří dlouhodobé užívání léků, jako jsou např. antiepileptika a antidepresiva. Cílem této práce bylo zhodnotit účinek orchidektomie a vliv novějších antiepileptik (levetiracetam, lacosamid, topiramat, lamotriginu) a antidepresiv (mirtazapin, venlafaxinu a trazodonem) na kostní metabolismus u zdravých samců potkanů kmene wistar. Prvním cílem bylo zjistit vliv orchidektomie na metabolismus kostí u potkanů. Zjistili jsme, že orchidektomie měla negativní vliv na kostní metabolismus u potkanů. Tyto výsledky potvrzují, že tato zvířata jako vhodné modely pro zkoumání androgenní modulace složení těla. Druhým cílem bylo zjistit vliv vybraných antiepileptik (levetiracetamu, lacosamid,...
|
|
|
Vyhledání referenčních genů pro relativní kvantifikaci mRNA z Haemonchus contortus
Růžičková, Michaela ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Zemanová, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Michaela Růžičková Školitel: Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Název diplomové práce: Vyhledání referenčních genů pro relativní kvantifikaci mRNA z Haemonchus contortus Haemonchus contortus je parazitická hlístice, jejíž multirezistence k anthelminti- kům je celosvětovým problémem ohrožujícím hlavně chovy malých přežvý- kavců. V roce 2013 byl publikován její genom a transkriptom, což umožnilo rozsáhlý výzkum genové exprese. Referenční geny pro tyto studie prozatím ne- byly stanoveny. Použití vhodných referenčních genů je nezbytné pro správnou normalizaci hladin exprese genů. Cílem této práce bylo navrhnout a zhodnotit potenciální referenční geny pro studie genové exprese u dospělců H. contortus. Navrženo bylo 11 genů, stabilita jejich exprese byla hodnocena na samcích a sa- micích dvou kmenů H. contortus, jednoho na anthelmintika vnímavého (ISE) a druhého multirezistentního (WR). Z jedinců byla extrahována RNA, přepsána reverzní transkripcí do cDNA. Tato byla zředěna a analyzována kvantitativní real-time PCR s detekcí pomocí SYBR Green I. Stabilita exprese byla hodnocena počítačovými programy BestKeeper, geNorm, NormFinder a komparativní CT metodou. Nejstabilnějšími geny se jeví ncbp, ama, sodc, gapdh a...
|
|
|
Vliv albendazolu na proliferaci buněk in vitro
Fišerová, Kateřina ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Jirkovská, Anna (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Kateřina Knoppová Školitel: Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Školitel specialista: RNDr. Věra Králová, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv albendazolu na proliferaci buněk in vitro Albendazol (ABZ) patří mezi benzimidazolová anthelmintika a je široce využíván k léčbě parazitárních onemocnění člověka i zvířat. Mechanismus účinku spočívá v inhibici polymerace mikrotubulů, ke které dojde po navázání ABZ na β-podjednotku tubulinu parazitů. V důsledku toho následně dochází k narušení životních funkcí parazita a k jeho smrti. Po objasnění tohoto mechanismu byl ABZ testován jako látka s možným protinádorovým účinkem. Bylo prokázáno, že je schopen inhibovat proliferaci některých nádorových buněčných linií. V této práci jsme se zabývali účinkem ABZ na proliferaci buněk in vitro. Pro potřeby našeho experimentu byly použity buněčné linie odvozené od kolorektálního karcinomu - SW 480 a SW 620 společně s buněčnou linií NCM 460, odvozenou z buněk normální střevní sliznice. Buňky byly ovlivněny koncentracemi ABZ v rozmezí 0,01 - 10 µM a následně inkubovány 24, 48 a 72 hod. Pro stanovení viability buněk jsme použili metody WST-1 a test neutrální červeně (NRU). V případě obou metod ABZ inhiboval proliferaci...
|
|
|
Stanovení aktivity a exprese vybraných isoforem glutathion-S-transferasy v in vivo modelu glutamátem navozené obezity
Košťáková, Šárka ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Skálová, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Šárka Košťáková Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Název diplomové práce: Stanovení aktivity a exprese vybraných isoforem glutathion-S-transferasy v in vivo modelu glutamátem navozené obezity Obezita je chronické onemocnění s narůstající prevalencí v celosvětovém měřítku. Toto onemocnění je spojeno s patofyziologickými změnami v organizmu, jedna z nich je možný vliv na antioxidační obranu organizmu. Cílem této práce bylo stanovit specifickou aktivitu, proteinovou expresi a hladinu mRNA vybraných izoforem glutation-S- transferázy (GST) v cytozolu ledvin a srdcí myších samců kmene NMRI s obezitou navozenou opakovaným subkutánním podáním glutamátu sodného (MSG) a u zdravých kontrolních myší. Specifická aktivita byla stanovena spektrofotometrickou metodou za použití univerzálního a specifických substrátů. Proteinová exprese izoforem GST z rodin GSTA, GSTM a GSTP byla sledována pomocí denaturující akrylamidové elektroforézy a imunoblottingu. Hladina mRNA vybraných genů GST byla stanovena pomocí real-time PCR. V cytozolové frakci ledvin MSG myší byl pozorován nárůst celkové specifické aktivity GST (univerzální substrát) o 31 %, který byl provázen vzrůstem proteinové exprese izoformy GSTA...
|
|
|
Vliv Goeckermanovy terapie na vybrané parametry imunity u pacientů s psoriázou
Kondělková, Kateřina ; Andrýs, Ctirad (vedoucí práce) ; Posová, Helena (oponent)
1 Souhrn Vliv Goeckermanovy terapie na vybrané parametry imunity u pacientů s psoriázou Psoriáza je systémová zánětlivá choroba s manifestací na kůži. Goeckermanova terapie (GT) představuje klasický přístup léčby psoriázy a je založena na denní aplikaci farmaceutického uhelného dehtu na zasaženou pokožku s následnou expozicí UV světla. Cílem této práce bylo sledovat vybrané imunologické markery a populace buněk u pacientů s psoriázou a zkoumat vliv GT na tyto parametry. Hodnotili jsme počty T regulačních lymfocytů (Treg), membránovou expresi vychytávacího receptoru CD163 na monocytech, hladiny solubilní CD163 (sCD163), membránovou expresi TLR2 a TLR4 na monocytech a solubilní TLR2 v séru (sTLR2). Imunofluorescenční analýza byla provedena na zlyzované periferní krvi pomocí průtokového cytometru FC500 Cytomics (Beckman Coulter) and FACSCalibur (Becton Dickinson). Hladina solubilních markerů byla stanovena pomocí ELISA kitů. Nenašli jsme žádné významné rozdíly v relativních počtech Treg lymfocytů v periferní krvi kontrolní skupiny a pacientů s psoriázou před zahájením léčby GT. Po GT došlo k výraznému vzestupu v relativním počtu Treg lymfocytů. V porovnání s hodnotami u kontrolní skupiny byly hodnoty jak CD163 tak sCD163 u pacientů s psoriázou před GT signifikantně vyšší. sCD163 byla u pacientů po terapii...
|
host ::
RSS.