|
|
Studium vlivu antiretrovirálních léčiv na transmembránový transport tenofoviru disoproxil fumarátu přes monovrstvu MDCKII-ABCB1 buněk
Repeľová, Beáta ; Červený, Lukáš (vedoucí práce) ; Čečková, Martina (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študentka: Beáta Repeľová Školiteľ: PharmDr. Lukáš Červený, Ph.D. Názov diplomovej práce: Studium vlivu antiretrovirálních léčiv na transmembránový transport tenofoviru disoproxil fumarátu přes monovrstvu MDCKII - ABCB1 buněk Tenofovir disoproxil fumarát (TDF), esterové proliečivo tenofoviru, sa radí medzi najvyužívanejšie komponenty kombinovanej antiretrovírusovej terapie. Typické je jeho široké uplatnenie a dobrá tolerovateľnosť pacientmi. Medzi faktory obmedzujúce biodostupnosť po orálnom podaní a distribúciu TDF, patrí liekový efluxný transportér P-glykoproteín (P-gp), ktorého je substrátom. Množstvo antiretrovírusových liečiv je známymi substrátmi, či inhibítormi P-gp, z čoho sa dá predpokladať vznik liekových interakcií na úrovni transmembránového transportu. Cieľom tejto práce bolo popísať vplyv súčasne podaných antiretrovírusových látok na transmembránový transport TDF cez monovrstu buniek MDCKII pomocou obojsmerného transportu a koncentračného ekvilibria. Vyhodnotením experimentov sme potvrdili, že TDF je substrátom P-gp. Po celú dobu trvania experimentov sme zaznamenávali vysoké hodnoty efluxného pomeru vyjadrujúceho transmembránový transport TDF cez monovrstvu parentných buniek, čo naznačovalo zapojenie...
|
|
| |
|
|
HIV/AIDS v českých denících v proměnách času (1996-2009)
Kvášová, Sabina ; Nečas, Vlastimil (vedoucí práce) ; Šoltys, Otakar (oponent)
Předkládaná magisterská práce "HIV/AIDS v českých denících v proměnách času (1996-2009)" pojednává o mediálním pokrytí tématu HIV/AIDS v denících MF Dnes, Blesk a Hospodářské noviny v letech 1996, 1998, 2000, 2004 a 2009. Práce konfrontuje z dlouhodobého hlediska mediální agendu (reálný počet článků a témat, které byly v souvislosti s problematikou HIV/AIDS v analyzovaných denících uveřejněny) s reálným počtem nově hlášených HIV pozitivních a sleduje objem finančních dotací Ministerstva zdravotnictví (MZ ČR) určených na prevenci v této oblasti; odpovídá na otázku, zda jsou témata HIV/AIDS médii zpravidla zpracovávána epizodicky s důrazem na příběh; identifikuje hlavní témata, která se v rámci problematiky HIV/AIDS v médiích nejčastěji objevují a konkrétně se hlouběji zabývá frekventovaným tématem celebrit v souvislosti s HIV/AIDS. Práce mimo jiné konfrontuje dosažené výsledky o mediálním pokrytí tohoto tématu, dosud nevyléčitelné nemoci AIDS,v českých denících se zahraničními pracemi, které se tomuto tématu v rámci mediálních studií věnují. Samotnou analýzu tvoří dvě části sledující specifické aspekty za použití různých analytických nástrojů. Kvantitativní obsahová analýza sleduje články, které se v analyzovaných denících o tématu HIV/AIDS objevují. Druhá část doplňuje studii o kvalitativní šetření tématu...
|
|
|
Příprava a charakterizace vazebných proteinů mimikujících epitopy protilátek neutralizujících virus HIV-1
Šulc, Josef ; Malý, Petr (vedoucí práce) ; Novotný, Marian (oponent)
Tři dekády trvající pandemie viru HIV stála život již desítky milionu lidí, další desítky milionů se s touto nevyléčitelnou chorobou potýkají do dnešního dne. Současné neúspěchy ve vývoji ochranné vakcíny jsou způsobeny zejména extrémní mutační schopností viru, jeho velmi efektivním molekulárním štítem odrážejícím útoky imunitního systému a jeho nesmírnou variabilitou. Významným přelomem posledních let byl popis řady tzv. široce neutralizujících protilátek proti HIV-1, které nesou velmi účinnou a širokou neutralizační odezvu. Dosud se však nepodařilo nalézt cestu k navození vysoké produkce podobně účinných neutralizačních protilátek, které by ochránili imunizované jedince před infekcí a případným rozvojem syndromu AIDS. Tato práce popisuje výsledky výzkumu, který vedl k in vivo i in vitro prokázání funkčnosti konceptu tzv. proteinové mimetiky, tedy schopnosti kopírovat epitop virových povrchových proteinů, a tak vybudit účinnou imunitní odpověď ve formě produkce cílených široce neutralizujících protilátek. Účinek v tomto přístupu přináší rekombinantní vazebné proteiny na bázi proteinového scaffoldu Myomedin. Tato práce popisuje výběr a charakterizaci vazebných proteinů mimikujících epitopy nejúčinnější široce neutralizující protilátky 10E8. Ukazuje, že vazebné afinity vybraných Myomedinových...
|
|
|
Structural studies of LEDGF/p75 interactions
Těšina, Petr
4 ABSTRAKT Protein LEDGF/p75 je lidský transkripční koaktivátor, který je asociován s epigenetickými modifikacemi transkripčně aktivního chromatinu. Je také nezbytný v procesu integrace HIV do genomu hostitelské buňky a v leukemogenezi způsobené fúzními produkty genu kódujícího protein MLL1. Interakce proteinu LEDGF/p75 s HIV integrázou a komplexem MLL1-menin jsou považovány za potenciální cíl terapeutického zásahu. Interakce proteinu LEDGF/p75 s HIV integrázou i MLL1 jsou zprostředkovány tzv. integrázu vážící doménou (IBD - integrase binding domain). Zatímco patofyziologické interakce IBD LEDGF/p75 byly intenzivně studovány, těm fyziologickým byla věnována malá pozornost. Mimo HIV integrázy a MLL1 interaguje LEDGF/p75 skrze IBD také s proteiny JPO2, PogZ, ASK a MLL2. Jelikož se interakce IBD s HIV integrázou stala cílem pro vývoj inhibitorů, bylo nutné získat informace o ostatních interakcích této domény. Jen díky detailní charakterizaci všech interakcí IBD je možné zajistit specifické cílení vyvíjených inhibitorů. Proteinový komplex IBD-MLL1-menin byl již dříve strukturně charakterizován, ale pouze částečně. Pomocí NMR spektroskopie se nám podařilo zmapovat novou interakční oblast komplexu IBD-MLL1. Toto navazující interakční rozhraní je schopné zajistit interakci IBD s MLL1 i bez přítomnosti meninu,...
|
|
|
Nastavení optimálního režimu vyšetřování markerů sledovaných klinicky významných infekcí u dobrovolných dárců krve
Dušková, Daniela ; Tesař, Vladimír (vedoucí práce) ; Borovanský, Jan (oponent) ; Průša, Richard (oponent)
Název práce: Nastavení optimálního režimu vyšetřování markerů sledovaných klinicky významných infekcí u dobrovolných dárců krve Autor práce: MUDr. Daniela Dušková Vedoucí práce: prof. MUDr. Vladimír Tesař, Dr.Sc., MBA, FASN Tato disertační práce si klade za cíl přispět k diskuzi o rozšíření rutinního screeningového vyšetřování dárců krve v zařízeních transfuzní služby v České republice zavedením přímého vyšetřování vybraných infekčních agens molekulárně biologickými metodami. V úvodu teoretické části je připomenut stručným pohledem do historie vývoj a přelomové události v transfuzní medicíně. Následuje část věnovaná problematice infekčních chorob souvisejících s transfuzí a obecným vyšetřovacím postupům používaným v transfuzní medicíně při výběru dárců krve. Závěr teoretické části je věnován stávajícím možnostem screeningových testů pro vyšetřování infekčních markerů u dárců krve, včetně přehledu postupů, které jsou používané v České republice, Evropské unii a dalších vybraných státech. V praktické části je popsána prováděná studie, tj. screeningové vyšetřování souboru dárců krve rutinní vyšetřovací metodou (CMIA) a molekulárně biologickými metodami (RT-Real Time PCR) na přítomnost markerů HCV, HBV a HIV. Jsou popsány principy obou metod a vlastní postup vyšetřování v rámci studie. Je uveden souhrn...
|
|
|
Možnost využití stanovení avidity protilátek proti HIV pro detekci časné infekce
Diničová, Michaela ; Janďourek, Ondřej (vedoucí práce) ; Jílek, Petr (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Studijní program: Zdravotnická bioanalytika Vedoucí bakalářské práce: PharmDr. Ondřej Janďourek, Ph.D. Název bakalářské práce: Možnost využití stanovení avidity protilátek proti HIV pro detekci časné infekce Určení časné infekce HIV je v ČR založené na kombinaci výsledků laboratorního vyšetření, klinického vyšetření a informací z epidemiologického hlášení. Identifikace pacienta v akutní fázi onemocnění umožňuje cílené vyhledávání kontaktů v zájmu snížení dalšího šíření HIV, protože pacienti v časné fázi onemocnění jsou nejrizikovější z hlediska přenosu infekce. Jedním z laboratorních markerů akutní fáze onemocnění je nízká avidita protilátek, která vyjadřuje pevnost vazby mezi antigenem a protilátkou. Stanovení avidity je založeno na skutečnosti, že u recentních infekcí je avidita nízká, protože se protilátky s antigenem nevážou dostatečně pevně a až s vyzráváním imunitní odpovědi avidita stoupá. Kvantitativně je vyjádřená indexem avidity, který určuje jaká část protilátek (%) zůstane navázaná v komplexu s antigenem po inkubaci s chaotropním činidlem, v našem případě s roztokem guanidinu. Výpovědní hodnota indexu avidity není absolutní, ale je užitečná jako doplněk ostatních parametrů, které se aktuálně...
|
|
| |
|
|
Terapeutické využití dendritických buněk
Svobodová, Hana
Dendritické buňky (DC) patří mezi nejúčinnější antigen prezentující buňky. Jsou schopné rozeznat přítomnost antigenu a zajistit přenos dané informace do lymfatických uzlin, kde jsou důsledkem těchto mechanismů stimulovány T lymfocyty. Nezralé DC po setkání s antigenem začnou dozrávat, putovat k lymfatickým uzlinám a dalším sekundárním lymfatickým orgánům a měnit se z antigen vázajících buněk na účinné antigen prezentující buňky. Jsou také klíčové pro regulaci imunitní odpovědi, která ovlivňuje proces diferenciace T lymfocytů směrem k Th1 nebo Th2 odpovědi. Kultivace DC in vitro umožňuje manipulovat s těmito buňkami a objevovat tak nové terapie pro kontrolu lidských chorob. Jejich specifické vlastnosti mají velký potenciál využití nejen v protinádorové terapii, ale i v léčbě infekčních, autoimunitních a alergických onemocnění. Zejména indukce CD8+ T buněk prostřednictvím aktivace imunitního systému může přispět k inhibici růstu nádoru a zvýšení přežití pacientů. Povzbudivé výsledky byly zaznamenány také použitím nezralých DC v transplantologii.
|
|
|
MHC And KIR Genotyping Of Macaques In HIV Infection Research
Matula, Jan
Modern research of viral diseases relies on genomic data processing. Not only is the sequence of a virus important, genomic sequence of specific receptors in affected organisms also plays an important role. In this paper, a novel package for processing of next generation sequencing data in infectious disease written using R/Bioconductor language is proposed. Functionality of the package, including implementation of advanced SSAHA algorithm for fast database searches, in demonstrated using genotyping of genes for MHC and KIR receptors of HIV positive macaques.
|
host ::
RSS.