|
| |
|
|
High-throughput screening for the discovery of small molecules modulating cell fate
Ribeiro Pombinho, António José ; Bartůněk, Petr (vedoucí práce) ; Bařinka, Cyril (oponent) ; Jiráček, Jiří (oponent)
Objevy sloučenin ovlivňujících buněčnou proliferaci, diferenciaci a smrt mohou vést nejen ke vzniku nových léčiv sloužících k léčbě či prevenci onemocnění, ale lze je také využít ke studiu molekulárních drah zapojených v těchto procesech. Pro testování tisíců těchto malých molekul v buněčných esejích je nezbytná přístrojová automatizace a miniaturizace. V této práci jsou popsány postupy testování s vysokou propustností (HTS). Jako hlavní předměty studia byly vybrány dráhy hypoxie a Wnt zapojené v růstu kmenových a nádorových buněk, diferenciace hematopoetických, neurálních a mesenchymálních kmenových buněk, a dráha TRAIL vedoucí k selektivní likvidaci nádorových buněk. Tímto postupem bylo možné testovat efekt malých molekul v eukaryotických buňkách a jednobuněčných organismech, jak je ilustrováno na příkladu hledání sloučenin účinkujících proti parazitickým prvokům rodu Leishmania. Několik sloučenin se ukázalo být aktivními modulátory osudu buňky. Jednalo se především o monensin, který inhibuje dráhu Wnt a zabraňuje růstu nádorů v myším modelu kolorektálního karcinomu, hemoharringtonin, který ve spolupráci s proteinem TRAIL indukuje smrt rakovinných buněk implantovaných do imunodeficientní myši, a diphenyleneiodonium chlorid, jenž zabíjí Leishmanie v buňkách. Žádná z těchto látek není v...
|
|
|
Mapping of regulatory elements within 5' region of the Disp3 locus
Oltová, Jana ; Bartůněk, Petr (vedoucí práce) ; Krásný, Libor (oponent)
Dispatched 3 (Disp3), gen regulovaný thyroidálním hormonem, je v naší laboratoři intenzivně studován. Podle fenotypu buněk s nadexprimovaným Disp3 a expresního profilu tohoto genu by Disp3 mohl být propojujícím článkem mezi thyroidálním hormonem a homeostázou cholesterolu v mozku. Domníváme se, že by také mohl hrát roli v patogenezi některých neurodegenerativních onemocnění a mozkových nádorů. Tato práce je zaměřena na proces regulace tohoto genu prostřednictvím receptoru pro thyroidální hormon (TR). Konkrétně si dává za cíl identifikovat responsivní elementy, které jsou důležité pro tuto regulaci. Navíc byly hledány také elementy rozpoznávané jaterním receptorem X (LXR), který nasedá na stejně uspořádané repetice jako TR a existuje mnoho genů, které jsou regulovány oběma těmito receptory. Zkombinovali jsme in silico analýzu Disp3 lokusu s luciferázovými reporterovými esejemi. Zaujal nás cluster šesti responsivních elementů predikovaných v blízkosti prvního exonu, z nichž dva se ukázaly být konzervované mezi myší a člověkem. Na základě toho byly připraveny reportéry různě zkrácených variant této 3 kb dlouhé oblasti, které umožnily tuto sekvenci analyzovat detailně. Reportérové eseje nepotvrdily přítomnost žádného klíčového responsivního elementu aktivovaného TR nebo LXR, ale na 3' konci byla objevena oblast...
|
|
|
Panels of steroid receptor reporter cell lines for compound profiling and development of selective ligands for estrogen receptor alpha and beta
Sedlák, David ; Bartůněk, Petr (vedoucí práce) ; Anzenbacher, Pavel (oponent) ; Kasal, Alexander (oponent)
Obr 1. Porovnání odpovědí U2OS-ERα/3xERE (●), U2OS-ERαwt -LBD/9xGal4UAS (○) a U2OS- ERαG420C -LBD/9xGal4UAS ( ) z reportérových buněčných linií vystavených vzrůstající koncentraci vybraných látek. Agonistická odpověď reportérových buněčných linií v závislosti na E2 (A), DES (B) a PPT (C) je vyjádřena jako podíl naměřené luciferázové aktivity vyvolané testovanou látkou a luciferázovou aktivitou naměřenou maximální stimulací receptoru pomocí E2. V antagonistickém modu byly buňky inkubovány s různými koncentracemi ICI 182.780 (D), raloxifene hydrochloridu (E) and tamoxifen citrátu (F). Panel reportérových linií využívajících plnodélkových steroidních receptorů je zvláště vhodný pro detailní studium mechanizmů jakými látky dosahují biologických projevů vazbou na steroidní receptory. Tento systém totiž poskytuje biologicky více významnou informaci o aktivitě testované látky tím, že odráží například aktivitu jiných transkripčních faktorů, signálních drah, přítomnost různých kofaktorů v buňce atd. Užitečnost těchto buněčných linií jsme prokázali "screeningem" chemické knihovny obsahující 3700 látek a identifikací nových agonistů a antagonistů pro PR, MR a GR. Obr 3. Účinek E2 na růst myší mléčné žlázy u mladých myších samic. Prepubertálním mladým myším bylo po dobu 10 dnů podáváno subkutánně pouze olejové...
|
|
|
Regulation of gene expression by thyroid hormone receptors
Oltová, Jana ; Fafílek, Bohumil (oponent) ; Bartůněk, Petr (vedoucí práce)
Hormony řídí v živých organismech nejrůznější procesy a jejich činnost je zajišťována buď membránovými, nebo jadernými receptory. Tyroidální hormony (THs) významně ovlivňují růst, vývoj a mnoho aspektů metabolismu, embryogeneze a raných fází života. Jejich receptory paří mezi jaderné, tzn. fungují jako ligandem aktivované transkripční faktory a podle kontextu mohou působit jako aktivátory nebo inhibitory transkripce. Receptory tyroidálního hormonu (TRs) jsou kódovány dvěma geny, TRα and TRβ, a pomocí alternativního sestřihu vzniká několik isoforem. Nejzastoupenější forma tyroidálního receptoru se váže na T3-responsivní elementy (TREs) jako heterodimer s retinoidním receptorem X (RXR). Tyroidální receptory jsou schopné vazby na TREs nezávisle na přítomnosti ligandu. TREs se skládají ze dvou nebo více následných sekvencí AGGTCA, které jsou obvykle uspořádány jako dvě přímé repetice oddělené čtyřmi nukleotidy (DR4). TH-responsivní cílové geny jsou součástí mnoha různých buněčných drah. Příkladem takového genu je Disp3, který by mohl v určitých buněčných typech propojovat thyroidální hormony a metabolismus cholesterolu.
|
|
| |
|
|
Komplexní péče o nemocného s akutní rupturou výdutě břišní aorty
Swárovská, Jana ; Bartůněk, Petr (vedoucí práce) ; Grus, Tomáš (oponent)
Autorka v diplomové práci uvádí přehled komplexní péče o pacienta s rupturou aneuryzmatu břišní aorty v 6 kazuistikách. Srovnáním jednotlivých případů uvádí dále ve shrnutí nejdůležitější aspekty péče, které mohou významně ovlivnit další prognózu pacienta. Podobně jako schéma dnešního vidění světa, je i péče o pacienta globalizovaná, komplexní, holistická. Nelze opomíjet žádný s faktorů osobnosti, onemocnění, kaskády záchranného systému. Na základě vlastních dlouholetých zkušeností sestry akutní ošetřovatelské péče v cévní chirurgii autorka upozorňuje na nejdůležitější momenty péče o pacienta s život-ohrožujícím onemocněním a naznačuje cestu ke standardizaci postupů, ovšem při zachování individualizovaného, empatického přístupu zdravotnického personálu. Během práce na projektu DP autorka kromě svých profesních zkušeností využívá nově i poznatků získaných studiem intenzivní péče, vědeckých metod poznávání skutečnosti a ověřování funkčnosti stávajích skórovacích base evidence systémů, vztahujících se k diagnóze
|
|
|
Komplexní péče u dítěte s invazivní meningokokovou infekcí
Šutoriková, Veronika ; Vobruba, Václav (vedoucí práce) ; Bartůněk, Petr (oponent)
Diplomová práce se zabývá problematikou invazivní meningokokové infekce v dětském věku. Teoretická část je zaměřena na popis meningokokového onemocnění, jeho výskyt, epidemiologii, klinický obraz, komplikace a následky, diagnostiku, terapeutické postupy a prevenci. Také je zde kladen důraz na včasné rozpoznání infekce a okamžitou léčbu septického šoku. Ošetřovatelská část obsahuje komplexní péči u sedmi měsíčního kojence. Jedná se o popisnou kazuistiku, která vystihuje dynamický průběh onemocnění, agresivní léčbu zahrnující antibiotika, kortikosteroidy, umělou plicní ventilaci, oběhovou podporu, hemodiafiltraci a celkovou terapii při syndromu diseminované intravasculátní koagulace. Pomocí této léčby dítě přežilo bez mutilujících následků. Kazuistika se zaměřuje na potřeby dítěte a matky v oblasti ošetřovatelské péče. Podrobně rozpracovává hlavní ošetřovatelské diagnózy, jejich cíle, plány a realizace.
|
|
|
Srovnání kvality hygienické péče o ruce personálu před a po zavedení edukace zaměstnanců na jednotkách intenzivní péče Fakultní nemocnice Olomouc
Svatošová, Petra ; Bartůněk, Petr (vedoucí práce) ; Schejbalová, Miriam (oponent)
Diplomová práce se zabývá problematikou prevence nozokomiálních nákaz na pracovištích intenzivní péče s ohledem na hygienickou péči rukou zdravotnického personálu. Cílem práce bylo zjistit, v jaké kvalitě je prováděná hygienická péče rukou a zda je možné edukací zdravotníků pozitivně ovlivnit jejich přístup k hygieně rukou. Teoretická část obsahuje historii vzniku a charakteristiku nozokomiálních nákaz, popisuje doporučené postupy hygieny rukou a jejich význam v prevenci nozokomiálních nákaz, jakož i výčet současně platných legislativních norem. Empirická část práce je zaměřena na porovnání změn v provádění a v přístupu k hygienické péči rukou před a po edukaci zdravotnického personálu na vybraných jednotkách intenzivní péče ve Fakultní nemocnici v Olomouci. Ke zkoumání byla použita metoda skrytého pozorování zdravotnického personálu a metoda dotazníkového šetření. Tyto metody byly v práci použity s cílem potvrdit či vyvrátit stanovené hypotézy. Výsledek závěrů z tohoto výzkumného šetření bude možno využít při procesu zlepšování hygienické péče o ruce mimo jiné v rámci standardizace a zlepšování kvality ošetřovatelské péče.
|
|
| |
host ::
RSS.