|
Tvorba biofilmu u probiotických bakterií a jejich zpracování do pevné lékové formy.
Grossová, Marie ; Rittich, Bohuslav (oponent) ; Buňka, František (oponent) ; Márová, Ivana (vedoucí práce)
Cílem práce je kultivace probiotických bakterií L. acidophilus, B. breve a B. longum tak, aby kultura vytvářela shluky buněk nebo souvislý biofilm na různých typech volných nosičů. Tvorba biofilmu L. acidophilus na oxidu křemičitém byla následně studována z hlediska vyšší odolnost vůči nízkému pH a koncentraci žlučových solí v zažívacím traktu. Zatímco počet živých buněk u planktonické formy při pH 1 klesl o 30 %, života schopnost biofilmových buněk se udržela za stejných podmínek na 90 %. V případě působení žluči byla také sledována protektivní ochrana biofilmu před škodlivým prostředím žlučových solí. Dále byly studovány možnosti sušení tekutých biofilmových kultur komerčně užívanými technologiemi ve farmaceutickém průmyslu. Srovnání lyofilizace a fluidního sušení ukázalo, že lyofilizace je v závislosti na výběru vhodného kryoprotektivního média vhodnější sušící technikou zachovávající nejvyšší počty životaschopných buněk a ve srovnání s fluidním sušením byla získána o přibližně 90 % vyšší životaschopnost probiotických buněk. Závěrem bylo studováno velkoobjemové zpracování probiotických kmenů do pevné lékové formy. Tablety je vhodné vyrábět při pevnosti 70 - 90 N, přičemž vodní aktivita tabletoviny může být udržována pod 0,3. Následně musí být zajištěno sušení tablet v hermeticky uzavřeném prostoru s minimálně 10 % silikagelu, pak tablety i po 6 měsíčním skladování obsahují (5,4 ± 0,7)109 životaschopných buněk. Technologie výroby kapslí nemá výrazný vliv na počty živých buněk během výroby. Pro následné primární balení byla vybrána triplexová blistrovací fólie, která má nízké hodnoty propustnosti vodní páry (0,07 g H2O / (m2 × den)) a kyslíku (0,01 cm3/m2 × den). Blistrovací folie běžně užívané ve farmaceutickém průmyslu nejsou pro skladování probiotik vhodné.
|
|
Principal component analysis of Raman spectroscopy data for determination of biofilm forming bacteria and yeasts
Šiler, Martin ; Samek, Ota ; Bernatová, Silvie ; Mlynariková, K. ; Ježek, Jan ; Šerý, Mojmír ; Krzyžánek, Vladislav ; Hrubanová, Kamila ; Holá, M. ; Růžička, F. ; Zemánek, Pavel
Many microorganisms (e.g., bacteria, yeast, and algae) are known to form a multi-layered structure composed of cells and extracellular matrix on various types of surfaces. Such a formation is known as the biofilm. Special attention is now paid to bacterial biofilms that are formed on the surface of medical implants, surgical fixations, and artificial tissue/vascular\nreplacements. Cells contained within such a biofilm are well protected against antibiotics and phagocytosis and, thus, effectively resist antimicrobial attack.\nA method for in vitro identification of individual bacterial cells as well as yeast colonies is presented. Figure 1 shows an an example of the biofilm formed by Staphylococcus epidermidis bacteria and Candida parapsilosis yeasts known for forming biofilms. The\npresented method is based on analysis of spectral “Raman fingerprints” obtained from the single cell or whole colony, see figure 2(top). Here, Raman spectra might be taken from the biofilm-forming cells without the influence of an extracellular matrix or directly form the bacterial/yeast colony.
|
|
Infekce močových cest vyvolané Staphylococcus saprophyticus
FORMÁNEK, Karel
V bakalářské práci se zabývám infekcemi močových cest vyvolané Staphylococcus saprophyticus. S. saprophyticus patří mezi koaguláza negativní stafylokoky. Je původce nekomplikovaných infekcí močových cest. V teoretické části jsem se zaměřil na rod Staphylococcus, který patří mezi odolné mikroby, přestože netvoří spory. Jeho taxonomie se za poslední čtyři dekády rozvinula, dnes je známo 54 druhů stafylokoků. S. saprophyticus patří mezi koaguláza negativní stafylokoky, je rezistentní k novobiocinu a je producentem enzymu ureázy. Lékem první volby u akutní cystitidy je nitrofurantoin. Praktickou část jsem prováděl v Laboratoři lékařské mikrobiologie, Pracovišti bakteriologie Nemocnice České Budějovice, a.s. pod odborným dohledem. Vzorky moče jsem zpracovával v automatickém systému HB&L UROQUATTRO. Nejčastěji používanou metodou pro identifikaci S. saprophyticus je hmotnostní spektrometrie MALDI-TOF. U každého kmene S. saprophyticus jsem zhotovil citlivost k antibiotikům. Statistickým zpracováním výsledků jsem došel k závěru, že záchyt S. saprophyticus jako původce infekce močových cest dle pohlaví za rok 2013 se vyskytoval z 94,7 % u žen a 5,3 % u mužů, za rok 2014 byly výsledky obdobné. Věková distribuce největšího záchytu u pacientek se pohybovala mezi 20-40 lety.
|
|
Zdravotní rizika spojená s rodem Listeria
KARBANOVÁ, Aneta
Bakalářská práce je zaměřena na zdravotní rizika spojená s rodem Listeria, konkrétně s druhy Listeria monocytogenes a Listeria ivanovii, vyvolávajícími listeriózu. U lidí se listerióza vyskytuje spíše sporadicky, nicméně může dojít i k epidemiím, listerióza se také může stát nemocniční nákazou. Listerióza je nebezpečná především pro těhotné ženy, u kterých může vyvolat potraty, a pro jedince s oslabeným imunitním systémem, u kterých může způsobit dokonce záněty mozku a mozkových blan. V současné době je pozorován zvyšující se výskyt rezistentních bakterií k antimikrobiálním přípravkům, mezi něž řadíme i bakterii Listeria monocytogenes, který představuje vážný problém. Proti listerióze není očkování, jedinou prevencí je důkladná tepelná úprava potravin a dodržování hygienických opatření, jež riziko nákazy minimalizuje.
|
|
Srovnání biocidní účinnosti dezinfekčních přípravků proti biofilmu
Šlitrová, Barbora ; Votava,, Miroslav (oponent) ; Omelková, Jiřina (vedoucí práce)
Pseudomonas aeruginosa je častým původcem nosokomiálních nákaz. Tento oportunní patogen je rezistentní vůči antibiotikům různých tříd i vůči biocidům. Některé jeho kmeny tvoří biofilm. Ve zdravotnictví představuje tvorba biofilmu značné riziko, které může vést až k závažnému onemocnění či úmrtí nemocného. Protože bakterie v biofilmu jsou odolnější než jejich planktonní formy, je důležité nalézt takové dezinfekční přípravky, které budou účinné i proti biofilmu. Byla otestována baktericidní účinnost čtyř dezinfekčních přípravků jak vůči biofilmu, tak na planktonních buňkách P. aeruginosa.
|
|
Comparison of freeze fracture images of mixed bacterial/yeast biofilm in cryo-SEM with high pressure freezing fixation
Hrubanová, Kamila ; Nebesářová, Jana ; Růžička, F. ; Krzyžánek, Vladislav
Microscopic organisms include bacteria and yeasts have been studied in this project. Besides the planktonic way of living, microbes are able to adhere to surfaces or interfaces and to form organized communities, a so-called biofilm, which are embedded in a matrix of extracellular polymeric substances that they produce; visualization and quantification of this microscopic formation is the main goal of this study. In medicine the biofilm formation allows microorganisms to colonize the surface of implants and it also protects the microbial cells from attacks by the immunity system as well as from the effect of antibiotics. Therefore, the biofilm is considered to be important virulence factor in these microorganisms. The characteristic features of the biofilm infections, especially high resistance to antifungal agents, complicate therapy. Understanding of the biofilm structure can contribute to understanding the biofilmformation and basic biochemical mechanisms underlying this process. It may help to develop more efficient treatment strategy for biofilm infection.
|
| |
| |
| |
| |