| |
|
Příprava oligoesterových nanočástic emulzní metodou
Šeuerová, Andrea ; Dittrich, Milan (vedoucí práce) ; Šnejdrová, Eva (oponent)
ABSTRAKT- CZ Práce byla zaměřena na studium účinnosti komplexního emulgátoru na přípravu nanočásticového systému metodou rozdělování rozpouštědla z emulze typu o/v. Jako nosič byla použita kyselina poly(DL-mléčná), jako modelové léčivo terbinafin. Komplexní emulgátor byl připraven mísením sojového nebo vaječného lecitinu s různými podíly neionických tenzidů. Jako neionické tenzidy byly testovány polysorbát 20 a tři různé poloxamery. Byla navržena optimální kompozice s přihlédnutím k minimálnímu rozměru a maximálnímu zeta potenciálu.
|
|
Studie fosforylace anorganické pyrofosfatázy Streptococcus pneumoniae
Štechová, Michaela ; Svobodová, Jaroslava (oponent) ; Doubravová, Linda (vedoucí práce)
Lidský patogen Streptococcus pneumoniae kóduje jednu jedinou Ser/Thr proteinkinázu eukaryotického typu nazvanou StkP. StkP reguluje virulenci, kompetenci, rezistenci ke stresům, genovou expresi a hraje roli v regulaci cyklu buněčného dělení. Analýza fosfoproteomových map divokého kmene S. pneumoniae a mutantního kmene stkP ukázala, že StkP fosforyluje několik pravděpodobných substrátů in vivo, včetně Mn-dependentní anorganické pyrofosfatázy PpaC. Prostřednictvím analyzy hmotnostní spektrometrií byla v aktivním místě proteinu identifikována dvě fosforylovaná místa. Pyrofosfatázy jsou esenciální enzymy, které katalyzují hydrolýzu anorganického pyrofosfátu produkovaného během různých biosyntetických reakcí využívajících ATP. Bylo prokázáno, že změny v pyrofosfatázové aktivitě mají velký efekt na buněčný metabolizmus, růst a dělení bakterií. Cílem této práce bylo studium fosforylace anorganické pyrofosfatázy PpaC v S. pneumoniae. Gen ppaC byl klonován, exprimován v E. coli a protein PpaC byl izolován afinitní chromatografií. Fosforylace PpaC prostřednictvím StkP byla testována kinázovou reakcí, ale nepotvrdili jsme, že PpaC je přímým substrátem StkP in vitro. Dále jsme připravili řadu mutantů v genu ppaC. Dvě pravděpodobné fosfoaminokyseliny identifikované hmotnostní spektrometrií jsme vyměnili za neutrální...
|
|
Sledování spotřeby antidepresiv v podmínkách lékárny v letech 2003-2005
Borská, Anna ; Vopršalová, Marie (vedoucí práce) ; Trejtnar, František (oponent)
6. SOUHRN 85 Náplní práce je studium spotřeby léků na úrovni lékárny. Cílem bylo kvantifikovat stav, respektive vývoj spotřeby antidepresiv vydaných v letech 2003 - 2005 v lékárně Pharmcentrum Budějovická v Praze 4. V teoretické části práce jsme krátce shrnuli nejnovější poznatky a doporučení pro léčbu depresí. Jsou zde také uvedeny klíčové vlastnosti účinných látek používaných při farmakoterapii depresivních onemocnění. V druhé části práce jsme použili data o roční spotřebě jednotlivých přípravků získaná z lékárenského programu a pomocí systému DDD/ATC jsme vypočítali celkovou spotřebu jednotlivých léčiv. Snažili jsme se také zjistit, zda existují rozdíly v preskripci lékařů různých odborností, případně i různého věku. V letech 2003 - 2005 spotřeba antidepresiv v lékárně Budějovická neustále stoupala. Odpovídá to i údajům zveřejněným VZP. Výrazně rostoucí skupinou jsou antidepresiva III. generace - SSRI. Z této skupiny je nejvíce preferovanou látkou Citalopram. Až na výjimky vykazuje spotřeba látek z novějších generací rovněž trvalý růst. Tyto trendy jsou v souladu s doporučeními odborných lékařských společností. Nezanedbatelnou část preskripce lékařů však stále tvoří skupina tricyklických antidepresiv I. generace. Ta však vzhledem k nežádoucím účinkům již nejsou lékem první volby. Podíl TCA na celkové...
|
| |
|
Studium mikroRNA u pacientů se spinocelulárními karcinomy hlavy a krku
Hudcová, Kristýna ; Šulc, Miroslav (oponent)
Hledání markerů nemocí je v popředí vědeckého zájmu. Biomarker specifické nemoci by měl sloužit jako pomocník při léčbě dané nemoci - ať už pro diagnostiku onemocnění nebo pro prognózu jejího průběhu. V naší studii jsme se zaměřili na využití mikroRNA - krátkých RNA, které svým nasedáním na mRNA regulují průběh exprese jednotlivých proteinů. MiRNA jsou předmětem studia díky jejich stabilitě a funkci v regulaci mnoha buněčných procesů. V neposlední řadě mají možné uplnatění jako biomarker u mnoha onemocnění. V našem případě to jsou spinocelulární nádory hlavy a krku (HNSCC). Jelikož je tento druh nádorového onemocnění široce rozšířen a klinicky významné markery zde chybí, je naším zájmem hledat nové druhy markerů, umožňujících včasnou diagnostiku nemoci a co nejpřesnější stanovení prognózy. Vybrali jsme 3 kandidátní miRNA (miR-29c-3p, miR-200b-5p, miR-375-3p), u kterých jsme metodou qRT-PCR provedli profilaci jejich expresí ve tkáních pacientů s HNSCC. Expresi miRNA ve 42 vzorcích nádorové tkáně jsme porovnali s expresí miRNA ve tkáních přiléhajících k nádoru. Tkáň obklopující nádor je zajímavá z hlediska svých vlastností, histologicky vypadá jako tkáň zdravá, ale při bližším zkoumání tomu tak není. Je ovlivněna tkání nádorovou a může přispívat k progresi nádoru. Podařilo se nám rozlišit tyto dvě...
|
|
Diferenciace kvasinkových populací Saccharomyces cerevisiae: studium vlivu kultivačních podmínek
Šimek, Jan ; Palková, Zdena (vedoucí práce) ; Dostál, Jiří (oponent)
Dlouhodobý výzkum chronologicky stárnoucích populací laboratorních kmenů kvasinky Saccharomyces cerevisiae odhalil, že kvasinky jsou schopny diferenciovat a vytvářet specializované buněčné typy. V současné době je nejpodrobněji popsána diferenciace tekutých kultur rostoucích v médiu bohatém na glukózu a kolonií rostoucích na pevném glycerolovém médiu, v nichž kvasinky vytvářejí dvě morfologicky odlišné skupiny buněk, jež přizpůsobují svůj metabolismus a fyziologii ve prospěch dlouhodobého přežití populace. V rámci diplomové práce byly z kolonií rostoucích na pevném glukózovém médiu a z tekutých kultur kultivovaných v glycerolovém médiu izolovány buněčné subpopulace lišící se v některých parametrech od subpopulací dříve popsaných. Nově izolované subpopulace byly porovnány s již známými buněčnými typy kolonií a tekutých kultur. Analyzována byla jejich stresová odolnost a vybrané metabolické procesy. Na základě předchozích výzkumů diferenciace kvasinkových populací byly vytipovány proteiny, jejichž exprese byla u jednotlivých populací buněk sledována pomocí fúze s fluorescenčním proteinem GFP. Výsledky ukázaly, že složení média a forma kultivace ovlivňují vývoj a metabolismus jednotlivých diferenciovaných buněčných subpopulací. Klíčová slova: Saccharomyces cerevisiae, BY4742, buněčná diferenciace,...
|
|
Studium cytotoxicity potenciálních antituberkulotik s využitím vybraných metod na jaterní a ledvinné buněčné liniii.
Katrnošková, Simona ; Ramos Mandíková, Jana (vedoucí práce) ; Bárta, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Mgr. Simona Katrnošková Vedoucí: PharmDr. Jana Ramos Mandíková, Ph.D. Název rigorózní práce: Studium cytotoxicity potenciálních antituberkulotik s využitím vybraných metod na jaterní a ledvinné buněčné linii Jaterní a ledvinná tkáň je během podávání farmakologické terapie často vystavena vysokým dávkám xenobiotik. V průběhu preklinického zkoušení můžeme pomocí testů in vitro předpovídat potenciální toxicitu léčiv, a tak předcházet výskytu možných závažných nežádoucích účinků v klinické praxi. Cílem této rigorózní práce bylo stanovení cytotoxicity 4 látek s potenciálním antituberkulotickým účinkem na vhodných buněčných modelech s využitím vybraných metod testování in vitro. Dalším úkolem bylo porovnat cytotoxické působení testovaných látek mezi sebou a s kyselinou 4-aminosalicylovou (PAS), která je již mnoho let známa svou antituberkulotickou aktivitou. Testované sloučeniny tvořily 3 deriváty na bázi salicylanilidových diethyl fosfátů a kyselina 4-(trifluormethyl)benzoová. K posouzení cytotoxického potenciálu jsme využili parametr inhibiční koncentrace IC50. V této experimentální práci jsme použili metody stanovující buněčnou metabolickou aktivitu, aminopeptidázovou aktivitu, uvolňování laktátdehydrogenázy...
|
|
Studium plazmatické vazebnosti radiofarmak značených 18F z hlediska mezidruhového srovnání18
Nováková, Dana ; Lázníček, Milan (vedoucí práce) ; Bárta, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Mgr. Dana Nováková Konzultant: Prof. PharmDr. Ing. Milan Lázníček, CSc. Název rigorózní práce: Studium plazmatické vazebnosti radiofarmak značených 18 F z hlediska mezidruhového srovnání Práce je zaměřena na plazmatickou vazebnost tří vybraných radiofarmak značených radionuklidem 18 F z pohledu mezidruhového srovnání. Experimenty byly prováděny s využitím bovinní, prasečí, lidské a potkaní plazmy. Vazebnost na plazmatické bílkoviny se stanovila u tří radiofarmak, konkrétně u 18 F-FDG, 18 F-fluorocholinu a 18 F-thymidinu. Byly použity dvě metody: rovnovážná dialýza a ultrafiltrace. Podstata těchto metod spočívá v oddělení volné a vázané složky. Pro separaci je využita semipermeabilní membrána pro rovnovážnou dialýzu a speciální filtry (AMICON a VIVASPIN) pro metodu ultrafiltrace. Volná frakce je významným parametrem dostupnosti léčiva pro distribuci do tkání a buněk, interakci s receptory, exkreci a metabolizmus. Všechny experimenty byly prováděny při fyziologické teplotě 37řC. Výsledky ukazují nízkou plazmatickou vazebnost těchto tří látek u všech zkoumaných druhů a nedochází tedy k významnému ovlivnění farmakokinetiky studovaného materiálu. Nejvyšší hodnota plazmatické vazebnosti byla...
|
|
Studium genové exprese ve tkáních matky a plodu exponovaných cigaretovému kouři
Fejglová, Kamila ; Zikánová, Blanka (oponent) ; Bruchová, Hana (vedoucí práce)
I přes všeobecné povědomí o škodlivosti kouření se mu překvapivě vystavují i ženy v průběhu těhotenství. Expozice cigaretovému kouři během těhotenství zvyšuje např. riziko předčasného porodu, potratu nebo syndromu náhlého úmrtí novorozence. Pro studium molekulárních mechanismů působení cigaretového kouře ve tkáních těhotných žen a jejich dětí jsme využili genomický přístup a stanovili genové expresní profily v leukocytech z periferní krve matek a z pupečníkové krve novorozenců, a také v placentě. Genové expresní profily v těchto tkáních byly detekovány pomocí Illumina HumRef8 v3 expresních čipů, které umožňují analyzovat expresi 23 811 kódujících, anotovaných transkriptů. Mikročipová data byla standardizována kvantilovou normalizací. Rozdílně exprimované geny byly detekovány proložením lineárního modelu s využitím funkce lmFit. Hodnoty statistické významnosti byly upraveny Benjamini-Hochbergovou metodou. Komparativní analýza expresních profilů matek kuřaček (N=23) a nekuřaček (N=62) odhalila řadu deregulovaných genů, čímž jsme prokázali nesporný negativní vliv cigaretového kouře na transkriptom studovaných tkání. Mezi up-regulované geny v periferní krvi kuřaček patřily např. IFI27, IFIT1L, IFI44L, RSAD2, HBD, OAS2, BCL2A1, SOS1, Hsp10 a HERC5. Naopak down-regulaci vykazovaly geny LILRA3, TNFSF13, TNF,...
|
host ::
