|
|
Poškození DNA spermií: metody detekce využívané v klinické praxi
Tušlová, Magdaléna ; Postlerová, Pavla (vedoucí práce) ; Koubek, Pavel (oponent)
Současná rutinní analýza spermatu, známá jako spermiogram, není schopna poskytnout úplný obraz o mužské plodnosti, jelikož standardně nezahrnuje hodnocení integrity DNA. Tento parametr úzce souvisí s potížemi během početí a se zvýšeným rizikem potratu. Tato práce se zabývá příčinami vzniku poškození DNA spermií, detekcí tohoto poškození pomocí různých metod a závěrem diskutuje o možnostech začlenění těchto testů do klinické praxe za účelem zlepšení hodnocení a léčby mužské plodnosti. Mezi mechanismy vzniku fragmentace DNA spermií patří narušení spermiogeneze, oxidativní stres a poruchy apoptózy, které mohou být ovlivněny genetickými, anatomickými i vnějšími faktory. Hlavní část práce byla věnována rešerši metod detekce fragmentace DNA spermií, zahrnující analýzu struktury chromatinu spermií (SCSA), test disperze chromatinu spermií (SCD), metodu TUNEL, test na základě rozpoznání jednořetězcových zlomů DNA (ISNT), kometovou analýzu a barvení chromatinu. Přestože jsou některé z těchto metod často používané, stále zůstávají výzvy v jejich standardizaci a plném začlenění do klinické praxe. Možnost jejich rutinního využití by však mohla přinést významné pokroky v diagnostice a léčbě mužské neplodnosti. Mezi testy s největším potenciálem pro rutinní začlenění patří SCSA, TUNEL či SCD, a to díky jejich...
|
|
|
Reorganization of in vitro reconstituted actin-based networks
Sabó, Ján ; Lánský, Zdeněk (vedoucí práce) ; Varga, Vladimír (oponent) ; Cifra, Michal (oponent)
Cytoskelet poskytuje živým organismům nástroje k pohybu. V molekulárním měřítku procházejí stejné složky cytoskeletu neustálou reorganizací, aby přispívaly k různým buněčným procesům, jako je například navigace neuronálních růstových kónů v procesu vývoje mozku nebo vytváření chirálních aktinových toků během buněčného dělení. Během vývoje mozku je navigace neuronálních růstových kónů umožňena vzájemými interakcemi mezi sítěmi aktinových vláken a mikrotubuly (v angličtině "cytoskeletal crosstalk"). V růstových kónech byla část těchto intra-cytoskeletálních interakcí spojena s významnou mikrotubulární polymerázou CKAP5 (homolog XMAP215, MSPS, Zyg9). Nicméně role CKAP5 v molekulárním mechanismu remodelace mikrotubulů i aktinových sítí zatím nebyla objasněna. K lepšímu pochopení molekulárího mechanismu jsme použili fluorescenční mikroskopii s úplným vnitřním odrazem (TIRF, z angl. "total internal reflection fluorescence") v kombinaci s in vitro rekonstituovanými mikrotubuly a sítěmi aktinových vláken, které jsme pozorovali v přítomnosti rekombinantních proteinů. V této práci ukazujeme, že CKAP5 vytváří svazky z aktinových vláken (jak náhodně, tak paralelně orientovaných), propojuje aktinová vlákna s mikrotubuly bez ohledu na jejich polaritu, a dále umožňuje umístění aktinových svazků podél "šablon" z...
|
|
|
Molekulární mechanismus regulace funkce kaspasy-2 pomocí proteinů 14-3-3
Kalábová, Dana ; Obšilová, Veronika (vedoucí práce) ; Pavlíček, Jiří (oponent) ; Žáková, Lenka (oponent)
Molekulární mechanismus regulace funkce kaspasy-2 pomocí proteinů 14-3-3 Abstrakt Kaspasa-2 je proteasa stojící apikálně v kaskádě dějů vedoucích k apoptose. Správně vedený proces apoptosy likviduje poškozené buňky, autoreaktivní lymfocyty či nadbytečné skupiny buněk v ontogenezi. Proces aktivace kaspasy-2 musí být přesně regulovaný. Jedním z popsaných způsobů regulace kaspasy-2 způsobující její inhibici je posttranslační modifikace fosforylace spojená s následnou vazbou regulačního skafoldového proteinu 14-3-3. Cílem disertační práce je vysvětlit molekulární mechanismus této regulace. Pro porozumění interakce mezi proteiny bylo nezbytné nejprve určit fosforylační místa v molekule kaspasy-2 rozpoznávaná proteinem 14-3-3 a poté popsat detailní strukturu vazebného komplexu. Struktura byla popsána řadou biochemických a biofyzikálních metod, jako je analytická centrifugace, nativní elektroforesa v TBE pufru, polarizačně fluorescenční esej, vodík/deuteriová výměna spojená s hmotnostní spektrometrií či krystalizace, a výsledky vedly k podnětným závěrům. Aktivace kaspasy-2 začíná její vazbou na adaptorové proteiny, štěpením a dimerizací katalytických podjednotek. Z výsledků vyplynulo, že protein 14-3-3 může svou vazbou inhibovat aktivaci kaspasy-2 skrze blokování sekvencí nezbytných pro dimerizaci a/nebo vazbu...
|
|
|
Nedostatek vody v Česku a implementace do výuky na gymnáziích
Kalinová, Petra ; Janský, Bohumír (vedoucí práce) ; Šobr, Miroslav (oponent)
Nedostatek vody patří mezi aktuální témata nejen v Česku. Vzhledem ke změně klimatu a faktu, že sucho zasáhlo území Česka v poslední době hned několikrát, je potřeba, aby se naše země dokázala připravit na opakující se suché epizody. Možnosti řešení sucha v Česku včetně příkladů konkrétních opatření, stejně jako další základní informace o suchu v Česku, předkládá tato bakalářská práce. Hlavní cílem této bakalářské práce je však vytvoření projektového dne na téma Nedostatek vody v Česku. Tvorba projektového dne je součástí projektu PERUN, který je zaměřen na změnu klimatu a sucho a jeho důsledky na území Česka. Projektový den byl formou pretestu-posttestu ověřen v praxi a byla tak potvrzena jeho účinnost a otestována kvalita materiálů. V naprosté většině případů se u žáků projevil pozitivní trend nárůstu správných odpovědí, a tím si přítomní žáci prohloubili své vědomosti týkající se této problematiky. Klíčová slova: nedostatek vody, Česko, sucho, střední školy, výuka
|
|
|
Studium vlivu vzájemné interakce vybraných antibakteriálních léčiv in vitro na aktivitu vůči enterokokům
Netíková, Nina ; Konečná, Klára (vedoucí práce) ; Janďourek, Ondřej (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Studijní obor: Farmacie Autor: Nina Netíková Školitel: RNDr. Klára Konečná, Ph.D. Název diplomové práce: Studium vlivu vzájemné interakce vybraných antibakteriálních léčiv in vitro na aktivitu vůči enterokokům Cíl práce: Cílem experimentální části této diplomové práce bylo zhodnotit vliv vzájemné interakce dvou vybraných, v praxi zavedených antibiotik v kombinaci na dva vybrané bakteriální kmeny bakterií rodu Enterococcus. Účinek kombinace byl hodnocen prostřednictvím parametru FIC indexu. Na základě výpočtu FIC indexu byla dále vzájemná interakce klasifikována jako synergní, aditivní, indiferentní či antagonistická. Metody: K hodnocení vzájemného působení antibakteriálních léčiv v kombinaci byla vybrána čtyři antibiotika, jež byla dána do dvojkombinace. Stěžejním antibiotikem byl daptomycin, který byl kombinován s tigecyklinem, linezolidem a vankomycinem. Účinek dvojkombinací byl sledován vůči klinickému izolátu Enterococcus faecium a vůči sbírkovému bakteriálnímu kmenu Enterococcus faecalis (ATCC 29212). Stanovení hodnot MIC bylo provedeno s využitím mikrodiluční bujónové techniky podle metodiky EUCAST. Pro zjišťování hodnot MIC byl volen způsob odečtu nárůstu bakterií pouhým okem a pomocí...
|
|
|
Myofunkční terapeutický koncept u pacientů s orofaciální problematikou
Harudová, Kateřina ; Zahrádka Köhlerová, Michaela (vedoucí práce) ; Kejhová, Eva (oponent)
BAKALÁŘSKÉ PRÁCE Autor práce: Kateřina Harudová Vedoucí práce: Mgr. Michaela Zahrádka Köhlerová Název práce: Myofunkční terapeutický koncept u pacientů s orofaciální problematikou Abstrakt práce: Tato bakalářská práce se zabývá problematikou myofunkčních poruch orofaciální oblasti a možnostmi terapie těchto obtíží. Jedná se o kazuistický typ práce, rozdělený na teoretickou a praktickou část. Teoretická část shrnuje aktuální poznatky o myofunkčních poruchách a terapeutických přístupech. V jednotlivých kapitolách je podrobněji popsána anatomie a ontogenetický vývoj orofaciální oblasti, fyziologické předpoklady pro vývoj řeči, etiologie, symptomatologie, diagnostika a možnosti prevence myofunkčních poruch. Teoretická část také obsahuje přehled vybraných terapeutických konceptů a nastínění problematiky spolupráce s pediatrickými pacienty. Praktická část je zpracována formou dvou kazuistik pediatrických pacientů a jejím cílem bylo demonstrovat využití myofunkčního terapeutického konceptu na těchto pacientech. Dílčím cílem práce byla tvorba edukační brožury, která usnadní rodičům a jejich dětem autoterapii v domácím prostředí. Po nastudování odborné literatury a aplikování konceptu se ukázalo, že prvky myofunkční terapie zlepšují svalový tonus, motoriku a koordinaci svalů rtů a jazyka. Dochází k posílení...
|
|
|
Fetální DNA cirkulující v mateřské plazmě a možnosti její genetické analýzy
Soukalová, Adéla ; Korabečná, Marie (vedoucí práce) ; Vodička, Radek (oponent)
Volně cirkulující DNA je krátká, fragmentovaná DNA, vyskytující se v plazmě a séru, do kterého je uvolňována různými mechanismy. Jako první byla prokázána v tělních tekutinách u onkologických pacientů a záhy se stala biomarkerem pro neinvazivní diagnostiku. Zanedlouho došlo k detekci přítomnosti fetální cfDNA v plazmě matky a stala se předmětem klinické využitelnosti. Neinvazivní prenatální diagnostika je screeningová metoda, která pomáhá určit pravděpodobnost výskytu vrozených vad již v rané fázi těhotenství, právě s využitím fetální cfDNA. Konečné výsledky určují invazivní metody, mezi něž řadíme například aminocentézu a odběr choriových klků. Invazivní metody prenatální diagnostiky s sebou nesou riziko ztráty plodu méně než 1 %. I přes takto malé riziko je neustálá snaha vědců směřována ke zdokonalení metod neinvazivních, pomocí kterých lze detekovat aneuploidie jako Downův, či Edwardsův syndrom. Dále lze u plodu detekovat pohlaví, monogenní choroby, či Rh faktor, přičemž se využívá metod polymerázové řetězové reakce (PCR), či sekvenování nové generace.
|
|
|
Teorie "ztráty šance" v oblasti zdravotnického práva
Petr, Ondřej ; Salač, Josef (vedoucí práce) ; Šolc, Martin (oponent)
Teorie "ztráty šance" v oblasti zdravotnického práva Abstrakt Tato diplomová práce se zabývá alternativním přístupem k vytvoření občanskoprávní odpovědnosti v medicínsko-právních vztazích. Z důvodů popsaných v práci není postavení stran medicínsko-právních sporů rovné a proto za tímto účelem byla vytvořena teorie "ztráty šance", aby vyrovnala postavení stran před soudem skrze nový přístup k prokazování příčinné souvislosti. Pointa teorie spočívá v převedení procesněprávních nedostatků výše zmíněných sporů do hmotněprávní sféry za pomocí vytvoření nového právem chráněného statku "šance". Diplomová práce je rozdělena do tří částí. V první části se práce zabývá problematikou medicínsko-právních vztahů a z nich vzniklých soudních sporů. Především, jsou zde vysvětleny základní principy na kterých teorie "ztráty šance" stojí a ukazuje na rozdíly mezi běžným přístupem při dokazování kauzálního nexu a teorií. Druhá část je věnována historickému a zahraničnímu vývoji teorie. Za pomocí klíčových rozhodnutí zahraniční judikatury je vyloženo pojetí teorie v těchto zahraničních jurisdikcích, které poté má vliv i na rozhodování českých soudů v případech s teorií spojených. Poslední část práce se na primárně zabývá hlavní otázkou diplomové práce zdali může teorie "ztráty šance" dle judikatury Nejvyššího a Ústavního soudu...
|
|
|
Syntéza a hodnocení potenciálních antimikrobiálních sloučenin na bázi steroidů
Požárová, Pavla ; Krátký, Martin (vedoucí práce) ; Matouš, Petr (oponent)
Závažný problém představující hrozbu pro lidstvo je antibiotická rezistence. Vývojem nových účinných látek můžeme bojovat proti tomuto trendu a zvrátit jeho vývoj. Jelikož steroidní struktury vykazují širokou škálu biologických aktivit, byla zvolena výchozí látka estron, která byla pomocí různých reakcí modifikována. Bylo tak připraveno celkově patnáct nových sloučenin, které byly testovány na antibakteriální, antifungální a antimykobakteriální aktivitu, doplňkově také na inhibici cholinesteráz. Modifikace estronu probíhala primárně dvěma různými způsoby za vzniku hydrazonů a esterů. Takto bylo připraveno dvanáct látek, u zbylých látek došlo ke změně výchozích látek či postupu. V případě čtyř sloučenin bylo potřeba předem syntetizovat i jeden z reaktantů. Výtěžky se pohybovaly v rozmezí od 62 % do 95 % u hydrazonů a od 8 % do 54 % u esterů. Antibakteriální aktivita byla testována proti čtyřem vybraným grampozitivním a gramnegativním kmenům. Antifungální aktivita byla testována proti čtyřem kvasinkám a vláknitým houbám. Antimykobakteriální aktivita byla testována proti pěti kmenům mykobakterií. Všechny tyto metody byly testovány pomocí mikrodiluční bujónové metody. Testované látky neprojevily žádnou aktivitu při antibakteriálním a antifungálním testování. Aktivita byla zaznamenána pouze při...
|
|
|
Hledání selektivních antagonistů konstitutivního androstanového receptoru
Ondraszková, Karolína ; Smutný, Tomáš (vedoucí práce) ; Pourová, Jana (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Karolína Ondraszková Školitel: PharmDr. Tomáš Smutný, Ph.D. Název diplomové práce: Hledání selektivních antagonistů konstitutivního androstanového receptoru Konstitutivní androstanový receptor (CAR) je významný, ligandem-řízený xenosenzor, který reguluje transkripci důležitých enzymů biotransformujících léčiva (např. CYP2B6). Pregnanový X receptor (PXR) spadá do stejné skupiny nukleárních receptorů jako CAR. Struktura a funkce obou receptorů vykazují mnohé společné rysy. PXR má ale větší a flexibilnější ligand-vázající doménu. V současné době není prakticky k dispozici selektivní, vysoce potentní a netoxický inhibitor CAR. Tato práce si klade za cíl určit afinitu dříve identifikovaných látek v naší skupině s antagonistickou aktivitou vůči CAR. Jde o replikační studii. Pro tyto účely jsme látky testovali pomocí gene reporter a two-hybrid assay. Ze všech testovaných látek jsme dosáhli nejlepšího výsledku s látkou 1A. Metodou gene reporter assay jsme zjistili, že substance 1A je schopna redukovat bazální expresi CAR, ale potlačuje také expresi CAR indukovanou pomocí modelového agonisty CITCO. Vysoká afinita látky k receptoru byla potvrzena pomocí two-hybrid assay. Látka navíc neovlivňuje...
|
host ::
RSS.