|
| |
|
|
HPLC stanovení neopterinu, tryptofanu, kynureninu a kreatininu v lidském séru
Prokopová, Veronika ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
V rigorózní práci byla vyvinuta nová HPLC metoda pro současné stanovení neopterinu, tryptofanu, kynureninu a kreatininu v krevním séru a následně byla metoda plně validována. Pro separaci byly použity dvě sériově zapojené monolitní kolony Chromolith Speed ROD RP-18e, 50 x 4,6 mm a Chromolith Performance RP-18e, 100 x 3,0 mm. Ke zlepšení separační účinnosti a odstranění rušivých proteinů séra byla před sériové zapojení kolon přidána předkolona Chromolith Guard RP-18e, 10 x 4,6 mm. Neopterin a tryptofan byly detekovány fluorescenčním detektorem. Pro detekci neopterinu byla použita excitační vlnová délka 353 nm a emisní 438 nm, tryptofan byl detekován při excitační vlnové délce 245 nm a emisní 404 nm. Detekce kreatininu a kynureninu byla prováděna pomocí diode array detektoru při vlnových délkách 235 nm pro kreatinin a 230 nm pro kynurenin. Mobilní fází byl 15 mmol/l fosfátový pufr o pH 4,51 s průtokem 1 ml/min v čase 0 - 3 minuty, poté byl průtok skokově zvýšen na 2,3 ml/min. Celková doba analýzy byla 9,5 minuty. Nástřik vzorku na kolonu byl 1 µl. Metoda byla vypracována a validována se standardy stanovovaných analytů a pomocí lidského krevního séra.
|
|
|
Využití nových typů stacionárních fází pro HPLC stanovení neopterinu a dalších metabolitů v moči
Prokopová, Veronika ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Nováková, Lucie (oponent)
Cílem této práce bylo porovnání separačních možností různých typů chromatografických kolon pro stanovení neopterinu, kynureninu, kreatininu a kyseliny močové ve vzorku moči s metodou, která je v současné době využívána v laboratoři Gerontologické a metabolické kliniky Fakultní nemocnice v Hradci Králové pro stanovení požadovaných analytů. Základní, již vyvinutou a validovanou metodou , byla metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi s kolonou Gemini 5 um C18 110Ǻ, 150 x 3 mm, Phenomenex (Torrance, USA). Jako mobilní fáze byl použit fosforečnanový pufr o koncentraci 15 mmol/l a pH 6,4 s průtokem 0,8 ml/ min. Pro kreatinin, kynurenin a kyselinu močovou byla použita detekce při vlnových délkách 235 nm pro kreatinin, 230 nm pro kynurenin a 290 nm pro kyselinu močovou. Neopterin byl detekován fluorescenčně za použití 353 nm excitační vlnové délky a 438 nm emisní vlnové délky. Všechny chromatografické systémy byly porovnány na základě testu vhodnosti systému (SST - System Suitability Test), byla zhodnocena jejich separační účinnost, rozlišení píků, asymetrie a ostatní parametry. Kolony s nevhodnějšími parametry byly vybrány pro další optimalizaci a validaci, jejímž výsledkem by měla být nová moderní HPLC metoda pro klinické využití.
|
|
|
Bydlení v modulovém prostoru
Prokopová, Veronika
Diplomová práce se věnuje vývoji modulární architektury a problematice minimálního bydlení. Poznatky jsou zúročeny v řešení návrhu interiéru růstových dispozičních variant modulového bydlení. Kromě designového, estetického a materiálového zpracování tohoto prostoru se zabývá také designem a konstrukcí atypického nábytkového prvku.
|
|
|
HPLC stanovení neopterinu, tryptofanu, kynureninu a kreatininu v lidském séru
Prokopová, Veronika ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
V rigorózní práci byla vyvinuta nová HPLC metoda pro současné stanovení neopterinu, tryptofanu, kynureninu a kreatininu v krevním séru a následně byla metoda plně validována. Pro separaci byly použity dvě sériově zapojené monolitní kolony Chromolith Speed ROD RP-18e, 50 x 4,6 mm a Chromolith Performance RP-18e, 100 x 3,0 mm. Ke zlepšení separační účinnosti a odstranění rušivých proteinů séra byla před sériové zapojení kolon přidána předkolona Chromolith Guard RP-18e, 10 x 4,6 mm. Neopterin a tryptofan byly detekovány fluorescenčním detektorem. Pro detekci neopterinu byla použita excitační vlnová délka 353 nm a emisní 438 nm, tryptofan byl detekován při excitační vlnové délce 245 nm a emisní 404 nm. Detekce kreatininu a kynureninu byla prováděna pomocí diode array detektoru při vlnových délkách 235 nm pro kreatinin a 230 nm pro kynurenin. Mobilní fází byl 15 mmol/l fosfátový pufr o pH 4,51 s průtokem 1 ml/min v čase 0 - 3 minuty, poté byl průtok skokově zvýšen na 2,3 ml/min. Celková doba analýzy byla 9,5 minuty. Nástřik vzorku na kolonu byl 1 µl. Metoda byla vypracována a validována se standardy stanovovaných analytů a pomocí lidského krevního séra.
|
|
| |
|
|
Hladina autoprotilátek proti pro-katepsinu D v různých souborech pacientů
Prokopová, Veronika ; Dršata, Jaroslav (vedoucí práce) ; Springer, Drahomíra (oponent)
VERONIKA PROKOPOVÁ HLADINA AUTOPROTILÁTEK PROTI PROKATHEPSINU D V RŮZNÝCH SOUBORECH PACIENTŮ ABSTRAKT Kathepsin D (E.C. 3.4.23.5, CD) je lysozomální aspartátová peptidasa syntetizovaná ve všech savčích buňkách a základní vlastností je schopnost katalyzovat hydrolytické štěpení peptidické vazby v peptidech nebo proteinech. V průběhu dlouholetého výzkumu bylo zjištěno, že v nádorových buňkách dochází ke zvýšené expresi CD, která je až 50krát vyšší než v normálních buňkách. Nádorovými buňkami je uvolňován pouze enzymaticky inaktivní zymogen prokathepsin D (pCD) s intaktním aktivačním peptidem (AP). Předpokládá se, že tento aktivační peptid je pravděpodobně zodpovědný za mitogenní aktivitu pCD v nádorových buňkách. U pacientů s nádorovým onemocněním často dochází k tvorbě protinádorové imunitní odpovědi proti nádorovým antigenům. Stanovení těchto autoprotilátek a analyzování rozpoznaných antigenů by mohlo být využito jako diagnostických či prognostických markerů. Cílem bylo ověření hypotézy, zda hladina autoprotilátek proti AP pCD může být použita pro diagnostické účely a to především jako nový tumorový marker. Proto bylo nutné vytvořit a optimalizovat imunoanalytickou metodu ELISA pro stanovení autoprotilátek proti AP pCD v séru vybraných skupin pacientů. Pro hladinu naměřených autoprotilátek byla provedena...
|
|
|
Využití nových typů stacionárních fází pro HPLC stanovení neopterinu a dalších metabolitů v moči
Prokopová, Veronika ; Nováková, Lucie (oponent) ; Solich, Petr (vedoucí práce)
Cílem této práce bylo porovnání separačních možností různých typů chromatografických kolon pro stanovení neopterinu, kynureninu, kreatininu a kyseliny močové ve vzorku moči s metodou, která je v současné době využívána v laboratoři Gerontologické a metabolické kliniky Fakultní nemocnice v Hradci Králové pro stanovení požadovaných analytů. Základní, již vyvinutou a validovanou metodou , byla metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi s kolonou Gemini 5 um C18 110Ǻ, 150 x 3 mm, Phenomenex (Torrance, USA). Jako mobilní fáze byl použit fosforečnanový pufr o koncentraci 15 mmol/l a pH 6,4 s průtokem 0,8 ml/ min. Pro kreatinin, kynurenin a kyselinu močovou byla použita detekce při vlnových délkách 235 nm pro kreatinin, 230 nm pro kynurenin a 290 nm pro kyselinu močovou. Neopterin byl detekován fluorescenčně za použití 353 nm excitační vlnové délky a 438 nm emisní vlnové délky. Všechny chromatografické systémy byly porovnány na základě testu vhodnosti systému (SST - System Suitability Test), byla zhodnocena jejich separační účinnost, rozlišení píků, asymetrie a ostatní parametry. Kolony s nevhodnějšími parametry byly vybrány pro další optimalizaci a validaci, jejímž výsledkem by měla být nová moderní HPLC metoda pro klinické využití.
|
|
|
Postavení Bavorska v hospodářství Německa a možnosti spolupráce s ČR
Prokopová, Veronika ; Zamykalová, Miroslava (vedoucí práce) ; Gullová, Soňa (oponent)
Diplomová práce se zabývá postavením Bavorska v hospodářství Německa a možnostmi spolupráce s Českou republikou. Hlavním cílem práce je pomocí analýzy nastínit postavení Bavorska v hospodářství SRN a charakterizovat jeho podnikatelské prostředí. Dalším cílem je za pomoci dotazníkového šetření zjistit,jaká jsou hlavní negativa spolupráce mezi Českou republikou a Bavorskem a navrhnout možnosti zlepšení. Práce si také klade za úkol navrhnout, v jakých oblastech by mohlo dojít k rozšíření spolupráce mezi Českou republikou a Bavorskem. Práce je rozdělena do tří kapitol, kde je čtenář postupně seznámen s Německem a Bavorskem, podnikatelským prostředím Bavorska a možnostmi spolupráce mezi ČR a Bavorskem.
|
|
| |
host ::
RSS.