|
|
Probiotics in food products for children
Vozárová, Petra ; Kvasničková, Eva (oponent) ; Španová, Alena (vedoucí práce)
Despite of the high level of science and medicine, people are trying to return to the nature and use it for their lives. For example, they are using probiotics, which are live cultures able to reside in the human intestine and there can start their role. The teoretical part of this bachelor thesis deals with probiotic bacteria, their properties and those properties which are important in the food industry and the main part focuses on the probiotics used in baby food. The experimental part of the thesis targets on an analysis of two probiotic supplements for children (BioLac Baby and Probacílium+). There was a DNA isolated from these two products by method of phenol extraction and using magnetic media. The whole DNA isolated from these products was amplificated by genus-specific PCR.
|
|
|
Molekulární charakterizace vybraných kmenů klostridií izolovaných ze sýrů
Chroboková, Maria ; Kvasničková, Eva (oponent) ; Rittich, Bohuslav (vedoucí práce)
Práce byla zaměřena na molekulární charakterizaci 42 bakteriálních kmenů rodu Clostridium. DNA byla izolována fenol-chloroformovou extrakcí a vysrážena ethanolem. Poté byla provedena rodová a druhová identifikace studovaných kmenů. Ze 42 testovaných kmenů bylo 19 z nich zařazeno do druhu Clostridium tyrobutyricum a 3 byly zařazeny do druhu Clostridium butyricum. DNA všech kmenů byla testována metodou PCR se specifickými primery HGf a HGr na přítomnost genu pro hydrogenázu hydA. U 21 vzorků byla prokázána přítomnost genů kódujících uvedenou hydrogenázu. Pro vytvoření fingerprintových profilů studovaných kmenů byly použity primery (GTG)5 (rep-PCR) a Pr1 a Pr6 (RAPD). Dále byla za různých podmínek studována kultivace kmene Clostridium tyrobutyricum S5. Kultivace byla prováděna za anaerobních podmínek v tekutém živném médiu RCM, ve kterém byla glukóza nahrazena laktózou nebo syrovátkou. Růst bakteriálních buněk byl sledován při laboratorní teplotě (20-23 °C) a při 37 °C; pH média se pohybovalo v rozmezí 4,0 až 8,0 s rozdílem 0,5 jednotky.
|
|
|
Produkce vodíku s využitím bakterií rodu Clostridium
Filová, Dagmar ; Kvasničková, Eva (oponent) ; Rittich, Bohuslav (vedoucí práce)
Bakalárska práca sa zaoberá produkciou vodíka baktériami rodu Clostridium – konkrétne C. butyricum a C. tyrobutyricum. V teoretickej časti sú rozobrané spôsoby výroby vodíka, rozdelené na biologické a nebiologické metódy. Práca sa ďalej zameriava na praktické využitie vyššie uvedených mikroorganizmov na účely výroby vodíku. Ako jedno z možných rastových médií pre vyššie uvedené baktérie predstavuje srvátku z mliekarenských výrob. V experimentálnej časti práce bola použitá polymerázová reťazová reakcia na identifikáciu baktérií rodu Clostridium, druhov Clostridium butyricum a Clostridium tyrobutyricum. PCR produkty boli z dôvodu overenia špecifity reamplifikované s použitím rovnakých primerov. Ďalej bola pomocou PCR dokázaná prítomnosť génu na produkciu enzýmu hydrogenázy A.
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
|
Purifikace a charakterizace membránově vázané reduktasy z lidské jaterní tkáně
Pelcová, Vendula ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Kvasničková, Eva (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Mgr. Vendula Pelcová Školitel: Prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. Název rigorózní práce: Purifikace a charakterizace membránově vázané reduktasy z lidské jaterní tkáně. Tato práce byla zaměřena na zavedení experimentálních technik pro purifikaci lidské jaterní mikrosomální frakce. Byly zvoleny tři základní kroky purifikačního schématu. Jako první krok byla zařazena iontově výměnná chromatografie na silném anexu následována dvěma separacemi na koloně pro gelovou filtraci. Před purifikací bylo nutno mikrosomální frakci solubilizovat, aby se uvolnily proteiny z vazby na membránu a podmínky optimalizovat. Jednotlivé najímané frakce byly následně inkubovány se specifickým substrátem reduktas oracinem a množství vzniklého metabolitu 11-dihydrooracinu bylo stanoveno pomocí achirální HPLC analýzy. U nejaktivnějších frakcí byla provedena SDS- PAGE a určena velikost hledaného enzymu. Použitím protilátky na 11beta-HSD1 byla vyloučena přítomnost této reduktasy v analyzovaných frakcích. S využitím popsaných purifikačních technik se podařilo zakoncentrovat frakci s dosud nepopsanou lidskou jaterní reduktasou.
|
|
|
Ovlivnění aktivity biotransformačních enzymů způsobem skladování biologického materiálu
Jelínková, Jana ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Kvasničková, Eva (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Titul, jméno, příjmení kandidáta: Jana Jelínková Titul, jméno příjmení školitele: Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Název diplomové práce: Ovlivnění aktivity biotransformačních enzymů způsobem skladování biologického materiálu Práce studovala vliv způsobu skladování jater a subcelulárních frakcí na aktivitu biotransformačních enzymů. Sledovány byly aktivity oxidačních enzymů - cytochromů P450 (CYP1A, 2B, 2C, 3A) a flavinových monooxygenas (FMO), redukčních enzymů (AKR 1A1, AKR 1C, 11β-HSD 1, CBR) a konjugačních enzymů (UGT, GST). Byly použity mikrosomální a cytosolické subcelulární frakce připravené z různě skladovaných jater ovce domácí (Ovis aries). (A) z čerstvé tkáně zmrazené v tekutém dusíku. (B) z jater, které byly uloženy při -80C, teplota se postupně zvyšovala na 0 C a postupně snižovala zpět na -80C. Polovina připravených mikrosomálních a cytosolických subcelulárních frakcí z jater uchovávaných v tekutém dusíku (A) byla podrobena stejnému skladovacímu procesu jako játra (B). Druhá polovina byla skladována při -80C. Aktivity, výše uvedených biotransformačních enzymů, byly stanoveny vůči jejich relativně specifickým substrátům. Dále byly subcelulární frakce inkubovány s xenobiotiky (oracinem,...
|
|
|
Změny proteinové exprese vyvolané kyselinou valproovou u lidské T-lymfocytární linie MOLT-4
Tichá, Zuzana ; Kvasničková, Eva (vedoucí práce) ; Řezáčová, Martina (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta Katedra biochemických věd ZMĚNY PROTEINOVÉ EXPRESE PO OVLIVNĚNÍ KYSELINOU VALPROOVOU U LIDSKÉ T-LYMFOCYTÁRNÍ BUNĚČNÉ LINIE MOLT-4. Kyselina valproová (VA) je inhibitor histon deacetylasy (HDACI) a při kultivaci leukemických buněk vede k zástavě jejich růstu a indukci apoptózy. Cílem práce bylo stanovit změny exprese proteinů po ovlivnění nádorových buněk VA. Lyzáty ilzolovaných jader po 4 hodinové inkubaci buněk s 2 a 4 mmol/l VA byly použity pro detekci změn hladiny proteinů. Proteiny buněčných lyzátů byly v první dimenzi separovány izoelektrickou fokusací na imobilizovaném pH gradientu. Po proběhnutí fokusace byly proteiny separovány elektroforeticky na 9-16% gradientovém DS gelu. Po proběhnuté elektroforéze byly proteiny detekovány barvením stříbrem a proteinová mapa digitalizována pomocí laserového denzitometru. Vyhodnocení proteinových map bylo provedeno pomocí programu Melanie 3. Identifikace proteinů byla provedena na MALDI hmotnostním spektrometru. Vyhledávání proteinů v databázích bylo provedeno podle programů ProFound a PeptIdent. Identifikace proteinů, které se po ovlivnění VA statisticky signifikantně měnily pomůže pochopit molekulární cesty, pomocí kterých ovlivňuje VA leukemické buňky. V našich experimentech sledující změny jednotlivých proteinů po...
|
host ::
RSS.