|
|
HPLC stanovení diastereoisomerů silybinu v plazmě laboratorních zvířat
Kolářová, Petra ; Tesařová, Eva (vedoucí práce) ; Bednář, Petr (oponent)
Silybin je hlavní složkou silymarinu, což je standardizovaný extrakt získaný z plodů ostropestřce mariánského (Silybum marianum). Flavonolignan silybin má antioxidační, hepatoprotektivní, chemoprotektivní a protinádorovou aktivitu. Přírodní silybin se vyskytuje jako téměř ekvimolární směs dvou diastereoisomerů - silybinu A a silybinu B, jejichž analytické oddělení je možné, avšak preparativní separace je komplikovaná. Biologická aktivita silybinu A je odlišná od silybinu B. Bylo prokázáno, že diastereoisomery silybinu se v organismu konjugují převážně na glukuronidy a sulfáty. Ve většině dosavadních biologických, farmakokinetických a chemických studiích byla použita směs obou diastereoisomerů silybinu. V této diplomové práci byl pro farmakokinetickou studii poprvé separátně využit opticky čistý silybin A a silybin B. Předmětem práce bylo zjištění koncentrace volného a celkového silybinu v plazmě potkanů v závislosti na čase od podání dávky silybinu A nebo B. Teoretický úvod popisuje současný stav problematiky chemie, farmakologie a farmakokinetiky diastereoisomerů silybinu. Druhá část je zaměřena na výběr vhodné analytické kolony, vypracování chromatografické metody a vhodného postupu úpravy biologických vzorků pro stanovení diastereoisomerů silybinu. Poslední část se zabývá stanovením volného a...
|
|
|
Optimalizace a validace analytické metody na stanovení výbraných léčiv
Geryk, Radim ; Tesařová, Eva (vedoucí práce) ; Janečková, Lucie (oponent)
Cílem této práce bylo nalezení vhodných podmínek k rozdělení enantiomerů citalopramu a citadiolu, optimalizace chromatografického systému a validace analytické metody ke stanovení daných enantiomerů v léčivech. V dnešní době se velké množství léčiv vyskytuje ve formě racemátů. V mnoha případech pouze jeden z enantiomerů vykazuje farmakologické účinky. Pokrok v chemických technologiích spojených se syntézou, separací a analýzou čistých enantiomerů z racemátů, způsobil zvýšení počtu nových chirálních léčiv ve formě čistých enantiomerů, tzv. chiral switch. Citalopram je široce užívané antidepresivum, patřící do skupiny selektivních inhibitorů zpětného vychytávání serotoninu (SSRI). Požívá se pro léčbu depresí, panické úzkosti či obsedantně kompulzivních poruch patologického smíchu a pláče. Farmakologická aktivita je spojena s S-citalopramem, zatímco R-citalopram je považován za neaktivní, a dokonce působí proti účinku escitalopramu. Citadiol je syntetický prekursor citalopramu, který se rovněž vyskytuje ve formě dvou enantiomerů. Tato práce byla zaměřena na sledování enantioseparačního chování vybraných léčiv. Pro chirální separace výše uvedených látek byla použita metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie s chirálními stacionárními fázemi na bázi makrocyklických antibiotik, cyklofruktanů a...
|
|
|
Porovnání metod detekce a stanovení enantiomerů theaninu v HPLC
Šlechtová, Tereza ; Tesařová, Eva (vedoucí práce) ; Bosáková, Zuzana (oponent)
V této práci byly optimalizovány metody separace nederivatizovaných enantiomerů theaninu na dvou chirálních kolonách na bázi teikoplaninu a metody separace derivatizovaných enantiomerů pomocí 9-fluorenylmethyloxykarbonyl chloridu a dansylchloridu. U všech metod byly za optimalizovaných podmínek zjištěny limity detekce a stanovitelnosti. Za optimalizovaných podmínek byl také zjišťován obsah enantiomerů theaninu ve vybraném zeleném čaji a potravinovém doplňku na bázi L-theaninu.
|
|
|
Optimalizace stanovení endokrinních disruptorů v čistírenských kalech a aplikace metody v reálných vzorcích.
Medková, Jaroslava ; Cajthaml, Tomáš (vedoucí práce) ; Tesařová, Eva (oponent)
Hormonálně aktivní látky v odpadních vodách jsou vážným problémem v posledních letech. Současný čistící proces v čistírnách odpadních vod není schopen účinně odstraňovat tyto látky. Předpokládá se, že tyto látky se ve velké míře sorbují na pevné částice kalu a sedimentu. Tato práce se zabývá stanovením 7 endokrinních disruptorů v kalech z čistíren odpadních vod. Byla vypracována vhodná metodika umožňující citlivou detekci 7 vybraných endokrinních disruptorů (4-nonylfenol, bisfenol A, estron, 17β-estradiol, estriol, 17α- ethynylestradiol, irgasan) v čistírenském kalu. Metodika využívá vysokotlakou extrakci rozpouštědlem (ASE), gelovou permeační chromatografii (GPC) a extrakci na pevnou fázi (SPE) k přečištění extraktu. Jakožto koncová analytická metoda byla použita plynová chromatografie ve spojení s hmotnostní detekcí GC/MS. Účinnost této metody byla ověřena na uměle kontaminovaném kalu a následně použita na reálné vzorky z několika čistíren odpadních vod v rámci České republiky. Také byl prováděn pokus vlivu stáří kalu na stanovitelnost jednotlivých cílových analytů. Naměřené koncentrace endokrinních disruptorů dosahovaly až hodnot kolem 1 µg/g. Tyto hodnoty jsou srovnatelné nebo vyšší v porovnání se zahraniční literaturou. Tyto výsledky nabádají k dalším výzkumům v oblasti endokrinně aktivních...
|
|
|
Analýza nebezpečnosti nanočástic v pracovním ovzduší a návrh opatření pro ochranu před jejich nežádoucími účinky
Skřehotová, Marcela ; Tesařová, Eva (vedoucí práce) ; Mráz, Jaroslav (oponent)
Diplomová práce se zaměřuje na oblast takzvaných nových rizik, mezi něž se v současnosti řadí také rizika spojená s výrobou, zaváděním do praxe a používáním nejrůznějších nanomateriálů. Práce se proto zaměřuje na studium tohoto fenoménu, přičemž shrnuje nejnovější poznatky o vlastnostech používaných nanočástic a navrhuje postup pro odhad možných následků při jejich expozici. Experimentální část práce je reprezentována případovou studií, která představuje praktickou aplikaci navrženého postupu zaměřeného na odhad expozice nanočásticím na pracovišti kovoobrábění a z ní plynoucích pracovních rizik. Součástí této studie bylo měření vybraných parametrů aerosolů pomocí speciálního měřícího systému pracujícího na principu laserové fotometrie kombinované s difúzní elektrickou nabíječkou a detektorem využívajícím Faradayovy klece. Předmětem uvedeného měření bylo stanovení početní koncentrace nanočástic přítomných v pracovním ovzduší a zastoupení jednotlivých velikostních skupin submikronových částic. Postup měření byl navržen v souladu s ČSN EN 689, ČSN EN ISO 16000-1 a ČSN ISO 8756 a získaná data byla následně interpretována. Provedená studie si kladla za cíl také ověřit metodiku pro odhad rizik spojených s expozicí nanomateriálům v pracovním ovzduší. Výsledky byly poté využity pro návrh opatření...
|
|
|
Optimalizace separace derivátů penicilinu metodou HPLC
Šímová, Veronika ; Kalíková, Květa (vedoucí práce) ; Tesařová, Eva (oponent)
Peniciliny patří mezi β-laktamová antibiotika, která jsou velice rozšířená v humánním i veterinárním lékařství. Cílem této bakalářské práce bylo vyvinout a optimalizovat HPLC metodu pro separaci čtyř derivátů penicilinu - amoxicilinu, 4-hydroxyfenoxymethylpenicilinu, benzylpenicilinu a fenoxymethylpenicilinu. Byl vybrán reverzní mod HPLC s oktadecylovou stacionární fází. Za podmínek izokratické eluce se nepodařilo rozseparovat všechny analyty až na základní linii. Z tohoto důvodu byla použita gradientová eluce, při které se podařilo rozseparovat všechny analyty na základní linii do 22 minut. Během experimentu byla také studována stabilita methanolických roztoků penicilinů v průběhu několika dní pomocí HPLC. Klíčová slova: HPLC, antibiotika, deriváty penicilinu, reverzní mod, stabilita
|
|
|
Optimalizace separace a kvantifikace předpokládaných produktů velkého třesku
Smitka, Jaroslav ; Tesařová, Eva (vedoucí práce) ; Kalíková, Květa (oponent)
Bakalářská práce je příspěvkem k výzkumu zaměřenému na modelování podmínek velkého třesku a sledování případných reakčních produktů. Jako výchozí sloučeniny byly vybrány 2-amino-1-butanol, 3-methoxy-1-propanol, 2-methyl-1-butanol a formamid, z nichž některé byly následně ostřelovány PALSem na Fyzikálním ústavu Jaroslava Heyrovského AV ČR. Pro analýzu byly testovány metody plynové chromatografie s hmotnostní detekcí a kapalinová chromatografie s UV detekcí. V systému GC-MS byly proměřeny kalibrační závislosti 3-methoxy-1-propanolu a 2-methyl-1-butanolu a vypočteny hodnoty LOD resp. LOQ. Srovnání analýzy neostřelovaného a ostřelovaného 3-methoxy-1-propanolu neukázalo vznik nových reakčních produktů, neboť výchozí 3-methoxy-1-propanol byl v přílišném nadbytku. Zjištěné sloučeniny lze spíše identifikovat jako nečistoty přítomné v rozpouštědle či ve vlastním standardu. V optimalizovaném systému HPLC se podařilo vzájemně rozdělit tři standardy. Formamid, který je nevhodný k analýze plynovou chromatografií, vzhledem k jeho vysoké polaritě, však eluoval ve všech testovaných separačních systémech HPLC v oblasti systémových píků (s mrtvým časem). Přesto byl pro srovnání analyzován vzorek ostřelovaný PALSem i původní standard. Srovnání však neukázalo žádné produkty reakce v ostřelovaném vzorku. Klíčová slova:...
|
|
|
Sledování stability triazinových herbicidů ve vodách
Petrlíková, Kateřina ; Tesařová, Eva (vedoucí práce) ; Janečková, Lucie (oponent)
Pro účely sledování stability s-triazinů ve vzorcích vody bylo nejdříve potřeba najít vhodnou analytickou metodu. V systému HPLC byly testovány dvě kolony - stacionární fáze C18 - konkrétně od firem Waters a Astec. Složení mobilní fáze ACN/H2O bylo měněno v rozmezí od 90/10 do 60/40 (v/v). V optimalizovaném separačním systému tvořeném kolonou Astec C18 a mobilní fází ACN/H2O v poměru 70/30 (v/v) bylo dosaženo rozdělení prometonu, propazinu a prometrynu až na základní linii. Tento separační systém byl následně použit pro sledování stability. Po dobu šesti týdnů byla sledována stabilita s-triazinů. Byly proměřovány vzorky atrazinu, prometonu, propazinu a prometrynu, ve čtyřech různých vzorcích vod - voda z Vltavy, okyselená voda z Vltavy, voda z vodovodu a okyselená voda z vodovodu. Atrazin byl proměřován samostatně a ostatní tři triazinové deriváty ve směsi. Všechny vzorky byly detekovány při vlnové délce 221nm. Po dobu šestitýdenního měření nebylo dosaženo výraznějších změn koncentrace s-triazinů ve vzorcích. Lze předpokládat, že s-triaziny jsou za daných podmínek stabilní.
|
|
|
Stanovení vybraných pesticidů a jejich metabolitů technikou LC/MS
Kořínková, Petra ; Tesařová, Eva (vedoucí práce) ; Trešl, Ivan (oponent)
Pesticidy jsou sloučeniny určené k hubení, prevenci a kontrole škůdců a ochraně rostlin. Jejich široké použití v zemědělství způsobuje kontaminaci podzemních, povrchových i pitných vod, protože je čistírny odpadních vod nedokážou odstranit. Mezi jedny z nejvíce používaných pesticidů patří triazinové pesticidy. Jejich používání je ale celosvětově omezováno, z důvodu negativního vlivu na lidské zdraví i kontaminaci životního prostředí a to zvláště jejich metabolity, o jejichž toxicitě nejsou zatím žádné informace. V této diplomové práci byla vyvinuta a validována metoda pro stanovení triazinových pesticidů atrazinu, cyanazinu, propazinu, simazinu a terbutylazinu a jejich metabolitů hydroxyatrazinu, desethylatrazinu, desisopropylatrazinu, hydroxyterbutylazinu a desethylterbutylazinu ve vodách pomocí LC-MS/MS s ionizačním zdrojem elektrosprejem. LOD byl v rozsahu 0,5-3,2 pg/ml, LOQ v rozsahu 1,5-9,6 pg/ml. V této práci byl proveden test stability mateřských látek těchto pesticidů, kde se ukázala mít největší vliv na jejich degradaci teplota. Provedený monitoring výskytu triazinových pesticidů a jejich metabolitů ve vodách v ČR odhalil nízké koncentrace mateřských látek v povrchových i podzemích vodách i přes jejich zákaz používání v letech 2004-2008. Byly také nalezeny vysoké koncentrace...
|
|
|
Analýza biologicky aktivních látek s využitím kapilárních elektromigračních metod
Jáč, Pavel ; Polášek, Miroslav (vedoucí práce) ; Tesařová, Eva (oponent) ; Jokl, Vladimír (oponent)
Shrnutí Předkládaná dizertační práce se zabývá využitím kapilárních elektromigračních metod pro analýzu biologicky aktivních sloučenin. Teoretická část této dizertační práce se stručně zabývá historickým vývojem, instrumentálním zázemím a separačními mechanismy různých typů elektromigračních metod. Kromě těchto témat byl podán stručný přehled o možnostech chirálních separací pomocí CE a tvorbě komplexů za účelem ovlivnění selektivity. Poslední dvě kapitoly teoretické části stručně pojednávají o optimalizaci a validaci elektromigračních metod. Výsledková část je tvořena komentářem k publikovaným pracím, které jsou v plném znění uvedeny v přílohách. Tematicky lze výsledky prezentované v této dizertační práci rozdělit do dvou hlavních celků. Prvním okruhem je využití elektromigračních metod v analýze polyfenolů v rostlinném materiálu a druhým tematickým celkem je vývoj, optimalizace a validace elektromigračních metod pro kontrolu jakosti léčivých přípravků a/ nebo potravinových doplňků. V rámci prvního okruhu byla vypracována rešeršní práce shrnující trendy v analýze polyfenolů pomocí CE za období 1999-2005. Další publikací zabývající se analýzou polyfenolů je již původní práce zaměřená na využití komplexačního činidla - wolframanu sodného - jako aditiva v BGE pro analýzu polyfenolů v rostlinném materiálu....
|
host ::
RSS.