|
|
Testování potenciálního využití chirálních iontových kapalin s dlouhým řetězcem pro chirální separace v kapilární elektroforéze II
Müllerová, Kateřina ; Jáč, Pavel (vedoucí práce) ; Lochman, Lukáš (oponent)
Katedra: Katedra analytické chemie Kandidát: Kateřina Műllerová Školitel: PharmDr. Pavel Jáč, Ph.D Název diplomové práce: Testování potenciálního využití chirálních iontových kapalin s dlouhým řetězcem pro chirální separace v kapilární elektroforéze II Chirální iontová kapalina (−)-N-dodecyl-N-methylephedrinium bromid (DMEB) byla testována jako selektor pro chirální separace vybraných léčiv (chinolonová antibiotika, ketoprofen a flurbiprofen) pomocí kapilární elektroforézy (CE). Byl zkoumán vliv několika parametrů na enantioseparaci: (i) typ a pH pufru, (ii) typ a množství organického modifikátoru a (iii) koncentrace DMEB. Při použití tohoto chirálního selektoru byla pozorována enantioseparace pouze u ofloxacinu, u zbylých chirálních léčiv separace za daných podmínek neproběhla. Jako další krok byla vyvinuta CE metoda pro stanovení levofloxacinu, aby bylo možné předvést potenciál DMEB jako chirálního selektoru v kontrole kvality chirálně čistých léčiv. Nejlepší separace bylo dosaženo se základním elektrolytem o složení: 20mM trizmový pufr o pH 8,5 se 100 mM DMEB a 20 % (v/v) acetonitrilu. Separace probíhala v křemenné kapiláře (80,5 cm / 72 cm) s vnitřním průměrem 50 µm při −30 kV s UV detekcí při 291 nm. Rozlišení mezi píky S- a R-ofloxacinu bylo 4,22 ± 0,02 (n = 3). Linearita metody byla...
|
|
| |
|
|
Analýza protichřipkových léčiv s využitím elektroforetických metod
Kubíková, Drahomíra ; Pospíšilová, Marie (vedoucí práce) ; Jáč, Pavel (oponent)
V této práci je zachycen vývoj metody pro separaci a stanovení paracetamolu (PA), kofeinu (CO), kyseliny askorbové (AA) a fenylefrinu (FE) v léčivém přípravku pomocí micelární elektrokinetické kapilární chromatografie (MEKC). Separace probíhala v nepotažené křemenné kapiláře (31,2 cm x 50 m, efektivní délka 21 cm) při 20 kV. Detekce probíhala při vlnových délkách 190 nm a 265 nm. Optimální základní elektrolyt měl složení: 100 mM kyselina boritá s obsahem 100 mM sodecylsíranu sodného (SDS) v 10 % methanolu. pH* elektrolytu bylo upraveno na hodnotu 7,8 pomocí 50 mM tetraboritanu sodného. Jako vnitřní standard byl použit methylparaben (MP). Validovaná metoda byla úspěšně použita pro analýzu léčivého přípravku (Coldrex tbl.).
|
|
|
Vývoj kapilární elektromigrační metody pro stanovení obsahových látek silymarinu I.
Riasová, Petra ; Jáč, Pavel (vedoucí práce) ; Pospíšilová, Marie (oponent)
Univerzita Karlova v Prahe Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytickej chémie Kandidát: Petra Riasová Školiteľ: PharmDr. Pavel Jáč, Ph.D. Názov dipomovej práce: Vývoj kapilární elektromigrační metody pro stanovení obsahových látek silymarinu I. Táto diplomová práca sa venuje vývoju metódy na stanovenie jednotlivých flavonolignanov obsiahnutých v silymaríne pomocou micelárnej elektrokinetickej chromatografie. Optimalizácia metódy prebiehala testovaním vplyvu parametrov ako sú koncentrácia kyseliny boritej, koncetrácia dodecylsíranu sodného, koncetrácia cyklodextrínu, obsah organického modifikátora, pH a separačné napätie na separáciu. V priebehu optimalizácie bola najprv aplikovaná univariantná optimalizácia, ktorá ale neviedla k nájdeniu optimálnych separačných podmienok a tak bol v ďalšom priebehu práce použitý chemometrický prístup k vývoji separačnej metódy. Separácia prebiehala v kremennej kapiláre s priemerom 50 µm, s celkovou dĺžkou 47,2 cm a efektívnou dĺžkou 38,7 cm a neskôr bola metóda prevedená do kremennej kapiláry s vnútorným priemerom 25 µm (a s bublinovou detekčnou celou s priemerom 125 µm) s celkovou dĺžkou 48,5 cm a efektívnou dĺžkou 40 cm. UV detekcia prebiehala pri vlnových dĺžkach 200 a 320 nm. Kapilára bola termostatovaná na 25řC. K najoptimálnejšiemu rozdeleniu...
|
|
|
Analýza obsahových látek rodu Psilocybe I.
Kobrlová, Tereza ; Jahodář, Luděk (vedoucí práce) ; Jáč, Pavel (oponent)
1 ABSTRAKT Cílem této diplomové práce bylo stanovit obsahy dvou hlavních alkaloidů druhů r. Psilocybe vyskytujících se na území České republiky. Správnost určování druhů byla kontrolována odborníkem-mykologem. Kvalitativní a kvantitativní stanovení obsahových látek ve třech sbíraných druzích rodu Psilocybe bylo provedeno metodou LC-MSn (LIT). Vzorky hub byly nasbírány převážně na severu a severovýchodě Čech. Byly nalezeny tři druhy r. Psilocybe. Nejvíce nalézaným druhem byla P. serbica var. bohemica, dále P. semilanceata a P. serbica var. arcana byla objevena pouze na jednom nalezišti. Vzorky pocházejí z celkem 35 nalezišť v rámci 18 lokalit. Z kvalitativního hlediska byly oba hlavní alkaloidy potvrzeny ve všech vzorcích. Kvantitativní výsledky pro obsah psilocinu a psilocybinu (v tomto pořadí) jsou následující: P. bohemica 0,005 - 0,152 %, 0,000 - 0,048 %; P. semilanceata 0,087 - 0,337 %, 0,000 - 0,005 %; P. arcana 0,018 - 0,031 %, 0,003 - 0,022 %. Výsledky ve všech lokalitách jsou podobné a závislé spíše na druhu houby. Naše výsledky jsou vztaženy na suchou hmotu. Práce přinesla zásadní poznatky k budoucí optimalizaci analytické metody a předpoklady pro rozšíření projektu o další lokality a stanovení vedle hlavních obsahových látek i látek minoritních.
|
|
|
Porovnání APCI a ESI ionizace při vývoji UPLC-MS/MS metodiky pro stanovení steroidních látek ze skupiny estrogenů a progestinů
Rabatinová, Martina ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Jáč, Pavel (oponent)
Sledovanými látkami v této diplomové práci jsou ženské pohlavní hormony, jejichž prob- lematika v environmentální analýze nabývá na významu. Vliv hormonálně aktivních látek na životní prostřední a člověka má rostoucí tendenci. Již v 80. letech 20. století byly pozorovány deformity na rybách vyskytujících se v řekách. Mezi sloučeniny vykazující tyto účinky patří kromě steroidních hormonů také pesticidy, tenzidy a plastifikátory. Estrogeny, jak přirozené tak syntetické, jsou sloučeniny s vysokou hormonální aktivi- tou. Tyto sloučeniny zapříčiňují rakovinu prsu, abnormality v oblasti pohlavních orgánů a snížení početu spermií. Jsou také příčinou feminizace, hermafroditizmu a klesající plod- nosti u zvířat. Stoupající riziko znečištění vod nutí analytické laboratoře vyvíjet nejdokon- alajší instrumentální metody ke stanovení steroidních látek. Vliv estrogenů na životní prostředí byl pozorován již při koncentracích v pg/ml. Tato práce se zabývá vývojem metody pro kvalitativní a kvantitativní analýzu deseti látek steroidní povahy ze skupiny ženských pohlavních hormonů pomocí ultravysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s hmotnostním spektrometrem typu trojitého kva- drupólu s možností tandemové hmotnostní detekce (UHPLC-MS/MS). Separace byla provedena na koloně BEH Phenyl. Jako mobilní fáze byl...
|
|
|
Využití UHPLC s různými typy detekce v oblasti environmentální a potravinové analýzy
Rejman, David ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Jáč, Pavel (oponent)
Využití UHPLC s různými typy detekce v oblasti environmentální a potravinové analýzy Abstrakt Cílem práce bylo seznámení s možnostmi využití UHPLC instrumentace ve spojení s různými typy detekce při chromatografických separacích látek v oblasti environmentální a potravinové analýzy. Dalším cílem bylo vyhledat a prostudovat větší počet odborných článků týkajících se UHPLC metodiky, které jsou v současnosti dostupné v internetových databázích ScienceDirect a Web of Science. Na základě informací z odborných článků je v práci uveden grafický přehled týkající se počtu vyhledaných článků a skupin analyzovaných látek v jednotlivých letech. V úvodu práce jsou zmíněny van Deemterova, Giddingsova a Knoxova teorie pro účinnost chromatografického systému. Jedná se o teorie, které jsou podstatné pro pochopení principu účinnosti chromatografické separace. Následující kapitoly se zabývají problematikou vývoje chromatografie v posledních desetiletích především v oblasti délky a typu analytických kolon, velikosti náplňových částic či teploty a tlaku v chromatografickém systému. Vývoj dospěl v dnešní době až ke kolonám o rozměrech 50 x 1 mm, které jsou plněny částicemi menšími než 2 μm a jsou schopny pracovat za tlaků kolem 100 MPa. V dalších kapitolách je zmíněna problematika týkající se hmotnostní spektrometrie,...
|
|
|
Vývoj kapilární elektroforetické metody pro stanovení vybraných lékopisných nečistot indometacinu
Doubková, Dagmar ; Jáč, Pavel (vedoucí práce) ; Sklenářová, Hana (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Dagmar Doubková Školitel: PharmDr. Pavel Jáč, Ph.D. Název rigorózní práce: Vývoj kapilární elektroforetické metody pro stanovení vybraných lékopisných nečistot indometacinu Tato rigorózní práce se zabývá vývojem metody micelární elektrokinetické chromatografie pro stanovení vybraných lékopisných nečistot indometacinu (4-chlorbenzoové kyseliny, 5-methoxy-2-methyl-3-indolyloctové kyseliny a 3,4-dichloroindometacinu). Pro separaci byla použita křemenná kapilára o vnitřním průměru 50 µm, celkové délce 64,5 cm a efektivní délce 56 cm s bublinovou detekční celou o vnitřním průměru 150 µm. Jako vnitřní standard byla zvolena kyselina 1- naftyloctová (10 µg/ml). Analýza probíhala při napětí 30 kV. Analyty byly detekovány na katodickém konci kapiláry při vlnové délce 224 nm. Pro optimalizaci separačních podmínek byl použit centrálně kompozitní design. Byl zkoumán vliv koncentrace SDS, obsahu methanolu, koncentrace fosfátového pufru a pH pufru na třech úrovních. Jako optimální složení základního elektrolytu bylo zvoleno: 20 mmol/l fosfátový pufr (pH 7,57), 58 mmol/l SDS a 0 % (v/v) methanolu. Celková doba separace (s rozlišením všech sloučenin Rs ≥ 3,8) byla menší než 10 min. Linearita metody byla ověřena v...
|
|
|
Využití nanokompozitů jako povrchů pro SALDI-MS.
Böhmová, Eva ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Jáč, Pavel (oponent)
Ionizace laserem za účasti matrice (matrix-assisted laser desorption/ionization, MALDI) patří mezi měkké (šetrné) ionizační techniky hmotnostní spektrometrie a je důležitá zejména pro analýzu biomolekul a syntetických makromolekul. Použití MALDI pro analýzu nízkomolekulárních sloučenin je však obtížné, protože ionty matrice interferují s analýzou malých molekul. Jako řešení tohoto problému bylo vyvinuto několik metod, které využívají ionizaci laserem za účasti povrchu (surface- assisted laser desorption/ionization, SALDI). Předmětem výzkumu této práce byly možnosti využití nanokompozitů složených z polylaktidu a nanočástic halloysitu, hydroxyapatitu, oxidu hořečnatého, montmorillonitu, oxidu křemičitého, nitridu křemičitého, oxidu titaničitého a grafitizovaných sazí (graphitized carbon black, GCB) jako povrchů pro SALDI. Intenzity signálů tří léčiv, acebutololu, karbamazepinu a propranololu, získané z těchto povrchů byly porovnány s intenzitami signálů získaných bez použití matrice z nerezové destičky pro MALDI. Intenzita signálu byla zvýšena pouze, když byly použity tyto tři nanokompozity: nanokompozit s obsahem 30% GCB, nanokompozit s 10% nitridu křemičitého a nanokompozit s 10% oxidu titaničitého, a analyty v koncentraci 150 ppm. Díky tomu, že polylaktid je biodegradabilní a lze ho získat z...
|
|
|
Peptidové mapování bioléčiv pomocí CE
Kosolapov, Dmytro ; Jáč, Pavel (vedoucí práce) ; Khalikova, Maria (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Dmytro Kosolapov Školitel: PharmDr. Pavel Jáč, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Juraj Lenčo, Ph.D. Název diplomové práce: Peptidové mapování bioléčiv pomocí CE Tato práce se zabývá optimalizací kapilárně elektroforetické (CE) metody pro peptidové mapování a enzymatického štěpení proteinů pomocí trypsinu. Jako substrát pro enzymatické štěpení byl použit koňský myoglobin a referenční protilátka. Byly testovány dvě metody štěpení: konvenční štěpení trypsinem v roztoku a štěpení za využití komerční soupravy Smart Digest Trypsin Kit, která využívá imobilizovaný trypsin. Štěpení bylo kontrolováno pomocí RP- HPLC. Po optimalizaci tryptického štěpení byla provedena řada pokusů pro stanovení optimálních podmínek pro kvalitní separaci hydrolyzátu pomocí CE. Všechna měření se prováděla v PVA-kapiláře s vnitřním průměrem 50 µm, efektivní délkou 56 cm a celkovou délkou 64,5 cm. Vzorek byl dávkován hydrodynamicky za tlaku 50 mbar, vkládané napětí mělo hodnotu 30 kV, teplota kapiláry byla nastavena na 20 řC. Zóny analytů byly zaznamenávány UV-VIS detektorem při vlnové délce 200 nm. Byl testován vliv koncentrace a typu základního elektrolytu (30, 60, 90, 120, 150mM kyselina mravenčí a 0,5%, 1%, 1,5%, 2% kyselina octová), doby...
|
host ::
RSS.