|
| |
|
|
Klonování a exprese lidské AKR1A1
Kořínková, Petra ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Zemanová, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Petra Kořínková Školitel: Prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. Název diplomové práce: Klonování a exprese lidské AKR1A1 Aldo-ketoreduktasa 1A1 (AKR1A1) je monomerní cytosolický enzym patřící do skupiny karbonyl redukujících enzymů, nadrodiny aldo-ketoreduktas. Rodina aldo- ketoreduktas se významně podílí na redukčních reakcích endogenních substrátů i první fáze biotransformace xenobiotik. V lidském organismu se nachází 15 zástupců této velké rodiny, které lze nalézt v různých tkáních. Největší zastoupení mají v hepatocytech a renálních buňkách. AKR1A1 katalyzuje reakce aromatických i alifatických aldehydů na jejich odpovídající alkoholy. Z endogenních látek je jeho substrátem mevalonát. Jeho významnými substráty jsou i některá léčiva ze skupiny antracyklinových antibiotik - doxorubicin a daunorubicin. Dále se podílí na biotransformaci sorbitolu a rozvoji diabetických komplikací. Příprava rekombinantního enzymu byla provedena v E. coli za pomoci expresního vektoru pET28b(+). Izolovaná cDNA byla namnožena polymerasovou řetězovou reakcí, katalyzována Phusion Hot Start II polymerasou za přítomnosti specifických primerů, obsahujících restrikční místa pro endonukleasy NdeI a XhoI, kterými byly naštěpeny...
|
|
|
Internet a mezinárodní právo soukromé
Kořínková, Petra ; Pauknerová, Monika (vedoucí práce) ; Pfeiffer, Magdalena (oponent)
Resumé Cílem této diplomové práce je analýza právní úpravy vztahující se k prostředí internetu a mezinárodnímu právu soukromému. Internet je rychle se rozvíjející sítí vzájemně propojených počítačových sítí. Rychlé rozšíření internetu v posledních letech vedlo k tomu, že se internet stal téměř nezbytnou součástí našich životů, jejímž prostřednictvím dochází nejen ke komunikaci, ale také k uzavírání smluv. S rostoucím počtem uživatelů internetu vznikla otázka potřeby speciální právní úpravy prostředí internetu a elektronického obchodování. Diplomová práce se zaměřuje na právní regulaci prostředí internetu a elektronického obchodování a problematiku aplikace právních norem primárně určených pro vztahy reálného života na prostředí internetu. Práce se skládá celkem ze šesti kapitol, z nichž každá je zaměřena na jiný aspekt tohoto tématu. První kapitola je kapitolou úvodní. Vysvětluje propojení mezinárodního práva soukromého a internetu a přibližuje právní předpisy České republiky i Evropské unie, které se k uvedenému tématu vztahují. Druhá a třetí kapitola se zabývají příslušností soudů ve sporech vznikajících v prostředí internetu a určením rozhodného práva. Čtvrtá kapitola se zaměřuje na elektronické obchodování a uzavírání elektronických smluv. V závislosti na odlišnostech kontraktačního procesu rozlišujeme...
|
|
|
Klonování a exprese lidské AKR1A1
Kořínková, Petra ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Zemanová, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Petra Kořínková Školitel: Prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. Název diplomové práce: Klonování a exprese lidské AKR1A1 Aldo-ketoreduktasa 1A1 (AKR1A1) je monomerní cytosolický enzym patřící do skupiny karbonyl redukujících enzymů, nadrodiny aldo-ketoreduktas. Rodina aldo- ketoreduktas se významně podílí na redukčních reakcích endogenních substrátů i první fáze biotransformace xenobiotik. V lidském organismu se nachází 15 zástupců této velké rodiny, které lze nalézt v různých tkáních. Největší zastoupení mají v hepatocytech a renálních buňkách. AKR1A1 katalyzuje reakce aromatických i alifatických aldehydů na jejich odpovídající alkoholy. Z endogenních látek je jeho substrátem mevalonát. Jeho významnými substráty jsou i některá léčiva ze skupiny antracyklinových antibiotik - doxorubicin a daunorubicin. Dále se podílí na biotransformaci sorbitolu a rozvoji diabetických komplikací. Příprava rekombinantního enzymu byla provedena v E. coli za pomoci expresního vektoru pET28b(+). Izolovaná cDNA byla namnožena polymerasovou řetězovou reakcí, katalyzována Phusion Hot Start II polymerasou za přítomnosti specifických primerů, obsahujících restrikční místa pro endonukleasy NdeI a XhoI, kterými byly naštěpeny...
|
|
|
Stanovení vybraných pesticidů a jejich metabolitů technikou LC/MS
Kořínková, Petra ; Tesařová, Eva (vedoucí práce) ; Trešl, Ivan (oponent)
Pesticidy jsou sloučeniny určené k hubení, prevenci a kontrole škůdců a ochraně rostlin. Jejich široké použití v zemědělství způsobuje kontaminaci podzemních, povrchových i pitných vod, protože je čistírny odpadních vod nedokážou odstranit. Mezi jedny z nejvíce používaných pesticidů patří triazinové pesticidy. Jejich používání je ale celosvětově omezováno, z důvodu negativního vlivu na lidské zdraví i kontaminaci životního prostředí a to zvláště jejich metabolity, o jejichž toxicitě nejsou zatím žádné informace. V této diplomové práci byla vyvinuta a validována metoda pro stanovení triazinových pesticidů atrazinu, cyanazinu, propazinu, simazinu a terbutylazinu a jejich metabolitů hydroxyatrazinu, desethylatrazinu, desisopropylatrazinu, hydroxyterbutylazinu a desethylterbutylazinu ve vodách pomocí LC-MS/MS s ionizačním zdrojem elektrosprejem. LOD byl v rozsahu 0,5-3,2 pg/ml, LOQ v rozsahu 1,5-9,6 pg/ml. V této práci byl proveden test stability mateřských látek těchto pesticidů, kde se ukázala mít největší vliv na jejich degradaci teplota. Provedený monitoring výskytu triazinových pesticidů a jejich metabolitů ve vodách v ČR odhalil nízké koncentrace mateřských látek v povrchových i podzemích vodách i přes jejich zákaz používání v letech 2004-2008. Byly také nalezeny vysoké koncentrace...
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
host ::
RSS.