|
|
Studium vlivu složení mobilní fáze na selektivitu a retenci analytů na HILIC stacionárních fázích
Štětková, Kateřina ; Kočová Vlčková, Hana (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Kateřina Štětková Školitel: RNDr. Hana Vlčková, Ph. D. Název diplomové práce: Studium vlivu složení mobilní fáze na selektivitu a retenci analytů na HILIC stacionárních fázích Tato diplomová práce se zabývá vlivem koncentrace ACN, pH a koncentrace pufru v mobilní fázi na retenci a selektivitu kolon Atlantis HILIC Silica (3 μm, 2,1 mm x 100 mm) a Luna NH2 (3 μm, 2,0 mm x 100 mm). Ke studii bylo vybráno celkem 35 analytů, které zahrnují látky neutrální, bazické a kyselé. Detekce byla provedena pomocí PDA detektoru při vlnové délce 245 nm. Všechna měření probíhala za podmínek izokratické eluce při průtoku 0,4 ml.min-1 s využitím směsi acetonitril/voda (pufr) jako mobilní fáze. Teplota na koloně byla nastavena na 30 řC, teplota autosampleru na 4 řC a použitý nastřikovaný objem byl 2 μl. Pro vyhodnocení výsledků byly z naměřených hodnot sestrojeny grafy a tabulky, které sloužily k hodnocení kolon z hlediska selektivity a retence jednotlivých skupin analytů. Kolona Atlantis HILIC Silica vykazovala chování typické pro HILIC chromatografii, tj. retence stoupala se zvyšující se koncentrací ACN v mobilní fázi a to především od >85% ACN. Kolona Luna NH2 kromě HILIC chování navíc vykazovala silnou retenci...
|
|
|
Porovnání selektivity a retence analytů na dvou HILIC stacionárních fázích
Hodovská, Nikola ; Vlčková, Hana (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Nikola Klvanová Školitel: RNDr. Hana Vlčková, Ph.D. Název diplomové práce: Porovnání selektivity a retence na dvou HILIC stacionárních fázích Diplomová práce se zabývá vlivem koncentrace acetonitrilu, pH a koncentrace pufru v mobilní fázi na retenci a selektivitu dvou analytických kolon Luna HILIC (diol) (3 m, 100 x 3,0 mm) a Ascentis ES Cyano (3 m, 100 x 2,1 mm). Pro studii bylo vybráno celkem 28 analytů ze zástupců kyselých, neutrálních a bazických látek. Detekce byla provedena pomocí PDA detektoru při vlnové délce 245 nm. Jako mobilní fáze byla použita směs acetonitrilu a vodné složky (pufr nebo kyselina octová) za izokratické eluce s průtokem mobilní fáze 0,7 ml/min a 0,3 ml/min. Teplota na koloně byla nastavena na 30řC a teplota v autosampleru na 4řC. Nástřik byl 5 l nebo 3 l. Pro snazší hodnocení byly naměřené hodnoty shrnuty v tabulkách a následně sestrojeny grafy. Vliv procentuálního obsahu acetonitrilu v mobilní fázi byl hodnocen na základě grafické závislosti k'= f (%W), ze které je patrná zvyšující se retence se zvyšujícím se obsahem acetonitrilu v mobilní fázi (typické HILIC chování), především v oblasti od 85%) pro všechny analyty na koloně Luna HILIC (diol). Na koloně Ascentis ES...
|
|
|
Vývoj HPLC metody pro stanovení umělých barviv ve vzorcích zeleného piva
Stachová, Ivana ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Ivana Stachová Školitel: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph. D. Název diplomové práce: Vývoj HPLC metody pro stanovení umělých barviv ve vzorcích zeleného piva. V této diplomové práci byla vyvinuta HPLC metoda pro stanovení syntetických, ve vodě rozpustných barviv E 102 - Tartrazine, E 104 - Quinoline yellow, E 110 - Sunset yellow, E 131 - Patent blue E 132 - Indigo carmine, E 142 - Green S, E 133 - Brilliant blue FCF a E 143 - Fast green FCF. Tato metoda byla aplikována na stanovení přítomnosti zmíněných barviv ve vzorcích zeleného piva Jarní pivo 11ř (Primátor, Náchod), Krasličák 14ř (Ježek, Jihlava), Zelený král Vratislav 12ř (Konrád, Vratislavice), Velikonoční speciál 14ř (Starobrno, Brno), Velikonoční ležák 12ř (Radniční pivovar, Jihlava), Rohozec 11ř (Rohozec, Malý Rohozec), Zelená nefiltrovaná 12ř (Žlebské Chvalovice), Velikonoční zelený ležák 12ř (Purkmistr, Plzeň), Velikonoční kopřivová 12ř (Modrá Hvězda, Dobřany), Valášek 12ř (Valášek, Vsetín), Podkováň 12ř (Podkováň, Dolní Cetno). Pro analýzu byla použita kolona Chromolith Performance CN 100 x 4,6 mm s předkolonkou Chromolith CN 5 x 4,6 mm Merck. Jako mobilní fáze byl zvolen 40% MeOH s 2% pufrem z kyseliny octové s přídavkem NH3,...
|
|
| |
|
|
Vývoj HPLC metody pro stanovení amygdalinu a serotoninu v doplňku stravy
Parmová, Martina ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Aufartová, Jana (oponent)
Byla vyvinuta a validována metoda pro stanovení obsahu amygdalinu a serotoninu v doplňku stravy B17 APRICARC za použití vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Pro získání analytů byla použita extrakce do 96% ethanolu. Jako vhodná chromatografická kolona byla zvolena kolona Ascentis® Express OH5 (3 x 100 mm, 2,7 µm). Složení mobilní fáze pro analýzu bylo 10 mM acetátový pufr pH 3,8 s acetonitrilem v poměru 10:90 (v:v). Průtoková rychlost byla 0,8 ml/min, detekce amygdalinu byla prováděna pomocí UV detektoru (vlnová délka 215 nm) a pro detekci serotoninu byl využit fluorescenční detektor (Ex 280 nm, Em 340 nm). Byl proveden test vhodnosti chromatografického systému, kde byly sledovány parametry: účinnost kolony, faktor symetrie píků, rozlišení a opakovatelnost analýzy. Při vlastní validaci byly sledovány parametry: přesnost, linearita, správnost, detekční a kvantitativní limit.
|
|
| |
|
|
Vývoj MEPS metody pro UHPLC-MS/MS stanovení entekaviru v ultrafiltrátu ledvin
Janák, Jaroslav ; Vlčková, Hana (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
1 Abstrakt Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Jaroslav Janák Školitel: RNDr. Hana Vlčková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj MEPS metody pro UHPLC-MS/MS stanovení entekaviru v ultrafiltrátu ledvin Diplomová práce se zabývala vývojem a validací metody úpravy vzorků pro stanovení entekaviru v ultrafiltrátu ledvin, pomocí techniky MEPS, tj. mikroextrakce tuhým sorbentem. K analýze byla využita již dříve vyvinutá UHPLC-MS/MS metoda pro stanovení entekaviru v potkaní moči. Pro jeho stanovení byla využita hydrofilní interakční chromatografie na koloně Acquity BEH Amide za použití izokratické eluce. Složení mobilní fáze acetonitril - 5 mM octan amonný pH 4,0 bylo v poměru 75:25 (v:v). Jako vnitřní standard byl použit entekavir C2 13 N15 . Ionizace analytu byla provedena elektrosprejem v pozitivním módu a jako detektor byl zvolen trojitý kvadrupól. Ke kvantifikaci analytu bylo využito SRM přechodů entekaviru a vnitřního standardu. Na základě optimalizace MEPS metody byl jako nejvhodnější tuhá fáze zvolen porézní grafitický uhlík vhodný pro analýzu polárních látek. Jako eluční činidlo byl zvolen roztok acetonitril a vody v poměru 75:25 (v:v) a jako promývací činidlo čistá voda. Metoda byla validována. Ověřena byla zejména linearita, přesnost,...
|
|
|
Stresové zkoušky dimetinden-maleinátu s využitím metody HPLC
Pannyová, Anna ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Kujovská Krčmová, Lenka (oponent)
ABSTAKT Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Studentka: Anna Pannyová Školitel: PharmDr. Lucie Havlíková, Ph.D Název diplomové práce: Stresové zkoušky dimetinden-maleinátu s využitím metody HPLC Cílem této práce bylo zjistit stabilitu dimetinden-maleinátu pomocí stresových testů a provést optimalizaci metody pro stanovení dimetindenu a jeho nečistot. Stresové zkoušky se provádějí s léčivým přípravkem/léčivou látkou za účelem zjištění jejich stability. Případná nestabilita se může projevit úbytkem účinné látky, ztrátou její farmakologické aktivity nebo vznikem rozkladných produktů. Dimetinden-maleinát je látka s antihistaminickými účinky, působí na H1 receptory histaminu. Vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC) je v současné době jednou z nejpoužívanějších separačních metod sloužících k analýze stability léčivých přípravků a léčivých látek. V průběhu experimentální části práce bylo prokázáno, že zvýšená teplota, voda, acetonitril ani kyselé prostředí nemají vliv na stabilitu léčiva. Zato zásadité prostředí a přítomnost oxidačního činidla vedou k významnému rozpadu dimetindenu za vzniku rozkladných produktů DP1(tR 3,94 min) a DP2 (tR 6,08 min). Rozkladné produkty byly odděleny od píku dimetindenu za použití chromatografické kolony Zorbax SB-CN (4,6...
|
|
|
Optimalizace kroku přípravy vzorku biologického materiálu pro UHPLC-MS/MS analýzu atorvastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů
Pilařová, Veronika ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Veronika Pilařová Školitel: Doc. PharmDr. Lucie Nováková Ph.D. Název diplomové práce: Optimalizace kroku přípravy vzorku biologického materiálu pro UHPLC- MS/MS analýzu atorvastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů. Cílem této diplomové práce bylo optimalizovat UHPLC-MS/MS metodu určenou pro stanovení koncentrace atorvastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů v biologickém materiálu a dále vyvinout a optimalizovat metodu pro přípravu vzorku biologického materiálu technikou MEPS, t. j. mikroextrakcí pomocí tuhého sorbentu, a tuto metodu zvalidovat. K separaci analytů byla využita kolona Acquity BEH C18 (50 x 2,1 mm, 1,7 µm, Waters). Ionizace analytů byla provedena elektrosprejem v pozitivním i v negativním módu. Jako detektor byl použit trojitý kvadrupól. U každého analytu byl zvolen prekurzorový ion, ion fragmentu a optimalizována kolizní energie a napětí na vstupním kuželu pro každou látku zvlášť. Kvantifikace látek byla provedena pomocí SRM (monitorování vybrané reakce). Pro rosuvastatin lakton, který byl stanovován v pozitivním módu, byla prekurzorovým iontem zvolena protonovaná molekula [M+H]+ . Pro zbylé statiny byl v negativním módu vybrán prekurzorový ion [M-H]- , který měl největší...
|
|
|
Vývoj HPLC metody pro stanovení betakarotenu v potravních doplňcích
Hlaváčková, Markéta ; Šatínský, Dalibor (vedoucí práce) ; Chocholoušová Havlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Markéta Hlaváčková Konzultant: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj HPLC metody pro stanovení betakarotenu v potravních doplňcích Byla optimalizována a vyvinuta HPLC metoda pro stanovení obsahu betakarotenu v potravních doplňcích Betakaroten Farmax, GS Betakaroten FORTE (GreenSwan pharmaceuticals), Walmark Betakaroten, Bioaktivní karoten (Pharma Nord Denmark), Beta karoten Max, BETAVID + LUTEIN (Naturvita), Karovit (Vitabalans Oy), SELZINK PLUS (PRO.MED.CS), Pupalkový olej (Aromatica). Metoda je založena na využití kolony Ascentis Express C18 (30 x 4,6 mm; 2,7 µm) a UV detekce při 450 nm. Byla využita izokratická eluce mobilní fází 100% methanolem, průtoková rychlost mobilní fáze byla 1,5 ml/min. Měření probíhalo při teplotě 60 řC. Retenční čas betakarotenu byl za podmínek optimalizované a validované metody 2,185 min. Klíčová slova: betakaroten, HPLC, Betakaroten Farmax, GS Betakaroten FORTE (GreenSwan pharmaceuticals), Walmark Betakaroten, Bioaktivní karoten (Pharma Nord Denmark), Beta karoten Max, BETAVID + LUTEIN (Naturvita), Karovit (Vitabalans Oy), SELZINK PLUS (PRO.MED.CS), Pupalkový olej (Aromatica)
|
host ::
RSS.