Název: Plasmidové DNA vakcíny
Překlad názvu: Plasmid DNA vaccines
Autoři: Machan, Radoslav ; Chroboková, Maria (oponent) ; Rittich, Bohuslav (vedoucí práce)
Typ dokumentu: Bakalářské práce
Rok: 2014
Jazyk: cze
Nakladatel: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstrakt: [cze] [eng]
Plazmidové DNA vakcíny predstavujú novú generáciu vakcín s veľkým potenciálom pri prevencii mnohých ochorení. Súčasné štúdie a klinické testy sa zameriavajú na prevenciu pred rakovinou, hepatitídou, maláriou, HIV, chrípky a inými chorobami. Hlavné výzvy týkajúce sa plazmidových DNA vakcín sú v súčasnosti spojené s optimalizáciou jednotlivých krokov výroby a najmä v purifikačných krokoch umožňujúcich výrobu pDNA v množstvách až niekoľkých kilogramov. Hlavnými purifikačnými technikami sú v súčastnosti chromatografické metódy, ale výzkum a vývoj poukazuje aj na potenciálne využitie iných metód, napríklad dvojfázových vodných systémov a magnetických nosičov. V experimentálnej časti bola prevedená izolácia plazmidu pUC 19 z kultúry buniek Escherichia coli JM 109 (pUC 19) metódou alkalickej lýzy. Izolácia bola overená agarózovou gélovou elektroforézou. Izolované vzorky boli purifikované chloridom lítnym a magnetickými nosičmi a miera purifikácie overená spektrofotometricky. Jednotlivé vzorky boli znovu vizualizované agarózovou gélovou elektroforézou a výsledky porovnané. Plasmid DNA vaccines are the new generation of vaccines with a great potential in prevention of many diseases. Recent studies and clinical test are aimed at prevention against cancer, hepatitis, malaria, HIV, influenza and other diseases. Recent main challenges covering plasmid DNA vaccines are associated with optimalization of each step of production and mainly purification steps allowing production of pDNA at kilogram levels. Main purification techniques used are based upon chromatographic methods, but research and development also shows other potential methods, like two-phase aqueous systems or magnetic microparticles as carriers. In experimental part of this thesis isolation of pUC 19 plasmid from Escherichia coli JM 109 (pUC 19) cell culture was performed via method of alkaline lysis. Isolation was verified by agarose gel electrophoresis. Isolated samples were purified in four repetitions with lithium chloride and magnetic microparticle carriers and the extent of purification was verified spectrophotometrically. Purified samples were visualised via agarose gel electrophoresis and results were compared.
Klíčová slova: chromatografia; dvojfázový vodný systém; Escherichia coli; magnetické nosiče; plazmid; purifikácia; vakcína; chromatography; Escherichia coli; magnetic particles; plasmid; purification; two-phase aqueous system; vaccine

Instituce: Vysoké učení technické v Brně (web)
Informace o dostupnosti dokumentu: Plný text je dostupný v Digitální knihovně VUT.
Původní záznam: http://hdl.handle.net/11012/31446

Trvalý odkaz NUŠL: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-215218


Záznam je zařazen do těchto sbírek:
Školství > Veřejné vysoké školy > Vysoké učení technické v Brně
Vysokoškolské kvalifikační práce > Bakalářské práce