|
|
Imobilizace proteinových makromolekul na polymerní nosiče
Šitnerová, Michaela ; Holas, Ondřej (vedoucí práce) ; Ondrejček, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Farmaceutické technologie Školitel: PharmDr. Ondřej Holas, Ph.D. Posluchač: Michaela Šitnerová Název diplomové práce: Imobilizace proteinových makromolekul na polymerní nosiče Enzymy jsou pro své vlastnosti unikátními biokatalyzátory. Jsou vysoce specifické, selektivní a funkční i při mírných reakčních podmínkách. Ke zvýšení jejich operační stability, aktivity a možnosti opětovného užití je využívána metoda imobilizace. Tento proces umožňuje široké uplatnění enzymů v průmyslu. Například v oblasti potravinářství, zemědělství, analytické chemie, chemické syntézy či ve farmaceutickém průmyslu. Cílem mé práce byla imobilizace enzymu acetylcholinesterasy (AChE) na pelety z mikrokrystalické celulosy (MCC). Využívána byla metoda prosté sorpce, imobilizace pomocí glutaraldehydu a oxidace MCC pomocí TEMPO. K měření aktivity AChE sloužila dobře známá Ellmanova metoda. Absorbance roztoku s imobilizovanou AChE byla měřena spektrofotometricky při vlnové délce 412 nm.
|
|
|
Studium procesu lisování pelet z mikrokrystalické celulosy.
Trpělková, Žofie ; Ondrejček, Pavel (vedoucí práce) ; Holas, Ondřej (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické technologie Školitel: Mgr. Pavel Ondrejček, Ph.D. Posluchač: Žofie Trpělková Název diplomové práce: Studium procesu lisování pelet z mikrokrystalické celulosy Tato práce je zaměřena na porovnání dvou typů mikrokrystalické celulosy (Comprecel 102 a Avicel PH-200) se dvěma typy pelet vyrobených z mikrokrystalické celulosy (Cellets 100 a Cellets 200). U těchto materiálů byly zkoumány vlastnosti důležité pro jejich lisování do tablet. Byla hodnocena distribuce velikosti částic, obsahová vlhkost, sypná a setřesná hustota, sypnost, sypný úhel a Hausnerův poměr. Dále byl popsán průběh lisovacího procesu metodou záznamu síla-dráha a trojexponenciální lisovací rovnice. V neposlední řadě byla hodnocena pevnost a oděr tablet lisovaných z těchto materiálů při dvou lisovacích silách. Z výsledků vyplynulo, že oba typy pelet mají mnohem lepší tokové vlastnosti než práškované mikrokrystalické celulosy. Je to dáno především úzkou distribucí velikosti částic, vyšší sypnou i setřesnou hustotou a výrazně hladším povrchem pelet. Lepší tokové vlastnosti pelet také ovlivňovaly parametry záznamu síla dráha a lisovací rovnice. Parametry popisující fázi předlisování byly ovlivněny nejvíce. U obou typů pelet byla v této fázi pozorována...
|
|
|
Deriváty pyrazinu jako potenciální léčiva V.
Horová, Anna ; Marek, Jan (vedoucí práce) ; Holas, Ondřej (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Pracoviště: Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Diplomant: Anna Horová Vedoucí práce: PharmDr. Jan Marek, Ph.D. Název diplomové práce: Deriváty pyrazinu jako potenciální léčiva V. TBC je celosvětově rozšířené specifické infekční onemocnění, ke kterému přispívá zvýšená migrace obyvatelstva, šíření HIV a nárůst MDR-TB, a to i extrémně rezistentních kmenů. Právě pro nárůst MDR-TB rezistentních mykobakterií byla tato práce zaměřena na přípravu a vývoj dalších možných antituberkulotik (derivátů pyrazinu). Ve výzkumu nových léčiv je kladen důraz na zásah do působení enzymů důležitých pro životaschopnost mykobakterií. V rámci mé diplomové práce byly připraveny deriváty pyrazinu modifikací již klinicky užívaného léčiva pyrazinamidu. PZA je důležitou složkou v krátkodobé léčbě TBC, mající sterilizační aktivitu, schopnost účinkovat v kyselém prostředí a má významnou synergii s rifampicinem. Malá molekula PZA je prekurzorem pyrazinové kyseliny aktivované pyrazinamidázou nebo nikotinamidázou. Hydrolýzou PZA v mykobakteriálních buňkách vzniká pyrazinkarboxylová kyselina (POA). V experimentální části jsme se zabývali obměnou molekuly pyrazinamidu a přípravou jeho nových derivátu s potenciální antituberkulotickou aktivitou. Vazbou přes...
|
|
|
Reologické chování větvených polyesterů
Martiška, Juraj ; Šnejdrová, Eva (vedoucí práce) ; Holas, Ondřej (oponent)
UNIVERZITA KARLOVA V PRAZE Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Farmaceutické technologie Jméno a příjmení: Juraj Martiška Název diplomové práce: Reologické chování větvených polyesterů Školitel: PharmDr. Eva Šnejdrová, Ph.D Tato práce se zabývá studiem reologických a termických vlastností potencionálního polyesterového nosiče léčiv, složeného z ekvimolárního podílu kyselin D,L-mléčné a glykolové, větveného tripentaerythritolem v koncentraci 3% a jeho analogů plastifikovaných methylsalicylátem v různých koncentracích. Teoretická část se zabývá charakterizací polymerů, jejich plastifikací a rotační reometrií. V experimentální části byly připraveny plastifikované polyestery, pomocí DCS byly zjištěny hodnoty skelných přechodů a na rotačním reometru proběhlo testování jejich reologického chování. Z výsledků termické analýzy vyplývá, že methylsalicylát výrazně snižuje teplotu skelného přechodu testovaného polyesteru a jeví se proto jako vhodný plastifikátor. Výsledná data z reologické analýzy ukazují, že plastifikovaný 3T polymer vykazuje pseudoplastické chování při teplotě 25 řC a koncentraci methylsalicylátu 20 %, kdy je viskozita soustavy nejvyšší. Se zvyšující se teplotou a koncentrací methylsalicylátu viskozita soustav výrazně klesá a nastává přechod k newtonskému chování. Tixotropní...
|
|
|
Vliv délky prodlevy na parametry testu stresové relaxace u laktosy a hydrogenfosforečnanu vápenatého.
Straková, Markéta ; Svačinová, Petra (vedoucí práce) ; Holas, Ondřej (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Farmaceutická technologie Školitel: Mgr. Petra Svačinová, Ph.D. Posluchač: Straková Markéta Název diplomové práce: Vliv délky prodlevy na parametry testu stresové relaxace u laktosy a hydrogenfosforečnanu vápenatého Cílem této práce je zjištění viskoelastických vlastností farmaceutických pomocných látek a zhodnocení pevnosti tablet, které z nich byly vyrobeny. Teoretická část se zabývá popisem použitých materialů, těmi jsou laktosa, hydrogenfosforečnan vápenatý a stearan hořečnatý. Dále se práce věnuje testu stresové relaxace, jeho hodnocení a využití. V textu je poté popsána pevnost tablet, její výpočet a faktory, které ji ovlivňují. V experimentální části se sledují viskoelastické vlastnosti použitých surovin a jejich směsí s kluznou látkou za pomoci testu stresové relaxace. Pro jednotlivá měření byly použity různé časové prodlevy (60 s, 120 s, 180 s, 240 s, 300 s, 360 s, 420 s, 480 s, 540 s, 600 s). Zjišťována byla závislost parametrů elasticity (A1, A2, A3) a plasticity (P1, P2, P3) na délce prodlevy. Pro hydrogenfosforečnan vápenatý byla zjištěna jako nejvhodnější časová prodleva 180 - 240 s. U laktosy byla určena optimální délka prodlevy 300 s. Kluzné látky mírně zvyšují časovou prodlevu, kde dochází k největším...
|
|
|
Syntéza a biologické hodnocení takrin-amantadinových derivátů
Král, Jan ; Opletalová, Veronika (vedoucí práce) ; Holas, Ondřej (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Student: Jan Král Školitel: doc. RNDr. Veronika Opletalová, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Jan Korábečný, Ph.D. Název diplomové práce: Syntéza a biologické hodnocení takrin-amantadinových derivátů Alzheimerova choroba je závažné neurodegenerativní onemocnění mozku. Dnes je k terapii této nemoci k dispozici pouze paliativní léčba. Dělíme ji do dvou skupin na inhibitory acetylcholinesterasy (AChEIs) a antagonistu působícího na N- methyl-D-aspartátových (NMDA) receptorech. Do skupiny AChEIs patří takrin, donepezil, rivastigmin a galantamin. Takrin byl kvůli jeho nežádoucím účinkům, zejména značné hepatotoxicitě stažen z trhu. V České republice byl vyvinut jeho derivát 7-methoxytakrin (7-MEOTA), který vykazuje nižší jaterní toxicitu. Tato práce popisuje přípravu sérií takrin-amantadinových derivátů. V rámci biologického hodnocení byla stanovena jejich in vitro účinnost vůči acetylcholinesterase (AChE) a butyrylcholinesterase (BChE) za pomoci Ellmanovy metody. Dosažené inhibiční hodnoty byly porovnány se standardy (takrin, 7-MEOTA, amantadin). Všechny nově připravené deriváty svou inhibiční účinností vůči AChE i BChE překonaly 7-MEOTA i amantadin. Produkt 14 byl dokonce silnější inhibitor AChE než...
|
|
|
Polymeric stabilizers maintaining the supersaturation solubility of itraconazole nanocrystals after dissolution process
Kubačková, Jana ; Holas, Ondřej (vedoucí práce) ; Paraskevopoulos, Georgios (oponent)
Názov diplomovej práce: Polymérne stabilizátory udržujúce nasýtenosť roztoku po rozpustení nanokryštálov itrakonazolu Autor: Jana Kubačková Katedra: Katedra farmaceutickej technológie Školiteľ: PharmDr. Ondřej Holas, Ph.D. Školiteľ-špecialista: doc. Leena Peltonen, Ph.D. Snaha o zvýšenie biodostupnosti vo vode veľmi ťažko rozpustných liečiv je stále otázkou. Jednou z techník zlepšujúcich rozpustnosť liečiv vo vode, a teda následne podporujúcich biodostupnosť, je vytvorenie nanočastíc. Avšak biodostupnosť je určovaná koncentráciou rozpusteného liečiva v čase absorpcie. Táto skutočnosť zdôrazňuje dôležitosť udržania vysokej koncentrácie rozpusteného liečiva až po miesto absorpcie. Dostatočne stabilizované nanokryštalické liečivá ponúkajú riešenie tohto problému. V tejto diplomovej práci je prezentovaná príprava tuhých nanokryštálov anitmykotického agens itrakonazolu (ITZ). K príprave nanosuspenzie bolo použité mokré mletie, nanosuspenzia bola stabilizovaná binárnou zmesou stabilizátorov alebo jediným stabilizátorom. Bol použitý inhibítor agregácie Poloxamer 407 (F127) v kombinácii s polymérnym inhibítorom precipitácie/zrážania hydroxypropylmetylcelulóza (HPMC) alebo polyvinylpyrolidon (PVP) v rôznych pomeroch, prípadne samotný inhibítor precipitácie. Nanorozmery boli stanovené pomocou dynamického...
|
|
|
Molekulárně modelovací studie potenciálních inhibitorů mykobakteriální enoyl-reduktasy
Slovák, František ; Holas, Ondřej (vedoucí práce) ; Zitko, Jan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Pracoviště: Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Diplomant: František Slovák Vedoucí práce: PharmDr. Ondřej Holas, Ph.D. Název diplomové práce: Molekulárně modelovací studie potenciálních inhibitorů mykobakteriální enoyl-reduktasy. Tuberkulóza je celosvětově rozšířené infekční onemocnění. Největším problémem dnešní doby jsou multi a kompletně rezistentní kmeny Mycobacterium tuberculosis, které nereagují na žádná dosud známá léčiva. Hlavním důvodem vysoké odolnosti a lékové rezistence bacila je složení jeho buněčné stěny. Ta obsahuje vysoký podíl mykolových kyselin. Syntéza mykolových kyselin probíhá v několika krocích. Finálním krokem je katalytická redukce enzymem enoyl ACP-reduktázou (InhA). Tato práce byla zaměřena na hledání nových potenciálních látek, které by byly schopné tento enzym inhibovat. K hledání těchto látek bylo použito metod výpočetní technologie a molekulového modelování. Úprava krystalografických struktur proběhla v programu Maestro a dockování v programu MOE. Pomocí molekulového dockingu bylo na 3 krystalografických strukturách enzymu InhA otestováno přes 30 000 molekul z databáze ZND (Zink natural derivates). Z tohoto počtu bylo vybráno 8 molekul, jejichž výsledky po provedení dockingu nasvědčovaly...
|
|
|
Vliv injekčního podání léčiv na vznik oxidačního stresu na modelu laboratorního morčete
Kračmarová, Alžběta ; Mokrý, Milan (vedoucí práce) ; Holas, Ondřej (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Katedra biochemických věd Kandidát Mgr. Alžběta Kračmarová Konzultant pplk. doc. RNDr. Miroslav Pohanka Název rigorózní práce Vliv injekčního podání léčiv na vznik oxidačního stresu na modelu laboratorního morčete Při práci s laboratorními hlodavci je běžným postupem injekční podání léčiv. Protože jsou tato zvířata značně citlivá na způsob zacházení, dochází u nich při injekční aplikaci látek k narušení homeostázy organizmu, jako např. zvýšení tělesné teploty, tachykardii, poklesu či vzestupu glykémie nebo narušení oxidační rovnováhy. To může ovlivnit výsledky prováděných experimentů. Cílem předkládané práce bylo objasnit, zda a jakým způsobem může intramuskulární injekce ovlivnit běžně vyšetřované známky oxidačního stresu. Laboratorním morčatům byl intramuskulární injekcí do stehenního svalu podán fyziologický roztok. Po usmrcení jim byla odebrána krev a vybrané životně důležité orgány. V homogenátech z odebraných orgánů byla stanovena hladina malondialdehydu a proteinového karbonylu, - známky oxidačního poškození lipidů a proteinů, hladina nízkomolekulárních antioxidantů, aktivita enzymů antioxidačního systému glutationreduktasy a superoxiddismutasy a apoptického enzymu kaspasy 3. Dále bylo provedeno běžné biochemické...
|
|
|
Kolorimetrická metoda založená na imobilizované acetylcholinesterase pro stanovení účinnosti inhibitorů používaných v terapii
Drobík, Oto ; Opletalová, Veronika (vedoucí práce) ; Holas, Ondřej (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Kandidát Mgr. Oto Drobík Konzultant doc. RNDr. Veronika Opletalová, Ph.D. Název rigorózní práce Kolorimetrická metoda založená na imobilizované acetylcholinesterase pro stanovení účinnosti inhibitorů používaných v terapii. Mezi inhibitory acetylcholinesterasy (AChE) patří velké množství látek, které se využívají v zemědělství například jako insekticidy nebo pesticidy. Používají se také jako nervově paralytické látky pro vojenské účely. Některé našly využití i v léčbě nemocí jako je myastenia gravis nebo Alzheimerova nemoc. V rámci rigorózní práce byla úspěšně imobilizována AChE za pomocí želatiny na dno 96 jamkové destičky. Pomocí kolorimetrické metody byly optimalizovány reakční podmínky, byla testována i odolnost imobilizované AChE vůči vymytí. Dále byla zjištěna míra inhibice AChE rozpouštědly a byly vyhodnoceny kinetické parametry enzymové reakce. Jako zástupci inhibitorů AChE byly testovány vzorky takrinu a pyridostigminu. Dále se provedl dlouhodobější test stability imobilizované AChE. Dosažené výsledky ukazují, že popsaná metoda je vhodná pro rutinní sledování účinnosti inhibitorů cholinesteras.
|
host ::
RSS.