|
Vliv nadbytku železa na indukci apoptózy u savčích buněk
Kabíčková, Tereza ; Balušíková, Kamila (vedoucí práce) ; Klíma, Martin (oponent)
Kationty železa jsou důležité ionty kovů nezbytné pro řadu základních buněčných funkcí. Při nadbytku železa však mohou být pro organismus velmi toxické. Volné ionty železa katalyzují prostřednictvím Fentonovy reakce vznik vysoce reaktivních kyslíkových (především hydroxylových) radikálů. Homeostáza železa v organismu je regulována pomocí striktního mechanismu a to především na úrovni příjmu železa enterocyty. Absorpce, transport a skladování železa v rámci organismu jsou dále regulovány pomocí mechanismů lišících se na úrovni buňky a na úrovni celého organismu. Narušení přísné homeostázy železa vede k jeho akumulaci v buňce a ke vzniku reaktivních kyslíkových radikálů. Reaktivní částice mohou způsobovat vážné buněčné poškození až apoptózu. Skladování přebytečného železa v organismu a následný vznik oxidativního stresu tak může ovlivňovat celou řadu tkání. Orgánová poškození, jako je fibróza, cirhóza, hepatocelulární karcinom, srdeční selhání, ztráta β buněk a nízká glukózová tolerance či diabetes mellitus, jsou u nemocných s přetížení železem velmi často pozorována. Nicméně proces indukce apoptózy v důsledku přetížení buněk nadměrným příjmem železa není dosud dobře prozkoumán. Stále neexistují žádné komplexní informace o tom, jak oxidativní stres ovlivňuje různé typy buněk, či zdali se indukce...
|
|
Role proteinu Smarca5 (Snf2h) v regulaci transkripce vneseného DNA templátu.
Zikmund, Tomáš ; Stopka, Tomáš (vedoucí práce) ; Smetana, Karel (oponent)
Vlastnosti buněk a tkání jsou výsledkem dynamické regulace genové exprese. DNA zabalená do proteinových struktur, souhrně označovaných jako chromatin, vyžaduje zapojení mechanizmů regulujících přístupnost specifických sekvencí. U eukaryot hrají klíčovou roli při regulaci struktury chromatinu tzv. chromatin-remodelační enzymy, mezi které patří ISWI ATPáza SMARCA5. SMARCA5 se účastní řady biologických procesů na DNA včetně transkripce, přesto význam proteinu SMARCA5 v transkripci především ve vztahu ke změnám chromatinové struktury in vivo není zcela objasněn. Pro tento účel jsme vytvořili a optimalizovali systém, který nám umožnil sledovat vliv intracelulární hladiny proteinu SMARCA5 na genovou expresi a vývoj chromatinové struktury artificiálně vneseného reportérového vektoru. Naše výsledky ukazují, že DNA vneseného reportérového vektoru byla nabohacena specificky tri-methylovanými molekulami histonu H3 na lyzinu 4 (H3K4Me3), které patří mezi známky aktivovaného chromatinu. Po nadprodukci proteinu SMARCA5 došlo v kódující sekvenci reportérového genu k ~2,5-3 násobnému zvýšení relativního nabohacení histonu H3 a jeho methylace (H3K4Me3). Vyšší zapojení molekul reportéru do procesu transkripce vedlo neočekávaně k poklesu reportérové aktivity oproti kontrole. Tyto výsledky podporují přítomnost...
|
|
HPLC stanovení delta-9-tetrahydrokanabinolu
Bažantová, Aneta ; Jezberová, Michaela (vedoucí práce) ; Lázníčková, Alice (oponent)
Název: HPLC stanovení delta-9-tetrahydrokanabinolu Autor: Aneta Bažantová Vedoucí diplomové práce: RNDr. Michaela Hamerníková, Ph.D. Katedra: Katedra biofyziky a fyzikální chemie Hlavním cílem mé práce bylo najít vhodnou analytickou metodu k stanovení delta-9- tetrahydrokanabinolu v konopí (bez zahřívání vzorku během analýzy k předejití navýšení výsledků ∆9 -THC) pro využití ve forenzní praxi. Provedla jsem optimalizaci a validaci podmínek HPLC metody pro kvantitativní analýzu delta-9-tetrahydrokanabinolu (∆9 -THC) v n-hexanovém extraktu z marihuany. Kvantifikace byla provedena metodou vnitřního standardu s použitím beta-17-estradiol acetátu. Analýzy byly prováděny na koloně C18 s mobilní fází metanol a voda (90:10) v izokratickém provedení při průtoku 1ml/min. Sloučeniny byly detekovány fluorescenčním detektorem při excitační/emisní vlnové délce 220nm/317nm. Standard ∆9 -THC opouštěl kolonu v retenčním čase 9,97 min a vnitřní standard v čase 5,25 min. Celková doba analýzy trvala kolem 10 min. Zkoumané validační charakteristiky zahrnovaly linearitu, správnost, přesnost, mez detekce, mez stanovitelnosti a robustnost metody. Kalibrační křivka vykazovala linearitu v rozmezí koncentrací 0,56-35,71 µg/ml ∆9 -THC s korelačním koeficientem r > 0,9998. Stanovený limit detekce (LOD, S/N = 3) byl 0,55 µg/ml...
|
|
Determination of mechanical properties from microcompression test
Truhlář, Michal ; Kruml, Tomáš ; Kuběna, Ivo ; Petráčková, Klára ; Náhlík, Luboš
This paper describes a microcompression test of Al - 1.5 wt. % Cu thin film deposited on Si substrate. Microcompression combines the sample preparation with the use of ion focused beam (FIB) with a compression test carried out using nanoindenter. Cylindrical specimens (pillars) were prepared using FIB. The diameter of pillars was about 1.3 μm and their height was about 2 μm (equal to the film thickness). Stress-strain curves of the thin film were obtained. The results depend on crystallographic orientation of pillar. The paper is focused to an attempt to determine as precisely as possible Young modulus of the film using experimental data and finite element modelling.
|
|
Aplikace chromatografických metod pro separaci metabolitů cholesterolu
Tetřevová, Lucie ; Nováková, Lucie (vedoucí práce) ; Šatínský, Dalibor (oponent)
Autor: Bc. Lucie Tetrevová Název: Aplikace chromatografických metod pro separaci metabolitu cholesterolu Jazyk: ceský Diplomová práce se zabývá vypracováním a validací analytické metody pro separaci volného a esterifikovaného cholesterolu v krevním séru a v ruzných druzích biologického materiálu. Tato separace je potrebná vzhledem k tomu, že volný a esterifikovaný cholesterol podléhá rozdílnému metabolismu a zavedená metoda umožní studium techto rozdílných metabolických cest pomocí stabilních izotopu. Pro separaci volného a esterifikovaného cholesterolu byla zvolena solid - phase extrakce. Metoda byla optimalizována a validována a bylo dosaženo následujících výsledku: presnost stanovení esteru cholesterolu ve vzorcích krevního séra 2,14%, ve vzorcích homogenátu nadledvin 6,98%, presnost stanovení volného cholesterolu v séru 2,91% a v homogenátu nadledvin 7,48%. Limit detekce byl stanoven 1 μmol/l a limit kvantifikace 5 μmol/l. Linearita v rozsahu koncentrací 1 mmol/l - 25 mmol/l byla u esteru cholesterolu s korelacním koeficientem 0,998, u volného cholesterolu 0,997. Stabilita derivátu byla testována po dobu 30 dnu za teploty 4 řC a - 25 řC, derivát byl stabilní po celou dobu testování pri výše uvedených teplotách. Laboratorní teplota, vzhledem k vysoké tekavosti rozpouštedla derivátu nebyla...
|
|
Plasma-jet systems - experiment and model
Rubovič, Peter ; Kudrna, Pavel (vedoucí práce) ; Hubička, Zdeněk (oponent)
V predloženej práci skúmame prúdenie pracovného plynu systémom s plazmatickou tryskou. V práci je popísaný základný princíp výboja v dutej katóde a jeho technologické využitie, najmä pre potreby nanášania tenkých vrstiev. Jedným z dôležitých parametrov pri nanášaní je rýchlosť, s akou sa pohybuje pracovný plyn a s ním rozprášený materiál terča smerom k substrátu. Kvôli presnosti a reprodukovateľnosti experimentov je nutné poznať vzťahy medzi prúdením pracovného plynu a vonkajšími parametrami experimentu, ako je napríklad prúd pracovného plynu a tlak v komore. Pre tieto účely boli spravené merania rýchlosti iónov pomocou Langmuirovej elektrostatickej sondy pri pulznom pracovnom režime trysky. Namerané údaje sú porovnané s počítačovým modelom, ktorý bol vyvinutý v rámci tejto práce. Tento model popisuje prúdenie pracovného plynu numerickým riešením Navier-Stokesovej rovnice pre stlačiteľné newtonovské tekutiny. Model je porovnaný s publikovanými výsledkami popisujúcimi prúdenie v dutej katóde, pričom je preukázateľná zhoda výsledkov. Výstup modelu ale dáva rozdielne výsledky v porovnaní s nameranými údajmi, ktoré pochádzajú z oblasti mimo katódu. Súčasťou popisu modelu je diskusia závislosti prúdenia na teplote.
|
|
Analýza vnitřního prostředí vybrané organizace
KURFIRSTOVÁ, Linda
Cílem mé bakalářské práce je odhalit skutečnosti týkající se současné situace ve vybraném podniku, a sice za pomoci analýzy vnitřního prostředí. Skutečnosti, které byly objeveny, poté poslouží pro návrh optimální strategie a to takové, která společnosti zlepší její silné stránky a naopak eliminuje její slabiny. První provedená analýza byla analýza portfolia, Bostonská matice, která je v praxi často používána právě proto, že nám dá odpověď na otázku, jaké podnikatelské činnosti mají potenciál pro společnost a jaké jsou naopak nevýhodné a jen polykají její zdroje. Díky jejímu provedení můžeme zhodnotit i stávající situaci na trhu a tak provézt případná opatření v oblasti jeho rozvoje a získání tak větších konkurenčních výhod. Analýza podnikových financí je nejčastěji realizována pomocí finanční analýzy a data, která jsou pro vypracování zapotřebí, byla získána z rozvahy a výkazů zisku a ztrát. Ukazatele, které jsem v ní zpracovala, jsou dle metody Rolfa Grünwalda (2007). Jednalo se o ukazatele likvidity, rentability, aktivity a následně i zadluženosti. Poslední vypracovaná metoda je metoda SWOT, která byla provedena na základě identifikovaných silných a slabých stránek podniku a jejích příležitostí a ohrožení. Z nich byly vybrány jen některé faktory, které jsou použity pro sestavení Fullerova trojúhelníku, díky kterému jsem mohla vypočíst váhy jednotlivých faktorů a nalézt tak pozici v matici SWOT, ve které se společnost nachází. Bostonská matice objevila, že si firma oproti svému nejsilnějšímu konkurentovi nestojí špatně. Jen je zapotřebí, aby se zaměřila na zapojení takového materiálu, který jí zajistí stálé zisky. Tedy takového, který se v matici bude objevovat na pozici dojné krávy. Finanční analýza zjistila některé problémy v oblasti schopnosti dostát svým závazkům, a proto by se společnost měla na tuto situaci zaměřit. Dále je až příliš závislá na cizích zdrojích, což jí v případě budoucí potřeby získání finančních zdrojů moc nepřidá. SWOT analýza o podniku vypověděla to, že pokud bude schopen využít silné stránky, kterými disponuje, bude moct odstranit hrozby, kterým musí na trhu čelit a tak se dostat v budoucnu do lepší situace. Pro něho to značí dobrou situaci i právě proto, že se na trhu moc firem s touto strategií nevyskytuje. Mnoho podniků totiž takovými silnými stránkami nedisponuje.
|
|
Nano modification of the W(100)/ZrO electron emitter tip using reactive ion etching
Horáček, Miroslav ; Matějka, František ; Kolařík, Vladimír ; Matějka, Milan ; Urbánek, Michal
The W(100)/ZrO electron emitter tip is typically prepared from a tungsten single-crystal shaft of a diameter of 125 μm using electrochemical anodic etching. In order to prepare an emitter for e-beam writer with a shaped beam it is desirable to etch the tip with a radius around 100 nm. Despite the anodic etching is precisely controlled using dedicated software, the desired final form shape of the emitter tip is not achieved in every case. The correcting anodic etching is not possible due to the technology principle of the etching itself. We present in this contribution the procedure that modifies/repairs the tungsten tip shape in a nanoscale region using a reactive ion etching (RIE) in CF4 + O2 gaseous mix in a barrel type reactor at the radio frequency of 13,56 MHz and the working pressure of 1000 Pa. The change of the geometry after the RIE process is checked using a high resolution scanning electron microscope. The influence of the tip modification of the activated thermal-field W(100)/ZrO electron emitter on its emission characteristics is also presented.
|
|
Identifikace parametrů náhradního zapojení asynchronního motoru
Otýpka, Jan ; Běloušek, Josef (oponent) ; Patočka, Miroslav (vedoucí práce)
V této práci se zabývám řešením identifikace parametrů náhradního zapojení pro asynchronní motor s kotvou nakrátko pomocí -článku, inverzního -článku a T-článku. Aby byla identifikace co nejpřesnější, využívám experimentálních metod, teoretických postupů, štítkových i konstrukčních údajů. V práci jednotlivě rozebírám různé metody identifikace a srovnávám řešení podle konstrukce momentové charakteristiky z těchto zjištěných parametrů. Dále se v práci zabývám srovnáním dvou konstrukčně podobných motorů s kotvou nakrátko o výkonu 2,2kW, 2p = 2 .
|
|
Metabotropic glutamate receptors: mechanism of activation
Hlaváčková, Veronika ; Blahoš, Jaroslav (vedoucí práce) ; Vyklický, Ladislav (oponent) ; Martásek, Pavel (oponent) ; Konvalinka, Jan (oponent)
Any living organism receives constantly many signals that have to be evaluated and weighted to respond in an appropriate way. To perform all functions needed for precise control of homeostasis and for communication with the surrounding environment, signals coming from the outside are recognized and transferred into modulation of intracellular signaling cascades. These mediate response to the extracellular stimulus as well as intercellular communication. Cell communication is mediated by several types of receptors, located either intracellularly (including nuclear receptors) that modulate gene transcription and receptors localized on plasma membrane. Cell membrane receptors are transmembrane proteins that are divided into three superfamilies according to their structure and principles of signal transduction. These are ion channel-linked receptors, enzyme-linked receptors and G-protein-coupled receptors (GPCRs). GPCRs comprise the biggest family of membrane receptors and are one of the largest gene families in general. They are encoded by about 1% of genes in mammals. Many of them bind sensory ligands (rhodopsin, taste and olfactory receptors), but others also recognize ions, amino acids, nucleotides, peptides and large glycoproteins (1). They play a crucial role in such distant physiological functions as...
|
host ::
