|
|
HPLC bioaktivních látek
Lukšanová, Aneta ; Kubíček, Vladimír (vedoucí práce) ; Lázníčková, Alice (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Biofyziky a fyzikální chemie Školitel: Ing. Vladimír Kubíček, CSc. Student: Aneta Lukšanová Název diplomové práce: HPLC bioaktivních látek Diplomová práce popisuje hledání podmínek pro HPLC analýzu midazolamu a jeho dvou metabolitů - 1-hydroxymidazolamu a 4-hydroxy midazolamu, validaci metody a hledání vhodného vnitřního standardu. HPLC analýza probíhala na reverzních fázích, byla použita kolona POROSHELL 120 EC-C18, 3.0 X 100 NM, 2.7 µm a jako mobilní fáze se osvědčila směs tvořená acetonitrilem a roztokem octanu amonného o pH 4.5 v poměru 35/65. Detekce byla provedena diode array detektorem při vlnových délkách 223 a 272 mm. Kolona byla termostatována na 25 řC, čas analýzy byl 10 minut. Rychlost průtoku mobilní fáze byla 0.700 ml/min. Jako vnitřní standard se osvědčil diazepam. Metoda byla validována na základě požadavku zadavatele pro stanovení 1- hydroxymidazolamu a 4-hydroxymidazolamu v potkaní plazmě. V rámci validace byly ověřeny následující parametry: přesnost, správnost, kvantitativní limit, linearita a selektivita.
|
|
|
HPLC bioaktivních látek
Lukšanová, Aneta ; Kubíček, Vladimír (vedoucí práce) ; Lázníčková, Alice (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Biofyziky a fyzikální chemie Školitel: Ing. Vladimír Kubíček, CSc. Student: Aneta Lukšanová Název diplomové práce: HPLC bioaktivních látek Diplomová práce popisuje hledání podmínek pro HPLC analýzu midazolamu a jeho dvou metabolitů - 1-hydroxymidazolamu a 4-hydroxy midazolamu, validaci metody a hledání vhodného vnitřního standardu. HPLC analýza probíhala na reverzních fázích, byla použita kolona POROSHELL 120 EC-C18, 3.0 X 100 NM, 2.7 µm a jako mobilní fáze se osvědčila směs tvořená acetonitrilem a roztokem octanu amonného o pH 4.5 v poměru 35/65. Detekce byla provedena diode array detektorem při vlnových délkách 223 a 272 mm. Kolona byla termostatována na 25 řC, čas analýzy byl 10 minut. Rychlost průtoku mobilní fáze byla 0.700 ml/min. Jako vnitřní standard se osvědčil diazepam. Metoda byla validována na základě požadavku zadavatele pro stanovení 1- hydroxymidazolamu a 4-hydroxymidazolamu v potkaní plazmě. V rámci validace byly ověřeny následující parametry: přesnost, správnost, kvantitativní limit, linearita a selektivita.
|
|
|
Vliv elektrolytů na CMC
Šmerdová, Jana ; Kubíček, Vladimír (vedoucí práce) ; Lázníčková, Alice (oponent)
Souhrn V této diplomové práci bylo použito UV-VIS absorpční spektrofotometrie k měření CMC katonických tenzidů a vlivu elektrolytů na CMC. Dosažené výsledky potvrzují očekávaný trend poklesu hodnot CMC tenzidů se stoupající iontovou silou roztoků. Použitá modifikace metody UV-VIS absorpční spektrofotometrie pro stanovení CMC byla rovněž úspěšná.
|
|
|
Studium radioaktivního značení receptorově-specifického peptidu ze skupiny derivátů gastrinu I
Zeithamová, Jana ; Lázníčková, Alice (vedoucí práce) ; Kubíček, Vladimír (oponent)
Tato práce se zabývá studiem radioaktivního značení minigastrinů pomocí izotopu 111 In. K experimentálním účelům byly použity minigastriny 46, 47 a 48 lišící se sekvencí aminokyselin. Byla zkoumána především radiochemická čistota po označení 111 InCl3, jelikož tento parametr je velmi důležitý pro další možné použití. Dalším zkoumaným parametrem bylo sledování stability radioaktivně označených minigastrinů. Výsledky byly zjišťovány metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie, která předkládá jasné důkazy o znečištění a o možných rozkladných produktech. Druhou použitou metodou byla instantní tenkovrstvá chromatografie prováděná v několika rozdílných prostředích. Cílem práce bylo zjistit závislost čistoty produktu na čase jak v krátkodobém, tak dlouhodobém časovém intervalu.
|
|
| |
|
| |
|
|
Studium stability monoklonální protilátky nimotuzumab modifikované chelátorem DOTA radioaktivně značené luteciem-177 ([177Lu]Lu-hR3(p-SCN-Bn)DOTA)
Petřík, Michal ; Lázníčková, Alice (vedoucí práce) ; Kubíček, Vladimír (oponent)
Zvýšená exprese genu pro receptor epidermálního růstového faktoru (EGF) a tím zvýšený počet receptorů (EGFR) na povrchu buněk úzce souvisí s nádorovým bujením těchto buněk a s nepříznivou prognózou pro pacienty s rakovinou. Z tohoto důvodu se EGFR staly jedním z hlavních terčů v terapii nádorů. Nimotuzumab (také známý jako h-R3) je humanizovaná monoklonální protilátka, která blokuje receptor pro epidermální růstový faktor. Předmětem této práce bylo stanovení radiochemické čistoty této protilátky konjugované s bifunkčním chelátorem DOTA a označené pomocí luthecia, případně její přečištění, a dále stanovení její stability v různých prostředích, v acetátovém pufru pH = 7, v prostředí nadbytku konkurenčního ligandu EDTA a v potkaní plazmě. Pro tyto úkoly byly použity vhodné analytické metody: vysokoúčinná kapalinová chromatografie, gelová permeační chromatografie a chromatografie na tenké vrstvě. Výsledky práce ukázaly, že tento způsob modifikace pro radioaktivní značení není vhodný pro velké bílkovinné struktury jako je Nimotuzumab.
|
|
|
HPLC analýzy anthelmintik s využitím core-shell kolon
Marková, Jitka ; Kubíček, Vladimír (vedoucí práce) ; Lázníčková, Alice (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie Kandidát: Jitka Marková Konzultant: Ing. Vladimír Kubíček, CSc. Název diplomové práce: HPLC analýzy anthelmintik s využitím core-shell kolon Tato diplomová práce se zabývá HPLC analýzou tří anthelmintik ze skupiny AAD (amino acetonitrile derivatives). V práci byly hledány vhodné separační podmínky na třech core-shell kolonách (Ascentis Express RP - Amide, Ascentis Express F5 a Kinetex PFP). Následně byla testována účinnost dvou metod úpravy vzorků před analýzou, SPE a LLE. Z výsledků práce vyplývá, že kolona Ascentis Express RP-Amide je kolonou vhodnou k danému účelu. Navržené mobilní fáze jsou kompatibilní s případnou MS detekcí. Pro SPE je nejlepší volbou kolonka STRATA X, na níž bylo dosaženo velmi vysokých výtěžností. Výtěžnost LLE je možné označit za uspokojivou.
|
|
|
Oligosacharidy hyaluronanu a jejich biologická funkce
Kučerová, Barbora ; Lázníčková, Alice (vedoucí práce) ; Netopilová, Miloslava (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra fyziky a fyzikální chemie Kandidát: Bc. Barbora Kučerová Školitel: Doc. Ing. Alice Lázníčková, CSc. Název diplomové práce: Oligosacharidy hyaluronanu a jejich biologická funkce Ve své kompilační diplomové práci shromažďuji informace o oligosacharidech hyaluronanu. Přestože se hyaluronan v těle nachází většinou v dlouhých řetězcích, můžeme ho zde nalézt i ve formě malých fragmentů - oligosacharidů. Tyto oligosacharidy vykazují jiné vlastnosti než hyaluronanové polymery. Oligosacharidy hyaluronanu lze v laboratoři připravovat, separovat a analyzovat různými metodami. Velké molekuly lze rozbít na fragmenty chemickými, fyzikálními či enzymatickými způsoby. K následné separaci a purifikaci se využívají především chromatografické metody. Pro konečnou analýzu se jako nejvhodnější ukázaly elektroforetické metody či hmotnostní spektrometrie. V těle probíhá neustálý metabolizmus hyaluronanu. Syntézy se účastní hyaluronan syntáza a pro člověka důležitou biodegradaci obstarává několik druhů hyaluronidáz. Na interakci hyaluronanu s buňkami se podílí různé receptory. Specifický receptor pro hyaluronan je CD44, který váže jak velké polymery, tak oligosacharidy o více než čtyřech jednotkách. V těle jsou však přítomny i další receptory...
|
|
|
Study of radiolabeling of chemically modified bombesines
Saranti, Evangelia ; Lázníčková, Alice (vedoucí práce) ; Kubíček, Vladimír (oponent)
STUDIUM RADIOAKTIVNÍHO ZNAČENÍ CHEMICKY MODIFIKOVANÝCH BOMBESINŮ Diplomová práce Evangelia Saranti Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie Úkolem této práce bylo stadium radioaktivního značení nového receptorově-specifického peptidu DOTA-Lys3-bombesinu terapeutických radionuklidem Lu-177 a stanovit stabilitu značeného produktu. Nalezené optimální podmínky značení tohoto peptidu jsou tyto: pH 5.0 a inkubace při 42řC po dobu 35-40 minut. Za těchto podmínek byla dosažená radiochemická čistota dostatečná pro biologické testování (vyšší než 97%). Byla testována stabilita značeného produktu uchovaného při 4řC a v přítomnosti řádově vyšších koncentrací kompetitivních ligandů EDTA a DTPA. Peptid uchovaný v lednici byl stabilní minimálně čtyři hodiny od přípravy, studium stability v přítomnosti kompetitivních ligandů ukázalo dobrou stabilitu DOTA-komplexu s luteciem-177. Srovnání metod pro určení radiochemické čistoty značeného peptidu ukázalo větší spolehlivost HPLC analýzy ve srovnání s tenkovrstvou chromatografií.
|
host ::
RSS.