|
Analýza a fytoextrakce fluoxetinu ve vodním ekosystému
Rathouská, Lubomíra ; Jelínek, Ivan (vedoucí práce) ; Soudek, Petr (oponent)
V centru zájmu ekochemických studií je v současné době environmentální atak residuí farmak z různých farmakoterapeutických skupin. Výzkumné aktivity se soustřeďují na možnost analýz a odstranění či snížení koncentrace těchto vysoce biologicky aktivních látek v ekosystému. V práci byla studována možnost zakoncentrování vzorků antidepresiva fluoxetinu z různých analytických matric, srovnány vlastnosti dvou nejčastěji používaných SPE materiálů reversní fáze (Varian) a kopolymerní fáze divinylbenzen-N-vinylpyrrolidon (Oasis HLB, Waters) a testovány možnosti fytoextrakce fluoxetinu rostlinami slunečnice roční a kukuřice v modelovém systému. Jako nejvhodnější pro praktické účely se ukázaly kolony Oasis Hlb s následnou elucí acetonem, které dovolují trojnásobné použití. Z hlediska fytoextrakce byly získány pozitivní výsledky. Účinnost fytoextrakce slunečnicí roční je 30-40 % během pětidenní kultivace, ve stejném časovém úseku dochází u kukuřice k poklesu o 20 %. Výsledky ukazují, že fluoxetin může být extrahován z vodného roztoku, byť účinnost je při srovnání s jinými farmaky o něco nižší.
|
|
Detekce mikroorganismů v půdě metodou CARD-FISH (Catalyzed Reporter Deposition - Fluorescence in situ Hybridization)
Krištůfek, Václav ; Kasalický, Vojtěch ; Chroňáková, Alica ; Elhottová, Dana ; Němec, Jan
Pro detekci půdních mikroorganismů byla na pracovišti Ústavu půdní biologie zavedena metoda CARD-FISH (Catalyzed Reporter Deposition - Fluorescence in situ Hybridization). CARD-FISH je relativně nová molekulární metoda pro zjištění podílu jednotlivých skupin mikroorganismů pomocí oligonukleotidových sond. Oproti klasické metodě FISH využívá enzymatické aktivity k zesílení signálu a tím umožňuje výrazně kvalitnější detekci mikroorganismů v půdě nebo organických substrátech. Metodou bylo poprvé sledováno složení bakteriálního společenstva datované vrstvy kupy netopýřího guána z jeskyně Domica (NP Slovenský kras). Bylo stanoveno procentické zastoupení těchto skupin mikroorganismů: bakterie (většina bakterií, .i.Planktomycetales, Verrucomicrobiales./i.), archaea, actinobacteria, proteobacteria, .i.Cytophaga-Flavobacter./i.-Bacteroidetes, sfingobacteria.
|
|
Využití NMR při strukturní analýze látek izolovaných z Corydalis cava (Fumariaceae) a Eschscholtzia californica (Papaveraceae)
Dohnalová, Hana ; Kuneš, Jiří (vedoucí práce) ; Špulák, Marcel (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra anorganické a organické chemie Kandidát: Mgr. Hana Dohnalová Konzultant: Doc. PharmDr. Jiří Kuneš, CSc. Název rigorózní práce: Využití NMR při strukturní analýze látek izolovaných z Corydalis cava (Fumariaceae) a Eschscholtzia californica (Papaveraceae) Rigorózní práce je věnována určení struktury neznámých látek. Na Katedře farmaceutické botaniky a ekologie Farmaceutické fakulty v Hradci Králové je úspěšně prováděna izolace alkaloidů z rostlin Corydalis cava z čeledi Fumariaceae a Eschscholtzia californica z čeledi Papaveraceae. Byla izolována celá řada alkaloidů různých strukturních typů. Některé z nich byly předány do Laboratoře struktury a interakcí biologicky aktivních molekul s žádostí o určení jejich struktury. Cílem rigorózní práce byla identifikace tří neznámých vzorků pomocí NMR analýzy. U neznámých sloučenin byla na základě provedených NMR experimentů (1 H - NMR, 13 C - NMR, DEPT, ghmbc, ghsqc, ghmqfcops a dpfgnoe) určena jejich struktura. Ta byla u jedné sloučeniny potvrzena na základě srovnání s údaji uvedenými v literatuře. Zbývající sloučeniny dosud v literatuře popsány nebyly. Identifikované sloučeniny patří mezi isochino- linové alkaloidy. Jedná se o 3-(1-(6,7-dimethoxy-3,4-dihydroisochinolin-1-yl)...
|
| |
|
Enzymy kvasinky Candida tropicalis biodegradující fenol
Koubková, Zuzana ; Stiborová, Marie (vedoucí práce) ; Turek, Michal (oponent)
Průmyslové odpadní vody z ropných rafinerií, papíren, mlékáren a továren zpracujících keramiku, textil a plasty obsahují vysoké koncentrace aromatických sloučenin, jež jsou toxické pro živé organismy. Nutná je proto degradace těchto sloučenin v životním prostředí na přijatelné limity. Kvasinka Candida tropicalis je významným zástupcem z říše eukaryotních mikroorganismů schopných utilizace fenolu. V první fázi biodegradace fenolu používá C. tropicalis, pro katalýzu oxidace fenolu na katechol, cytoplasmatickou NADPH-dependentní fenolhydroxylázu. Ve druhé fázi biodegradačního procesu je katechol dále oxidován katechol-1,2-dioxygenázou na kyselinu cis, cis- mukonovou. Předkládaná diplomová práce řešila poznání vlivu iontů těžkých kovů na reakce katalyzované NADPH-dependentní fenolhydroxylázou a katechol-1,2-dioxygenázou kvasinky C. tropicalis. Fenolhydroxyláza byla inhibována ionty měďnatými (CuSO4), až na 10 % aktivity enzymu. Fenolhydroxyláza byla rovněž inhibována ionty olovnatými (na 67 % původní enzymové aktivity). Ostatní testované ionty těžkých kovů (ionty kademnaté, manganaté, železnaté) tento enzym neovlivňovaly. Katechol-1,2-dioxygenáza byla inhibována všemi sloučeninami iontů těžkých kovů testovanými v předkládané diplomové práci, a to octanem olovnatým, chloridem manganatým, síranem...
|
| |
| |
|
Využití NMR při strukturní analýze přírodních látek
Dohnalová, Hana ; Špulák, Marcel (oponent) ; Kuneš, Jiří (vedoucí práce)
Diplomová práce je věnována určení struktury neznámých látek. Na Katedře farmaceutické botaniky a ekologie Farmaceutické fakulty v Hradci Králové byla z rostliny Eschscholtzia californica z čeledi Papaveraceae izolována celá řada alkaloidů. Některé z nich byly předány do Laboratoře struktury a interakcí biologicky aktivních molekul s žádostí o určení jejich struktury. Cílem diplomové práce byla identifikace tří neznámých vzorků pomocí NMR analýzy. U neznámých sloučenin byla na základě provedených NMR experimentů (1 H-NMR, 13 C-NMR, DEPT, ghmqc, ghsqc, ghmqfcops a dpfgnoe) určena jejich struktura. Ta byla potvrzena na základě srovnání s údaji uvedenými v literatuře. Identifikované sloučeniny patří mezi isochinolinové alkaloidy. Jedná se o skulerin a retikulin, třetí sloučenina nebyla v literatuře pojmenována.
|
|
Difúzní parametry mozkové tkáně při ischémii a v průběhu status epilepticus
Šlais, Karel ; Syková, Eva (vedoucí práce) ; Otáhal, Jakub (oponent) ; Rokyta, Richard (oponent) ; Dezortová, Monika (oponent)
Difúze neuroaktivních látek v CNS je ovlivněna velikostí a geometrickým uspořádáním extracelulárního prostoru (ECP). Prokázali jsme změny difúzních parametrů spolu se změnami extracelulárních koncentrací energetických metabolitů a glutamátu u dvou patologických stavů, u kterých dochází k výrazným změnám ve velikosti ECP - u kombinované hypoxie/ischémie a při status epilepticus (SE). Naše práce ukázala časový průběh změn difúzních parametrů i koncentrací glukózy, laktátu, poměru laktát/pyruvát a glutamátu při hypoxii/ischémii i při následném obnovení krevního zásobení. Zjistili jsme, že časový průběh změn velikosti ECP negativně koreloval se změnami v koncentraci extracelulárního glutamátu. Ukázali jsme, že v důsledku snížení velikosti ECP je druhotně zvýšená koncentrace neurotoxických látek, které spolu se zhoršenou difúzí látek v ECP při cytotoxickém edému zřejmě prohlubují funkční poruchu a následně i strukturální poškození mozku. V modelu pilokarpinem vyvolaného SE naše výsledky detailně ukazují změny velikosti difúzních parametrů, extracelulární koncentrace K+, energetických metabolitů a glutamátu před začátkem, při zahájení i během prvních hodin šíření SE. Ukázali jsme, že zvýšení neuronální aktivity působením pilokarpinu zvýší vyplavování K+ do ECP a vede k zmenšení velikosti ECP. Ukázali jsme, že...
|
|
Fytochemický výzkum Evolvulus alsinoides IV
Svačinová, Jana ; Karlíčková, Jana (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
SOUHRN Provedla jsem výzkum petroletherového extraktu Evolvulus alsinoides L. Sloupcovou chromatografií jsem získala celkem 113 frakcí, z nichž pro další výzkum jsem zvolila frakce 3-4, 5-7, 15-16, 17, 36-40, které se jevily jako perspektivní. Sumární petroletherový (Pe) extrakt byl podroben testování na akutní toxicitu. Test akutní toxicity nebylo možno s extraktem adekvátně provést, jelikož podmínkou jeho provedení je rozpustnost vzorku ve vodě. U emulze Pe extraktu s vodou byl výsledek negativní. Pe extrakt vykazoval slabou antioxidační aktivitu. Výsledky testování na antioxidační aktivitu mohly být zkresleny vzhledem k malé rozpustnosti extraktu v použitém rozpouštědle. Z frakce 3-4 (1,3244 g) bylo získáno 0,02 g čistých krystalů bílé barvy a voskovité konzistence s teplotou tání 58-82 řC, které byly dle provedené TLC pravděpodobně směsí tří látek. Srovnávací TLC ukázala, že se nejednalo o kyselinu palmitovou a stearovou. Pomocí GC/MS bylo zjištěno, že krystalický podíl frakce 3-4 představuje směs látek. Jedná se o kyselinu 8-methyldekanovou, kyselinu olejovou, alifatický uhlovodík a polynenasycené mastné kyseliny, které nebylo možno pro jejich malé množství blíže specifikovat. Stanovení antioxidační aktivity u krystalického podílu frakce 3-4 bylo negativní. Frakce 5-7 (2,7028 g) poskytla 0,0052 g...
|
host ::
