|
|
Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita VIII.
Hojgrová, Veronika ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Šafratová, Marcela (oponent)
V. Hojgrová: Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita VIII. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky. Počet stran 69. Tato diplomová práce se zabývá izolací alkaloidů z Vinca minor L. z čeledi Apocynaceae. Separace alkaloidů z vybrané frakce (VM 215-258), respektive z jejich podfrakcí (VM 34-41, VM 86, VM 87-113) probíhala pomocí preparativní TLC. Podařilo se izolovat dva čisté alkaloidy z podfrakce (VH 34-41). První alkaloid VH-1, který nebyl doposud izolován a druhý alkaloid VH-2: (-)-raukubainin. Alkaloidy byly identifikovány na základě EI-MS, LC-MS, NMR a optické otáčivosti a byly porovnány s daty v odborné literatuře. Izolované alkaloidy byly testovány na inhibiční aktivitu vůči acetylcholinesterase (AChE), butyrylcholinesterase (BuChE) a prolyloligopeptidase (POP) a na cytotoxicitu. Obě látky nevykazovaly po změření významnou cholinesterasovou inhibiční aktivitu IC50 vůči AChE, vůči BuChE vykazoval mírnou aktivitu pouze (-)-raukubainin (IC50 = 94 ± 7 μM), VH-1 byl shledán jako neaktivní (IC50 >100 μM). Inhibiční aktivita vůči POP byla testována zatím pouze u (-)-raukubaininu; byl shledán neaktivním (IC50 > 1000 µM). Výsledky cytotoxické aktivity alkaloidů (-)-raukubaininu a VH-1 v době odevzdávání této diplomové...
|
|
|
Vinca minor L. alkaloids and their biological activity II.
Pavuková, Simona ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Hradiská Breiterová, Kateřina (oponent)
Pavuková, S.: Alkaloidy Vinca minor L. a ich biologická aktivita II. Diplomová práca, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutickej botaniky, Hradec Králové 2021. Vinca minor L. je druh kvitnúceho polokru, pôvodom hlavne zo strednej a južnej Európy, ktorý obsahuje viac než 50 indolových alkaloidov. Pri screeningu potenciálnych rastlinných inhibítorov namierených proti ľudskej AChE a BuChE, preukázal alkaloidný extrakt zo sušených nadzemných častí Vinca minor silnú a selektívnu inhibičnú aktivitu namierenú voči BuChE s hodnotou IC50 13,60 ± 0,83 µg/ml avšak proti AChE bol neaktívny (hodnota IC50 >100 µg/ml). Vybraná frakcia VM 323 - 327 (4,72 g) bola rozdelená pomocou stĺpcovej chromatografie na silikagelu stupňovitou elúciou za použitia chloroformu a etanolu a celkovo sa získalo 7 spojených frakcií. Opakovaná preparatívna TLC na silikagelu viedla k izolácii troch zlúčenín; novo vyizolovanej látky SP-1, (-)-pikrininu (SP-2) a deacetylakuammilinu (SP-3). K objasneniu ich štruktúry bola použitá hmotnostná spektrometria (ESI), NMR a optická otáčavosť. Izolované alkaloidy boli podrobené testom inhibičných aktivít voči AChE, BuChE, POP a GSK-3β, ezýmom zohrávajúcim dôležitú úlohu v patofyziológii AD. Ukázalo sa, že všetky izolované látky boli v porovnaní so štandardmi...
|
|
|
Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita III.
Valová, Dominika ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Breiterová, Kateřina (oponent)
Valová, D.: Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita III. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2020, 75 s. Alzheimerova choroba (AD) je progresivní neurodegenerativní onemocnění a je nejčastější formou demence. Vzhledem k tomu, že tuto chorobu zatím nelze kauzálně léčit, je důležitý výzkum nových látek. Tato práce se zaměřila na izolaci alkaloidů z extraktu Vinca minor L. jako potenciálního léčiva. Příprava a sloupcová chromatografie sumárního extraktu byla provedena Ing. Miroslavem Ločárkem v rámci jeho doktorského studia. Následná preparativní TLC vedla k izolaci tří sloučenin. Chemické struktury izolovaných alkaloidů byly objasněny optickou otáčivostí, NMR a MS analýzou a porovnáním získaných dat s údaji v literatuře. Jedna ze sloučenin byla stanovena jako (-)-vincin, zbylé 2 sloučeniny jsou nové (nebyly dosud izolované). Tyto sloučeniny byly také testovány na jejich biologickou aktivitu. Vincin, DV-1 a DV-3 byly testovány na schopnost inhibovat acetylcholinesterasu (AChE) a butyrylcholinesterasu (BuChE). Dále byla také testována inhibiční aktivita vincinu a DV-3 vůči prolyl oligopeptidase (POP) a glykogensyntase kinase 3β (GSK-3β). Všechny izolované alkaloidy byly téměř neaktivní vůči AChE a...
|
|
|
Alkaloidy Centaurea cyanus L. (Asteraceae) a jejich biologická aktivita vztažená k Alzheimerově chorobě
Drabbová, Adriana ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Drabbová, A.: Alkaloidy Centaurea cyanus L. (Asteraceae) a jejich biologická aktivita vztažená k Alzheimerově chorobě. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2020 Z nažek Centaurea cyanus L. byly připraveny ethyl-acetátové a chloroformové alkaloidní extrakty. Z ethyl-acetátového alkaloidního výtřepku byl běžnými chromatografickými metodami (sloupcovou chromatogarfií a preparativní TLC) izolován úplně nový alkaloid AD-1 (Adrabbin). Identifikace alkaloidu byla provedena hmotnostní spektrometrií, NMR analýzou a optickou otáčivostí. Sloučenina AD-1 (Adrabbin) má unikátní indolovou cyklickou strukturu. V rámci diplomové práce byla provedena i LC-MS analýza frakcí získaných flash chromatografií. V těchto frakcích, pozitivně reagujících s Dragendorffovým činidlem, byly detekovány látky odpovídající molekulovým hmotnostem alkaloidů dříve izolovaných z nažek některých druhů rodu Centaurea L. Alkaloid AD-1 (Adrabbin) byl testován na inhibici lidských cholinesteras a prolyloligopeptidasy. Vůči lidským cholinesterasám je látka považována za neaktivní (IC50 > 100 µM), prolyloligopeptidasu alkaloid AD-1 (Adrabbin) inhiboval srovnatelným způsobem jako známý inhibitor berberin (AD-1: IC50 143,0 ± 6,0 µM; berberin: IC50 142,0 ±...
|
|
|
Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita I.
Jurkaninová, Martina ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
8 ABSTRAKT Jurkaninová, M.: Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita I. Diplomová práca, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutickej botaniky, Hradec Králové 2019, Cieľom tejto diplomovej práce bola izolácia alkaloidov z vybranej podfrakcie č.3 (15-36), ktorá bola súčasťou frakcie VM 323-327. Tá bola získaná z predošlého spracovania alkaloidného extraktu z Vinca minor L. na našej katedre v rámci vypracovania diplomovej práce Anety Vítovcovej.[78] Frakcia VM 323-327 bola separovaná stĺpcovou chromatografiou na silikagéle a bolo získaných celkom 7 podfrakcií. Následné opakované spracovanie vybranej podfrakcie č.3 (15-36) preparatívnou TLC na silikagéle viedlo k izolácii alkaloidov (-)-vinoxínu a jeho racemátu (±)- vinoxínu. Identifikácia štruktúry bola určená na základe MS, NMR a optickej otáčavosti. U izolovaných látok bola stanovená inhibičná aktivita voči acetylcholínesteráze, butyrylcholínesteráze a prolyl oligopeptidáze. Inhibičná aktivita voči vybraným enzýmom bola meraná spektrofotometrickými metódami. Izolované alkaloidy boli voči AChE a POP požadované ako neaktívne (IC50 >1000 μM), voči BChE vykazovali signifikantnú selektívnu aktivitu (-)-vinoxín (IC50 =24,61 ± 1,71) a (±)-vinoxín (IC50 =27,39 ± 4,87). Tieto látky by sa mohli potencionálne uplatniť...
|
|
|
Alkaloidy Papaver rhoeas L. (Papaveraceae) a jejich biologická aktivita vztažená k Alzheimerově chorobě II.
Čakurdová, Marta ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Hošťálková, Anna (oponent)
Čakurdová, M.: Alkaloidy Papaver rhoeas L. (Papaveraceae) a jejich biologická aktivita vztažená k Alzheimerovej chorobě II. Diplomová práca, Univerzita Karlova v Prahe, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutickej botaniky a ekológie, Hradec Králové, 2017. Cieľom tejto práce je izolácia alkaloidov z frakcie 20-27, ktorá bola získaná zo sumárneho alkaloidného extraktu Papaver rhoeas L. (Papaveraceae). Následne ich identifikácia pomocou štruktúrnej analýzy NMR, GC-MS, optickej otáčavosti a teploty topenia. Pomocou chromatografických metód boli izolované 2 alkaloidy (-)-stylopin a (+)-rhoeadin. U izolovaných látok bola stanovená ich inhibičná aktivita voči acetylcholínesteráze, butyrylcholínesteráze a prolyloligopeptidáze. Získané hodnoty boli stanovené ako IC50: (-)- stylopin (IC50 AChE = 522 ± 67 µM, IC50 BuChE = >1000 µM, IC50 POP = >790 µM); (+)-rhoeadin (IC50 AChE = 915 ± 64 µM, IC50 BuChE = >1000 µM, IC50 POP = >790 µM). Žiadna z izolovaných látok nevykazovala lepšiu inhibičnú aktivitu voči AChE a BuChE v porovnaní s galanthaminom (IC50 AChE = 1,71± 0,065 µM, IC50 BuChE =42,30 ± 1,30 µM), huperzinom A (IC50 AChE = 0,033 ± 0,001 µM, IC50 BuChE = >1000 µM) a rivastigminom (IC50 AChE = 0,037 ± 0,001 µM, IC50 BuChE = 0,0033 ± 0,0003 µM). Pri testovaní inhibičnej aktivity voči POP...
|
|
|
Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Argemone grandiflora (Papaveraceae)II.
Michal, Vojtěch ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Ločárek, Miroslav (oponent)
Michal, Vojtěch: STUDIUM BIOLOGICKÉ AKTIVITY ALKALOIDŮ IZOLOVANÝCH Z ARGEMONE GRANDIFLORA (PAPAVERACEAE) II. Diplomová práce 2015. Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie. Vedoucí práce: PharmDr. Jakub Chlebek, PhD. Klíčová slova: Argemone grandiflora Sweet, Papaveraceae, alkaloidy, izolace, acetylcholinesterasa, butyrylcholinesterasa, prolyloligopeptidasa, Alzheimerova choroba, in vitro assay. Diethyletherový alkaloidní extrakt získaný z natě a kořenů Argemone grandiflora Sweet byl chromatograficky zpracován. Za použití běžných chromatografických metod byly získány tři alkaloidy v čisté podobě. Tyto látky byly určeny jako allokryptopin, (-)-munitagin a (-)-norargemonin pomocí strukturálních analytických metod (MS, NMR). U těchto získaných alkaloidů byla měřena jejich schopnost inhibice acetylcholinesterasy (AChE) a butylcholinestrasy (BuChE), získaných z lidských červených krvinek a plazmy, pomocí Ellmanovy metody. Naměřené hodnoty byly vyjádřeny jako IC50 (allokryptopin: IC50 AChE = 250,0 ± 2,52 μM, IC50 BuChE = 530 ± 28,2 μM; (-)-munitagin: IC50 AChE = 62,29 ± 5,81 μM, IC50 BuChE = 837,4 ± 23,03 μM; (-)-norargemonin: IC50 AChE = 205,17 ± 11,6 μM, IC50 BuChE = 4158,20 ± 495,78 μM). Dále byla měřena inhibice prolyloligopeptidasy...
|
|
|
Alkaloidy Papaver rhoeas L. (Papaveraceae) a jejich biologická aktivita vztažená k Alzheimerově chorobě I.
Bulvová, Leontina ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Bulvová, L.: Alkaloidy Papaver rhoeas L. (Papaveraceae) a jejich biologická aktivita vztažená k Alzheimerově chorobě I. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2017. Cílem této diplomové práce bylo zpracovat sumární alkaloidní extrakt natě Papaver rhoeas L.; pomocí chromatografických metod izolovat přítomné alkaloidy; identifikovat je a stanovit jejich inhibiční aktivitu vůči lidským enzymům acetylcholinesterase, butyrylcholinesterase a prolyloligopeptidase. Celkem byly získány dva alkaloidy, z nichž první byl identifikován jako (+)-rhoeagenin a LB-2, jehož absolutní konfigurace se v současnosti řeší. Testy na biologickou aktivitu těchto alkaloidů přinesly následující výsledky: (+)-rhoeagenin (IC50 AChE ˃ 1000 μM, IC50 BuChE = 230 ± 10 μM, IC50 POP = 878 ± 45 μM) a látka LB-2 (IC50 AChE ˃ 1000 μM, IC50 BuChE = 314 ± 13 μM, IC50 POP = 706 ± 2 μM). Naměřené hodnoty byly porovnány se standardními látkami - cholinesterasovými inhibitory galanthaminem (IC50 AChE = 1,71 ± 0,065 μM, IC50 BuChE = 42,30 ± 1,30 μM), huperzinem A (IC50 AChE = 0,033 ± 0,001 μM, IC50 BuChE > 1000 μM, IC50 POP > 1000 μM) a rivastigminem (IC50 AChE = 0,037 ± 0,001 μM, IC50 BuChE = 0,0033 ± 0,0003 μM); prolyloligopeptidasovými inhibitory...
|
|
|
Alkaloidy Narcissus 'Dutch Master' (Amaryllidaceae) a jejich biologická aktivita III.
Rýdlová, Kateřina ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Cahlíková, Lucie (oponent)
Rýdlová Kateřina: Alkaloidy Narcissus 'Dutch Master' (Amaryllidaceae) a jejich biologická aktivita III. Diplomová práce 2017. Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie. Cílem této práce byla izolace obsahových látek z přidělené frakce ND 3 - 5, která byla připravena sloupcovou chromatografií alkaloidního extraktu z Narcissus 'Dutch Master'. Příprava alkaloidního extraktu a sloupcová chromatografie byla provedena Mgr. Danielou Hulcovou v rámci její doktorské práce. Pomocí sloupcové a preparativní TLC chromatografie byly z frakce ND 3 - 5 získány 2 látky v čistém stavu NDM-1 a NDM-2. Pomocí NMR, GC-MS analýzy, optické otáčivosti a porovnáním získaných údajů s literaturou byly tyto struktury určeny jako (+)-masonin a (+)-homolykorin. Izolované alkaloidy byly následně testovány na inhibiční aktivitu vůči lidské erytrocytární acetylcholinesterase, plazmatické butyrylcholinesterase a prolyloligopeptidase. Aktivita alkaloidů byla vyjádřena jako IC50: (+)-masonin (IC50 AChE = 305 ± 34 μM, IC50 BuChE = 229 ± 24 μM, IC50 POP = 314 ± 34 μM), (+)-homolykorin (IC50 AChE = 63,7 ± 4,3 μM, IC50 BuChE = 151 ± 20 μM, IC50 POP = 173 ± 41 μM). V porovnání se standardy galanthaminem (IC50 AChE = 1,710 ± 0,1 μM, IC50 BuChE = 42,3 ± 1,3 μM), huperzinem A...
|
|
|
Alkaloids from Narcissus pseudonarcissus L. cv. Dutch Master and their cholinesterase and prolyl oligopeptidase inhibitory activity.
Farkašovský, Marek ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Siatka, Tomáš (oponent)
Farkašovský Marek: Alkaloidy Narcissus pseudonarcissus L. cv. Dutch Master a ich cholínesterázová a prolyloligopeptidázová inhibičná aktivita. Rigorózna práca 2017, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutickej botaniky a ekológie. Náplňou tejto práce bola izolácia obsahových látok z frakcie ND 3 - 5/2, získanej stĺpcovou chromatografiou alkaloidného extraktu z Narcissus pseudonarcissus L. cv. Dutch Master. Príprava extraktu a následná stĺpcová chromatografia bola prevedená Mgr. Danielou Hulcovou v rámci jej doktorského štúdia. Pomocou preparatívnej TLC sa z tejto podfrakcie podarilo izolovať dva alkaloidy, ktorých štruktúra bola určená na základe optickej otáčavosti, MS (EI, ESI), 1H NMR a 13C NMR analýz. Výsledky boli porovnané s dostupnou literatúrou. Prvým izolovaným alkaloidom bol O-acetylpluviin, ktorý patrí do skupiny lykorínových alkaloidov. Inhibičná schopnosť vyjadrená v IC50 bola v porovnaní so štandardmi (galantamín, huperzín A, fyzostigmín, berberín a Z-pro-prolinal) nevýznamná. IC50 AChE: 684 ± 54 µM, IC50 BuChE: 603 ± 49 µM, IC50 POP ˃1000 µM. Na základe výsledkov môžeme tvrdiť, že z hľadiska inhibície cholínesteráz a POP sa jedná o neperspektívnu látku. Druhým izolovaným alkaloidom bola zatiaľ nepopísaná látka so systematickým názvom...
|
host ::
RSS.