|
|
Cytotoxická aktivita vybraných kultivarů rodu Narcissus in vitro.
Maršálková, Aneta ; Hradiská Breiterová, Kateřina (vedoucí práce) ; Jošt, Petr (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky (16-16230) Řešitel: Aneta Maršálková Vedoucí práce: PharmDr. Kateřina Hradiská Breiterová, Ph.D. Název práce: Cytotoxická aktivita vybraných kultivarů rodu Narcissus in vitro. Klíčová slova: Narcissus, amarylkovité alkaloidy, cytotoxicita, HepG2 Cílem této práce byl screening sumárních alkaloidních extraktů vybraných kultivarů rodu Narcissus s ohledem na cytotoxickou aktivitu vůči buněčné linii HepG2 karcinomu jater, screening cytotoxické aktivity majoritně zastoupených Amaryllidaceae alkaloidů (AmA), u kterých byla následně stanovena hodnota IC50 a GC-MS a GC-FID kvalitativní a kvantitativní analýza daných extraktů. Pomocí GC-MS analýzy bylo porovnáváním hmotnostních spekter z šesti kultivarů identifikováno celkem 23 alkaloidů, konkrétně 11,12-didehydroanhydrolykorin, 1-O-acetyl-10-norpluviin, 9-O-methylpseudolykorin, anhydropseudolykorin, assoanin, dehydroassoanin, dihydrolykorin, epi-norgalanthamin, galanthamin, galanthin, haemanthamin, hippeastrin, inkartin, karanin, lykoramin, lykoraminon, lykorin, narwedin, norpluviin, pluviin, pseudolykorin, sanguinin, tazettin a několik konkrétněji neurčených alkaloidů homolykorinového strukturního typu. Studované extrakty byly dále podrobeny GC-FID...
|
|
|
Isolation of alkaloids of the species Geissospermum vellosii Allemão and study of their biological activity IV.
Emrichová, Eliška ; Šafratová, Marcela (vedoucí práce) ; Hradiská Breiterová, Kateřina (oponent)
Eliška Emrichová: Izolácia alkaloidov Geissospermum vellosii Alemão a štúdium ich biologickej aktivity IV. Diplomová práca 2020. Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmakognózie Kľúčové slová: Geissospermum vellosii, kôra, alkaloidné extrakty, izolácia alkaloidov, GC/MS analýza, biologická aktivita, acetylcholínesteráza, butyrylcholínesteráza. Hlavným cieľom tejto práce bolo izolovať z extraktu z kôry Geissospermum vellosii Alemão aspoň jeden alkaloid v čistej forme. Celý proces zahŕňal spracovanie kôry, získanie sumárneho a alkaloidného extraktu a následnú stĺpcovú chromatografiu. GV-4, jedna zo 16 získaných frakcií, bola rozdelená na ďalších 5 podfrakcií. GV-4b podfrakcia bola využitá pre izoláciu čistých alkaloidov, spracovaná preparatívnou TLC a kryštalizáciou čistej látky. Štruktúra čistej látky bola stanovená pomocou NMR, GC-MS analýzy a optickej otáčavosti. Látka bola identifikovaná ako anhydropereirín a bola podrobená testovaniu inhibičnej aktivity voči ľudským cholínesterázam, AChE a BuChE. U alkaloidov GV-1-a, GV-8-3-B, GV-9-c, ktoré boli izolované v rámci ďalších prác na extrakte, bola testovaná ich inhibičná aktivita voči GSK-3β a permeabilita HEB s využitím testu PAMPA BBB. Tieto zlúčeniny boli identifikované ako quebrachamín, zmes diastereomérov-...
|
|
|
Indukce oxidačního stresu u buněk kožních keratinocytů
Martínková, Nikola ; Jirkovská, Anna (vedoucí práce) ; Hradiská Breiterová, Kateřina (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Studentka: Nikola Martínková Vedoucí práce: PharmDr. Anna Jirkovská, Ph.D. Konzultant: Mgr. Petr Jošt, Ph.D. Název diplomové práce: Indukce oxidačního stresu u buněk kožních keratinocytů Keratinocyty jsou součástí epidermis a představují majoritní část buněk svrchní vrstvy lidské kůže. Při poškození těchto buněk mutagenními látkami mohou nastat změny ve složení genetického materiálu, popřípadě může dojít i k zániku buňky. Mezi látky, které navozují změny v DNA a mají mutagenní potenciál lze zařadit i zpuchýřující bojovou chemickou látku sirný yperit. Cílem této práce bylo porovnat buněčnou linii keratinocytů HaCaT s experimentálně odvozenou buněčnou linií 3HSM4 v odpovědi na oxidační stres indukovaný peroxidem vodíku. Buňky 3HSM4 byly připraveny selekcí rezistentních klonů buněk HaCaT, které byly opakovaně vystaveny cytotoxickým účinkům sirného yperitu. Výsledky porovnání ukazují, že buňky 3HSM4 jsou rezistentnější vůči peroxidu vodíku. Pokud byla u obou typů buněk blokována syntéza glutathionu (GSH), byl cytotoxický účinek peroxidu vodíku stejný. Přesto, že se buňky 3HSM4 ukázaly jako odolnější z pohledu cytotoxicity, byla u nich zjištěna mnohem vyšší hladina volných radikálů než u buněk HaCaT. Při analýze...
|
|
|
Izolace alkaloidů druhu Geissospermum vellosii Allemão a studium jejich biologické aktivity VII.
Strašková, Veronika ; Šafratová, Marcela (vedoucí práce) ; Hradiská Breiterová, Kateřina (oponent)
Strašková, V.: Izolace alkaloidů druhu Geissospermum vellosii Allemão a studium jejich biologické aktivity VII. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2023, 75 s. Klíčová slova: Geissospermum vellosii, kůra, alkaloidní extrakty, izolace alkaloidů, GC/MS analýza, biologická aktivita, acetylcholinesterasa, butyrylcholinesterasa. Hlavním cílem diplomové práce byla izolace čistých alkaloidů z kmenové kůry Geissospermum vellosii a otestování jejich biologické aktivity. G. vellosii je jihoamerický strom z čeledi Apocynaceae. V lidovém léčitelství se využívá na různé patologické stavy (např. bakteriální, zánětlivá a plísňová onemocnění). Indolové alkaloidy izolované z kmenové kůry tohoto stromu vykazují významné biologické aktivity jako antineoplastickou, antimalarickou, anticholinesterásovou a další. V této diplomové práci byly pro zpracování vybrány frakce GV-2, GV-7-D a GV-4-F. Frakce byly získány v rámci předchozích diplomových prací z původního alkaloidního extraktu kmenové kůry vykazující zajímavou inhibiční aktivitu vůči AchE a BuChE (AChE: IC50 = 15,19±0,96 µg/ml, BuChE: IC50 = 0,37±0,049 µg/ml). Z frakcí GV-2 a GV-7-D byly s použitím preparativní tenkovrstvé chromatografie získány čtyři alkaloidy:...
|
|
|
Izolace alkaloidů druhu Geissospermum vellosii Allemão a studium jejich biologické aktivity II.
Václavíková, Kateřina ; Šafratová, Marcela (vedoucí práce) ; Hradiská Breiterová, Kateřina (oponent)
Václavíková, K., Izolace alkaloidů druhu Geissospermum vellosii Alemäo a studium jejich biologické aktivity II., Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmakognozie, Hradec Králové 2020. Rod Geissospermum rostoucí v Jižní Americe je významný z fytochemického hlediska pro obsah indolových alkaloidů. Tento jihoamerický strom je v lidovém léčitelství využíván pro léčbu různých onemocnění, mezi něž řadíme například poruchy kognitivních funkcí, malárii, ale i léčbu nádorových onemocnění. Rostlina byla pro další výzkum vybrána na základě screeningové studie, ve které byla zjištěna velice zajímavá aktivita vůči cholinesterasam (IC50 AChE = 10,51 ± 3,03 μg/ml a IC50 BuChE = 0,39 ± 0,057 μg/ml). Cílem diplomové práce bylo získání sumárního extraktu z kůry stromu, jeho následné zpracování, izolace alespoň jednoho alkaloidu v čisté formě a definice jeho struktury. Pomocí chromatografických metod byl alkaloidní extrakt rozdělen na 16 frakcí, které byly dále zpracovány. Samotná izolace jednotlivých alkaloidů probíhala z frakce GV-8, která byla podrobena flash chromatografii a následnému přečištění izolovaných látek pomocí tenkovrstvé chromatografie. Z této frakce byla izolována jedna čistá látka (vellosimin), u které byla pomocí Ellmanovy metody stanovena její...
|
|
|
Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita III.
Valová, Dominika ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Hradiská Breiterová, Kateřina (oponent)
Valová, D.: Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita III. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2020, 75 s. Alzheimerova choroba (AD) je progresivní neurodegenerativní onemocnění a je nejčastější formou demence. Vzhledem k tomu, že tuto chorobu zatím nelze kauzálně léčit, je důležitý výzkum nových látek. Tato práce se zaměřila na izolaci alkaloidů z extraktu Vinca minor L. jako potenciálního léčiva. Příprava a sloupcová chromatografie sumárního extraktu byla provedena Ing. Miroslavem Ločárkem v rámci jeho doktorského studia. Následná preparativní TLC vedla k izolaci tří sloučenin. Chemické struktury izolovaných alkaloidů byly objasněny optickou otáčivostí, NMR a MS analýzou a porovnáním získaných dat s údaji v literatuře. Jedna ze sloučenin byla stanovena jako (-)-vincin, zbylé 2 sloučeniny jsou nové (nebyly dosud izolované). Tyto sloučeniny byly také testovány na jejich biologickou aktivitu. Vincin, DV-1 a DV-3 byly testovány na schopnost inhibovat acetylcholinesterasu (AChE) a butyrylcholinesterasu (BuChE). Dále byla také testována inhibiční aktivita vincinu a DV-3 vůči prolyl oligopeptidase (POP) a glykogensyntase kinase 3β (GSK-3β). Všechny izolované alkaloidy byly téměř neaktivní vůči AChE a...
|
|
|
Isolation of alkaloids of the species Geissospermum vellosii Allemão and study of their biological activity IV.
Emrichová, Eliška ; Šafratová, Marcela (vedoucí práce) ; Hradiská Breiterová, Kateřina (oponent)
Eliška Emrichová: Izolácia alkaloidov Geissospermum vellosii Alemão a štúdium ich biologickej aktivity IV. Diplomová práca 2020. Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmakognózie Kľúčové slová: Geissospermum vellosii, kôra, alkaloidné extrakty, izolácia alkaloidov, GC/MS analýza, biologická aktivita, acetylcholínesteráza, butyrylcholínesteráza. Hlavným cieľom tejto práce bolo izolovať z extraktu z kôry Geissospermum vellosii Alemão aspoň jeden alkaloid v čistej forme. Celý proces zahŕňal spracovanie kôry, získanie sumárneho a alkaloidného extraktu a následnú stĺpcovú chromatografiu. GV-4, jedna zo 16 získaných frakcií, bola rozdelená na ďalších 5 podfrakcií. GV-4b podfrakcia bola využitá pre izoláciu čistých alkaloidov, spracovaná preparatívnou TLC a kryštalizáciou čistej látky. Štruktúra čistej látky bola stanovená pomocou NMR, GC-MS analýzy a optickej otáčavosti. Látka bola identifikovaná ako anhydropereirín a bola podrobená testovaniu inhibičnej aktivity voči ľudským cholínesterázam, AChE a BuChE. U alkaloidov GV-1-a, GV-8-3-B, GV-9-c, ktoré boli izolované v rámci ďalších prác na extrakte, bola testovaná ich inhibičná aktivita voči GSK-3β a permeabilita HEB s využitím testu PAMPA BBB. Tieto zlúčeniny boli identifikované ako quebrachamín, zmes diastereomérov-...
|
|
|
Izolace alkaloidů z Hippeastrum ferrari a jejich biologická aktivita
Buchalová, Tereza ; Suchánková, Daniela (vedoucí práce) ; Hradiská Breiterová, Kateřina (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky Kandidát: Tereza Buchalová Školitel: PharmDr. Daniela Hulcová, Ph.D. Název diplomové práce: Izolace alkaloidů z Hippeastrum cv. Ferrari a jejich biologická aktivita Mnoho různých druhů, odrůd a kultivarů rodu Hippeastrum patří mezi oblíbené okrasné rostliny, zároveň ale představují bohatý zdroj důležitých sekundárních metabolitů nazývaných Amaryllidaceae alkaloidy. Tyto strukturně unikátní sloučeniny jsou známé pro své široké spektrum biologických aktivit, jako jsou protinádorová, antivirová a inhibiční aktivita proti acetylcholinesterase (AchE) a butyrylcholinesterase (BchE), které představují důležitou součást léčby Alzheimerovy choroby (AD). AD je neurodegenerativní onemocnění, které je označováno za jednu z nejčastějších příčin demence na světě. Deficit neurotransmiteru acetylcholinu (ACh) v mozku se podílí na rozvoji AD, má totiž za následek poškození cholinergních funkcí, a to je zodpovědné za ztrátu paměti a změny chování. AchE a BchE jsou enzymy podílející se na ukončení impulsního přenosu rychlou hydrolýzou ACh. Proto jsou inhibitory AchE a BchE v dnešní době nejdůležitějším cílem v léčbě AD. Etanolický extrakt byl získán z 25 kg čerstvých cibulí Hippeastrum cv. Ferrari. Tento extrakt...
|
|
|
Alkaloids of Papaver rhoeas L. (Papaveraceae) and their biological activity related to Alzheimerʼs disease IV.
Gergely, Eszter ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Hradiská Breiterová, Kateřina (oponent)
Gergely, E.: Alkaloidy Papaver rhoeas L. (Papaveraceae) a ich biologická aktivita vzťahujúca sa na Alzheimerovu chorobu IV. Diplomová práca, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2022, počet strán 61. Spojený chloroformový alkaloidový extrakt vňate Papaver rhoeas L. (Papaveraceae) vykazoval významnú inhibičnú aktivitu voči ľudskej butyrylcholínesteráze (IC50hBuChE = 3,94 ± 0,35 µg/ml) [1,2]. hBuChE je jedným z kľúčových enzýmov hrajúcich rolu v patogenéze Alzheimerovej choroby. Hlavnými cieľmi tejto práce bola izolácia čistých alkaloidov pomocou tzv. bio-guided assay, využitím flash chromatografie a preparatívnej TLC, objasnenie ich štruktúr (pomocou MS, NMR a optickou otáčavosťou) a určenie ich biologickej aktivity pomocou Ellmanovej spektrofotometrickej metódy. Bola vypočítaná pravdepodobnosť prechodu izolovaných molekúl cez hematoencefalickú bariéru (HEB) pomocou logBB. Potenciálna cytotoxicita najaktívnejšej molekuly bola preverená na deviatich rakovinových bunkových líniách a jednej nerakovinovej línii MRC-5. Izolovaný identifikovaný alkaloid (+)-kaverín vykazoval sľubnú selektívnu inhibičnú aktivitu voči hBuChE (IC50hBuChE = 4,09 ± 0,50 µM a IC50hAChE > 100 µM) a mal by ochotne prechádzať pasívnou difúziou...
|
|
|
Alkaloidy kultivarů rodu Narcissus a jejich biologická aktivita III.
Kahovcová, Anna ; Hradiská Breiterová, Kateřina (vedoucí práce) ; Suchánková, Daniela (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky Řešitel: Kahovcová Anna Školitel: PharmDr. Kateřina Hradiská Breiterová, PhD. Název práce: Alkaloidy kultivarů rodu Narcissus a jejich biologická aktivita III. Klíčová slova: Narcissus, alkaloidy, biologická aktivita, Alzheimerova choroba, cytotoxicita Hlavní náplň této diplomové práce spočívala v přípravě sumárních alkaloidních extraktů z cibulí kultivarů rodu Narcissus L., konkrétně ze sedmi kultivarů Narcissus cv. MONDRAGON, RIP VAN WINKLE, SAGITTA, CHEERFULNESS, DOUBLE FASHION, PRECOCIOUS a FLOWER DRIFT, se kterými se pracovalo pod označeními AL-458, AL-575, AL-443, AL-466, AL-549, AL-545 a AL- 546. Z těchto sumárních extraktů byly následně připraveny vzorky pro GC-MS analýzu a screeningové stanovení biologických aktivit, konkrétně schopnosti inhibice lidských cholinesteras hAChE a hBuChE a cytotoxicity. Pomocí GC-MS analýzy se podařilo identifikovat celkem 20 alkaloidů pomocí porovnání jejich hmotnostních spekter s literaturou či knihovnou NIST. Mezi identifikované alkaloidy patří lykorin, lykoramin, lykoraminon, anhydrolykorin, pankracin, karanin, O-acetyllykorin, pluvin, norpluvin, assoanin, hemantamin, galantin, inkartin, O-methylpseudolykorin, hippeastrin, 8-O-demethylmaritidin,...
|
host ::
RSS.