|
|
Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin I. Alkaloidy Narcissus jonquilla L.
Nováková, Dana ; Ločárek, Miroslav (vedoucí práce) ; Chlebek, Jakub (oponent)
Nováková D.: Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin I. Alkaloidy Narcissus jonquilla L. Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra Farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2015, 70 s. Předmětem diplomové práce byla příprava alkaloidního extraktu, za účelem identifikace alkaloidních obsahových látek a stanovení inhibičních aktivit. Tato aktivita má využití v léčbě Alzheimerovy nemoci. Alkaloidní extrakty ze sedmi variet (Sundial, Sundisc, Sweetness, Waterperry, Simplex, Twinkling Yellow, Yazz) rostliny Narcissus jonquilla L. (Amaryllidaceae) byly testovány na acetylcholinesterázovou (HuAChE) a butyrylcholinesterázovou (HuBuChE) inhibiční aktivitu a alkaloidní obsahové látky. 23 alkaloidů bylo stanoveno metodou GC/MS a 10 z nich bylo identifikováno pomocí hmotnostního spektra a retenčních časů. Všechny vzorky vykazovaly obsah galanthaminu, většina vzorků obsahovala lykorin a tazettin. Nadějná inhibiční aktivita vůči HuAChE byla prokázána u Narcissus jonquilla L. cv. Waterperry s hodnotami IC50 6,53 ± 0,88 μg/ml. Nejvyšší inhibiční aktivitu proti HuBuChE vykázal extrakt rostliny Narcissus jonquilla L. cv. Sundisc s hodnotou IC50 5,09 ± 0,64 μg/ml. Klíčová slova: Alzheimerova choroba, Amaryllidaceae, narcis, GC/MS, alkaloidy, acetylcholinesteráza,...
|
|
|
Alkaloidy Narcissus 'Dutch 'Master' (Amaryllidaceae) a jejich biologická aktivita. II.
Dvořáková, Zdeňka ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Ločárek, Miroslav (oponent)
Dvořáková Zdeňka: Alkaloidy Narcissus 'Dutch Master' (Amaryllidaceae) a jejich biologická aktivita II. Diplomová práce 2016, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie. Náplní této práce byla izolace obsahových látek z vybrané frakce ND-6 získané sloupcovou chromatografií alkaloidního extraktu z Narcissus 'Dutch Master'. Příprava extraktu a sloupcové chromatografie alkaloidního výtřepku byla provedena Mgr. Danielou Hulcovou v rámci svého doktorského studia. Prostřednictvím preparativní TLC byl získán z vybrané frakce ND-6 alkaloid homolykorinového typu (+)-O-methyllykorenin. Jeho struktura byla určena na základě NMR, GC-MS analýzy a optické otáčivosti. Získaná data byla porovnána s údaji v literatuře. U izolovaného alkaloidu byla stanovena jeho cholinesterasová inhibiční aktivita vůči acetylcholinesterase a butyrylcholinesterase. Jeho inhibiční aktivita byla vyjádřena jako IC50 (M) a porovnána se známými standardy galanthaminem, fysostigminem a huperzinem A. Tento alkaloid je vůči cholinesterasám neaktivní (IC50 AChE > 1000 M, IC50 BChE > 1000 M). Na základě získaných výsledků můžeme říct, že se jedná z hlediska inhibice cholinesteras jako potenciálně nevyužitelný v terapii AD. Klíčová slova: Narcissus 'Dutch Master',...
|
|
|
Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin IV. Alkaloidy Vinca minor L.
Vítovcová, Aneta ; Ločárek, Miroslav (vedoucí práce) ; Chlebek, Jakub (oponent)
Vítovcová, A.: Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin IV. Alkaloidy Vinca minor L. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2016. Extrakt Vinca minor L. byl rozdělen na frakce sloupcovou chromatografií. Flash chromatografie, preparativní TLC a krystalizace vedly k izolaci 2 alkaloidů z frakce č. 2 a č. 5. Alkaloidy byly identifikovány pomocí GC/MS jako (+)-vinkaminorin a vinkorin. Tyto alkaloidy byly testovány na inhibiční aktivitu IC50 vůči cholinesterázám (AChE a BuChE). Získané aktivity IC50 byly porovnávány se standardy (galantamin, huperzin A). Nejzajímavější aktivitu oproti galantaminu (AChE 1,710 ± 0,065 µM, BuChE 42,30 ± 1,30 µM) a huperzinu A (AChE 0,033 ± 0,001 µM, BuChE > 1000 µM) vykazoval vinkorin (AChE > 1000 µM, BuChE 9,75 ± 0,45 µM). Jeho aktivita vůči BuChE je vyšší, než aktivita obou standardů. Inhibiční aktivity (+)-vinkaminorinu (AChE 746,5 ± 84,13 µM, BuChE 684,32 ± 70,66 µM) jsou zanedbatelné. Klíčová slova: Alzheimerova choroba, cholinesteráza, Apocynaceae, Vinca minor L., indolové alkaloidy
|
|
|
Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin VII. Alkaloidy Vinca minor L.
Marečková, Lucie ; Ločárek, Miroslav (vedoucí práce) ; Cahlíková, Lucie (oponent)
Marečková, L.: Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin VII. Alkaloidy Vinca minor L. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2018 Nejprve byl připraven extrakt z nati rostliny Vinca minor L., který se následně dělil pomocí sloupcové chromatografie na jednotlivé frakce. Vybraná frakce byla následně dělena metodou TLC na silikagelu. Byly izolovány dvě látky, které se metodou GC/MS a NMR identifikovaly jako (-)-minovin a (+)-minovincin, a obě látky se následně podrobily zkouškám inhibiční aktivity enzymů lidské acetylcholinesterasy (hemolyzát lidských erytrocytů) a butyrylcholinesterasy (lidská plasma). Jako standardy pro porovnání inhibičních aktivit se použil Galanthamin, Huperzin A a Eserin. (+)-Minovincin nevykazoval významné inhibiční aktivity ani k jednomu z enzymů (IC50 = AChE > 1000 µM, BuChE 655,05 ± 35,37 µM) a není tedy vhodný pro další zkoumání. (-)-Minovin nevykazoval výjimečnou aktivitu vůči AChE (IC50 = 234,27 ± 63,40 µM), aktivita vůči BuChE (IC50 = 26,32 ± 2,52 µM) byla vyšší než u Galanthaminu, ale stále relativně nízká pro další zkoumání. Cílem této práce byl především výběr vhodných alkaloidů Vinca minor L., které by mohly být potenciálně významné v léčbě Alzheimerovy choroby....
|
|
|
Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Argemone grandiflora (Papaveraceae)II.
Michal, Vojtěch ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Ločárek, Miroslav (oponent)
Michal, Vojtěch: STUDIUM BIOLOGICKÉ AKTIVITY ALKALOIDŮ IZOLOVANÝCH Z ARGEMONE GRANDIFLORA (PAPAVERACEAE) II. Diplomová práce 2015. Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie. Vedoucí práce: PharmDr. Jakub Chlebek, PhD. Klíčová slova: Argemone grandiflora Sweet, Papaveraceae, alkaloidy, izolace, acetylcholinesterasa, butyrylcholinesterasa, prolyloligopeptidasa, Alzheimerova choroba, in vitro assay. Diethyletherový alkaloidní extrakt získaný z natě a kořenů Argemone grandiflora Sweet byl chromatograficky zpracován. Za použití běžných chromatografických metod byly získány tři alkaloidy v čisté podobě. Tyto látky byly určeny jako allokryptopin, (-)-munitagin a (-)-norargemonin pomocí strukturálních analytických metod (MS, NMR). U těchto získaných alkaloidů byla měřena jejich schopnost inhibice acetylcholinesterasy (AChE) a butylcholinestrasy (BuChE), získaných z lidských červených krvinek a plazmy, pomocí Ellmanovy metody. Naměřené hodnoty byly vyjádřeny jako IC50 (allokryptopin: IC50 AChE = 250,0 ± 2,52 μM, IC50 BuChE = 530 ± 28,2 μM; (-)-munitagin: IC50 AChE = 62,29 ± 5,81 μM, IC50 BuChE = 837,4 ± 23,03 μM; (-)-norargemonin: IC50 AChE = 205,17 ± 11,6 μM, IC50 BuChE = 4158,20 ± 495,78 μM). Dále byla měřena inhibice prolyloligopeptidasy...
|
|
|
Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin II. Alkaloidy Narcissus jonquilla L.
Jílek, Lukáš ; Ločárek, Miroslav (vedoucí práce) ; Cahlíková, Lucie (oponent)
Jílek L.: Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin II. Alkaloidy Narcissus jonquilla L. Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra Farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2015, 74 s. Předmětem diplomové práce byla příprava alkaloidního extraktu, za účelem identifikace alkaloidních obsahových látek a stanovení inhibičních aktivit. Tato aktivita má využití v léčbě Alzheimerovy nemoci. Alkaloidní extrakty ze sedmi variet (Bella Estrella, Bell Song, Fruit Cup, Hill Star, Chit Chat, Martinette, Dick Sickel) rostliny Narcissus jonquilla L. (Amaryllidaceae) byly testovány na acetylcholinesterázovou (HuAChE) a butyrylcholinesterázovou (HuBuChE) inhibiční aktivitu a alkaloidní obsahové látky. 13 různých alakloidů bylo identifikováno pomocí hmotnostního spektra a retenčních časů. Všechny vzorky vykazovaly obsah tazettinu, většina vzorků obsahovala lykoramin a galanthamin. Nadějná inhibiční aktivita vůči HuAChE byla prokázána u Narcissus jonquilla L. cv. Bell Song s hodnotami IC50 6,19 ± 0,85 μg/ml. Nejvyšší inhibiční aktivitu proti HuBuChE vykázal extrakt rostliny Narcissus jonquilla L. cv. Bella Estrella s hodnotou IC50 18,39 ± 1,51 μg/ml. Klíčová slova: Alzheimerova choroba, Amaryllidaceae, narcis, GC/MS, alkaloidy, acetylcholinesteráza,...
|
|
|
Alkaloidy Narcissus 'Dutch 'Master' (Amaryllidaceae) a jejich biologická aktivita. II.
Dvořáková, Zdeňka ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Ločárek, Miroslav (oponent)
Dvořáková Zdeňka: Alkaloidy Narcissus 'Dutch Master' (Amaryllidaceae) a jejich biologická aktivita II. Diplomová práce 2016, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie. Náplní této práce byla izolace obsahových látek z vybrané frakce ND-6 získané sloupcovou chromatografií alkaloidního extraktu z Narcissus 'Dutch Master'. Příprava extraktu a sloupcové chromatografie alkaloidního výtřepku byla provedena Mgr. Danielou Hulcovou v rámci svého doktorského studia. Prostřednictvím preparativní TLC byl získán z vybrané frakce ND-6 alkaloid homolykorinového typu (+)-O-methyllykorenin. Jeho struktura byla určena na základě NMR, GC-MS analýzy a optické otáčivosti. Získaná data byla porovnána s údaji v literatuře. U izolovaného alkaloidu byla stanovena jeho cholinesterasová inhibiční aktivita vůči acetylcholinesterase a butyrylcholinesterase. Jeho inhibiční aktivita byla vyjádřena jako IC50 (M) a porovnána se známými standardy galanthaminem, fysostigminem a huperzinem A. Tento alkaloid je vůči cholinesterasám neaktivní (IC50 AChE > 1000 M, IC50 BChE > 1000 M). Na základě získaných výsledků můžeme říct, že se jedná z hlediska inhibice cholinesteras jako potenciálně nevyužitelný v terapii AD. Klíčová slova: Narcissus 'Dutch Master',...
|
|
|
Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin VI. Alkaloidy Vinca minor L.
Kučerová, Jana ; Ločárek, Miroslav (vedoucí práce) ; Cahlíková, Lucie (oponent)
Kučerová, J.: Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin VI. Alkaloidy Vinca minor L. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2016, 67 stran. Byla provedena izolace alkaloidů z extraktu Vinca minor z čeledi Apocynaceae a u získaných jednotlivých látek byla zkoumána jejich schopnost inhibovat lidskou acetylcholinesterázu a butyrylcholinesterázu. Základní extrakt byl po úvodním extrahování 95% ethanolem předčištěn vytřepáním s chloroformem. Tento chloroformový výtřepek byl dále rozdělen pomocí sloupcové chromatografie na celkem 531 frakcí. Získané frakce byly na základě podobnosti zjištěné pomocí tenkovrstvé chromatografie pospojovány na konečný počet 17 frakcí. Mobilní fází pro sloupcovou chromatografii byly směsi chloroformu a lékařského benzínu, chloroformu a ethanolu a na závěr byl použit samotný ethanol. K dalšímu zkoušení byly použity frakce číslo 2 a 5. Z frakce 2 byla pomocí preparativní tenkovrstvé chromatografie a následné krystalizace izolována látka číslo 1. Po analyzování této látky pomocí GC/MS bylo zjištěno, že se jedná o (+)-vincaminorein. Dále byla zjišťována jeho biologická aktivita vůči cholinesterázám, kdy byla zjištěna velmi významná inhibice butyrylcholinesterázy (8,71...
|
|
|
Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin IV. Alkaloidy Vinca minor L.
Vítovcová, Aneta ; Ločárek, Miroslav (vedoucí práce) ; Chlebek, Jakub (oponent)
Vítovcová, A.: Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin IV. Alkaloidy Vinca minor L. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2016. Extrakt Vinca minor L. byl rozdělen na frakce sloupcovou chromatografií. Flash chromatografie, preparativní TLC a krystalizace vedly k izolaci 2 alkaloidů z frakce č. 2 a č. 5. Alkaloidy byly identifikovány pomocí GC/MS jako (+)-vinkaminorin a vinkorin. Tyto alkaloidy byly testovány na inhibiční aktivitu IC50 vůči cholinesterázám (AChE a BuChE). Získané aktivity IC50 byly porovnávány se standardy (galantamin, huperzin A). Nejzajímavější aktivitu oproti galantaminu (AChE 1,710 ± 0,065 µM, BuChE 42,30 ± 1,30 µM) a huperzinu A (AChE 0,033 ± 0,001 µM, BuChE > 1000 µM) vykazoval vinkorin (AChE > 1000 µM, BuChE 9,75 ± 0,45 µM). Jeho aktivita vůči BuChE je vyšší, než aktivita obou standardů. Inhibiční aktivity (+)-vinkaminorinu (AChE 746,5 ± 84,13 µM, BuChE 684,32 ± 70,66 µM) jsou zanedbatelné. Klíčová slova: Alzheimerova choroba, cholinesteráza, Apocynaceae, Vinca minor L., indolové alkaloidy
|
|
|
Neurotropní a antioxidační aktivita vybraných druhů jednoděložných alkaloidních rostlin. VIII.
Breiterová, Kateřina ; Cahlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Ločárek, Miroslav (oponent)
Autor: Kateřina Breiterová Název: Neurotropní a antioxidační aktivita vybraných druhů jednoděložných alkaloidních rostlin. VIII. Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie 2015, 101 s. Více než 50 % všech případů demence je způsobeno Alzheimerovou chorobou (AD). Jedná se o progresivní neurodegenerativní onemocnění působící postupnou ztrátu paměti, poruchy orientace i chování, jež zasahují do pacientova sociálního i pracovního života. AD je charakterictická ztrátou neuronů v určitých oblastech mozku - na příklad v hipokampu či kůře. Etiopatogeneze vzniku AD není ještě zcela známa, proto je léčba pouze symptomatická. Důležitou roli hraje vznik extracelulárních plaků proteinu β amyloidu (Aβ) okolo neuritů, což vede k jejich degeneraci a následné buněčné smrti. Aβ se podporuje vznik volných kyslíkových radikálů, což vede ke smrti neuronů, stejně jako intracelulárně vznikající uzlíky τ proteinu. Dalším z problémů je nerovnováha glutamátergního systému, jehož fyziologická funkce je nezbytná pro správnou tvorbu paměti. U pacientů s AD dochází k přílišné aktivaci tohoto systému, což vede ke vzniku šumů mezi neurony a ztížení přenosu nervového vzruchu, excitotoxicitě a apoptóze neuronů. U pacientů trpících AD je také snížena...
|
host ::
RSS.