|
|
Effect of cadmium chloride on P-glycoprotein in the blood-brain barrier
Zahradníková, Tereza ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Hofman, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Tereza Zahradníková Školitel: Prof. PharmDr. František Štaud, Ph.D. Konzultant: Alexander Zaremba, Institute of Pharmacy and Molecular Biotechnology, Heidelberg University, Německo Název diplomové práce: Vliv chloridu kademnatého na P-glykoprotein v hematoencefalické bariéře Hematoencefalická bariéra (HEB) rozděluje centrální nervový systém (CNS) a periferní krevní oběh. Díky její specializované struktuře a buněčnému uspořádání reguluje transport látek mezi těmito kompartmenty. Endoteliální buňky tvořící HEB jsou charakteristické expresí různých multidrug resistentních proteinů, které patří do rodiny ATP-vázajících transportérů (ABC). Tyto transmembránové ABC exportní proteiny aktivně transportují molekuly z endotelu HEB do krevního řečiště a chrání mozek před škodlivými xenobiotiky, toxiny a metabolity. Na druhou stranu, ABC exportní proteiny představují překážku pro mnoho léčiv, které prostupují HEB do CNS, čímž je omezena účinnost CNS farmakoterapie. Jeden z nejdůležitějších efluxních transportérů je P-glykoprotein (P-gp). Kadmium je těžký kov, který je nebezpečný pro lidské zdraví. Jako průmyslový kontaminant se dostává do životního prostředí a následně do lidského těla...
|
|
|
Interakce antiretrovirotik s lékovými efluxními transportéry a jejich vliv na transplacentární farmakokinetiku
Ptáčková, Zuzana ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Trejtnar, František (oponent) ; Ulčová-Gallová, Zdeňka (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidátka: Mgr. Zuzana Ptáčková Školitel: prof. PharmDr. František Štaud, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Lukáš Červený, Ph.D. Název dizertační práce: Interakce antiretrovirotik s lékovými efluxními transportéry a jejich vliv na transplacentární farmakokinetiku Prevence přenosu viru HIV z matky na dítě je založená na podávání kombinované antiretrovirální léčby a to ideálně po dobu celého těhotenství. Jedním z mechanismů profylaktického působení antiretrovirotik je jejich přítomnost ve fetální cirkulaci, což však může být zároveň spojeno s nepříznivými účinky na vyvíjející se plod. Pro optimalizaci léčebné strategie i minimalizaci rizik spojených s léčbou HIV pozitivních těhotných žen je důležitá podrobná znalost všech faktorů ovlivňujících přestup antiretrovirotik z matky k plodu přes placentární bariéru. Náplní této práce bylo zjistit, zda v transplacentární farmakokinetice vybraných léčiv hrají úlohu lékové efluxní transportéry, o kterých je známo, že svou činností chrání plod před působením cizorodých látek. S pomocí použitých in vitro, in vivo, in situ a ex vivo metodik jsme zhodnotili míru vlivu lékových efluxních transportérů na distribuci vybraných léčiv mezi matkou a plodem. U léčiv zidovudinu,...
|
|
|
Transportní mechanismy xenobiotik (model Caco-2 buněčné monovrstvy) ve vztahu k biofarmaceutickému klasifikačnímu systému (BCS)
Smetanová, Libuše ; Květina, Jaroslav (vedoucí práce) ; Štaud, František (oponent) ; Suchý, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: MUDr. Libuše Smetanová Školitel: Prof. RNDr. Dr.h.c. Jaroslav Květina, DrSc., FCMA Název disertační práce: Transportní mechanismy xenobiotik (model Caco-2 buněčné monovrstvy) ve vztahu k biofarmaceutickému klasifikač- nímu systému (BCS) Současné technologické úrovně umožňují studovat transbariérové transporty xenobiotik (včetně gastrointestinální absorpce) na modelech in vitro, in situ a in vivo. In situ a in vivo modely umožňují posoudit zpětné vazby na orgánové nebo celoorganismové úrovni, in vitro modely eliminují extrabariérové faktory a jsou tak cíleny na mechanismy transportních dějů. Mezi in vitro modely zaměřené na studium mechanismu transportu střevní stěnou patří modely využívající buď buněčné linie (např. Caco-2, MDCK a 2/4/A1 buňky) nebo intestinální tkáň (např. "Ussing" komora). Jedním z relativně nejčastěji používaných in vitro modelů je model Caco-2 buněčné monovrstvy. Caco-2 buňky jsou buněčnou linií odvozenou z kolorektálního adenokarcinomu. Jejich charakteristickým znakem je spontánní diferenciace s vytvořením monovrstvy s plně diferencovanými a polarizovanými buňkami s typickým kartáčovým lemem a těsnými spoji, a to za normálních kultivačních podmínek. Škála jejich...
|
|
|
Cytotoxicita beauvericinu, citrininu, deoxynivalenolu a T-2 toxinu stanovena metodou in vitro v buňkách Vero
Macáková, Petra ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Vopršalová, Marie (oponent)
Mykotoxiny jsou sekundární metabolity plísní. Jimi kontaminované potraviny a krmení jsou velkou hrozbou pro lidské zdraví a dobrý stav chovaného zvířectva. Požití mykotoxinů může způsobit celou řadu závažných zdravotních problémů, od akutní otravy až po dlouhodobé a chronické poruchy zdraví. Nicméně jejich význam z hlediska ovlivnění bezpečné výživy není všeobecně znám, protože existuje jen malé množství informací o vzájemné interakci mykotoxinů a jejich toxicitě. Předpokládá se, že mykotoxiny se stejným mechanismem účinku budou mít aditivní efekt, naopak, některé jejich interakce mohou toxicitu snižovat. Pochopení působení mykotoxinů v in vitro systémech nám může pomoci v předpovídání výsledku jejich vzájemného působení. Cílem této studie bylo získat cytotoxická data (hodnoty EC50) toxinů z rodů Penicillium a Fusarium, jmenovitě mykotoxinů BEA, CIT, DON a T-2 toxinu. Za tímto účelem byla stanovena životaschopnost Vero buněk v přítomnosti těchto čtyř mykotoxinů za použití testu cytotoxicity pomocí neutrální červeně. Všechny testované mykotoxiny snižovaly životaschopnost buněk v závislosti na koncentraci a času inkubace. Jednotlivé mykotoxiny redukovaly životaschopnost Vero buněk v následujícím pořadí: CIT< BEA< DON< T-2 toxin. Abychom otestovaly vzájemné interakce zkoumaných mykotoxinů a jejich...
|
|
|
DIFFERENTIAL RESISTANCE OF MELANOMA TO VINCA - ALKALOIDS
Rozkydalová, Lucie ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Čečková, Martina (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Lucie Rozkydalová Školitel: Prof. PharmDr. František Štaud, PhD. Školitel specialista: Pr. Pierre Cuq PharmD. PhD., Laure-Anaïs Vincent Název práce: Rezistence melanomů k léčbě vinca-alkaloidy Maligní melanom (MM) představuje nejnebezpečnější a velmi agresivní kožní nádor s rychlým rozvojem lékové resistence, která je hlavní překážkou úspěšné léčby MM. Na základě předchozích studií (microarray datová analýza), byl jako jedna z potencionálních příčin selhání léčby vinca alkaloidy (VAs) vybrán gen KIT, který hraje důležitou roli v patofyziologii melanomu. KIT byl zvolen kvůli úplnému potlačení jeho exprese v rezistentních buněčných liniích (CAL1R-VAs) v porovnání s parentálními buňkami (CAL1-wt). Kromě toho KIT také interaguje s proteiny NF-κB a cyklinem D1-2, které jsou zahrnuty v rezistenci melanomu uvnitř molekulární sítě vybudované softwarem IPA. Ačkoliv bylo potvrzeno potlačení exprese genu KIT v rezistentních CAL1R-VAs buněčných liniích (qRT-PCR), represe KIT prostřednictvím siRNA transfekce neukázala žádný efekt na in vitro senzibilitu CAL1-wt buněk k VAs. To značí, že KIT není přímo zahrnut v rezistenci melanomu, ale mohl by být biomarkerem rezistence k VAs. Toto zjištění je potřeba...
|
|
|
Interakce inhibitorů cyklin-dependentních kinas s ABC lékovými transportéry in vitro a in situ
Hofman, Jakub ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Wsól, Vladimír (oponent) ; Kryštof, Vladimír (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Mgr. Jakub Hofman Školitel: Prof. PharmDr. František Štaud, Ph.D. Název dizertační práce: Interakce inhibitorů cyklin-dependentních kináz s ABC lékovými transportéry in vitro a in situ V této práci jsme se zaměřili na studium farmakokinetických interakcí inhibitorů cyklin-dependentních kináz (CDKi) s lékovými efluxními transportéry breast cancer resistance proteinem (BCRP) a P-glykoproteinem (P-gp). Pomocí akumulačních a transportních metod jsme na buněčném modelu MDCKII-ABCG2 prokázali, že purinové CDKi purvalanol A, olomoucin II, bohemin a roskovitin inhibují BCRP. S využitím akumulačních metod a buněk MDCKII-ABCB1 jsme dále ukázali, že purvalanol A silně inhibuje P-gp a částečná inhibice byla zaznamenána i u ostatních studovaných CDKi (olomoucin II, roskovitin, flavopiridol, SNS-032). Stejné buněčné modely jsme použili pro studium substrátové afinity vybraných CDKi a pomocí transportní metody jsme určili olomoucin II jako duální substrát P-gp a BCRP. Substrátová afinita purvalanolu A k P-gp ani k BCRP nebyla prokázána. Tato zjištění jsme potvrdili s využitím stanovení ATPázové aktivity P-gp, které dále odhalilo skutečnost, že roskovitin je substrátem P-gp a flavopiridol a SNS-032...
|
|
|
Investigating the role of zinc transporter ZIP 6 and STAT3 in mitosis
Burgetová, Lenka ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Štaud, František (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Lenka Burgetová Školitel: PharmDr. Martina Čečková PhD. Školitel specialista: Dr. Kathryn Taylor PhD. Název diplomové práce: Studium role zinkového transportéru ZIP 6 a STAT3 v mitóze Bylo prokázáno, že STAT3 (přenašeč signálu a aktivátor transkripce 3) se podílí na vzniku rakoviny. ZIP6 je cílem tohoto transkripčního faktoru. Větší část dosavadního výzkumu byla zaměřena jen na aktivaci STAT3 po fosforylaci tyrosinu, zatímco fosforylace serinu zůstala relativně neprozkoumána. Domníváme se, že fosforylace serinu je aktivována v průběhu mitózy tamoxifen-rezistentních prsních nádorových buněk (TamR), a že zinkový transportér ZIP6 a na serinu fosforylovaný STAT3 jsou zahrnuty v zinkem zprostředkovaném mechanismu mitózy. Při použití nocodazolu pro navození zástavy mitózy, jsme pozorovali snížení exprese na tyrosinu fosforylovaného STAT3, zatímco exprese STAT3 fosforylovaného na serinu byla u mitotických buněk zvýšena. Přidání zinku mělo za následek vyrušení účinku nocodazolu, obnovení buněčného cyklu a proteolytické štěpení STAT3, což svědčí pro nový mechanizmus úniku z mitózy. Dále jsme objevili, že ZIP6 je v průběhu mitózy štěpen na N-terminálním úseku a přemístěn z endoplazmatického...
|
|
|
Pharmacological and physiological characteristics of organic cation transporters (OCTs) and multidrug and toxin extrusion proteins (MATEs)
Gregorová, Pavla ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Čečková, Martina (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Pavla Gregorová Školitel: Prof. PharmDr. František Štaud, Ph.D. Název diplomové práce: Farmakologické a fyziologické vlastnosti transportérů organických kationtů (OCTs) a multidrug and toxin extrusion proteinů (MATEs) Abstrakt: Membránové transportéry jsou důležité a život umožňující proteiny těla, které usnadňují absorpci, distribuci a eliminaci živin, odpadních produktů metabolismu, léků a xenobiotik. Multidrug and toxin extrusion proteiny (MATEs) a transportéry organických kationtů (OCTs) patří mezi polyspecifické přenašeče solute carrier (SLC) rodiny a tvoří vzájemně spolupracující systém vylučování v ledvinách a játrech. Transportéry jsou exprimovány v mnoha tkáních celého těla, především v ledvinách, játrech, srdci, mozku, tenkém střevě a placentě, a přenášejí nespočet molekul, od přirozených neurotransmiterů a hormonů, po exogenní sloučeniny jako jsou metformin, cimetidin, 1-methyl-4-fenylpyridin (MPP), tetraethylammonium (TEA) nebo acyclovir. Kromě toho jsou popsány nejnovější studie na knockoutovaných myších modelech a genetické polymorfismy, které pomáhají rozpoznat aktivitu a farmakokinetiku transportérů s pozměněnou funkčností. Tyto jsou přínosné pro objevování nových bezpečnějších...
|
|
|
Farmakologická léčba roztroušené sklerózy
Martincová, Petra ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Červený, Lukáš (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Mgr. Petra Martincová Školitel: Prof. PharmDr. František Štaud, Ph.D. Název diplomové práce: Farmakologická léčba roztroušené sklerózy Roztroušená skleróza patří mezi neurologické onemocnění autoimunitního původu. Hlavní filozofie léčby roztroušené sklerózy je založena na včasném podání protizánětlivé léčby. Tím lze oddálit ireverzibilní neurodegeneraci a invaliditu pacienta. V době ataky, která se může rozvinout v kterémkoliv stádiu nemoci, se nejčastěji podává methylprednisolon. Dlouhodobá terapie se opírá o imunomodulační léky: interferon- a glatiramer acetát, které jsou určeny k parenterálnímu podání. Redukují počet atak a snižují progresi onemocnění, ale jejich efekt je u většiny pacientů nedostatečný. Pro eskalaci léčby mohou být využita některá cytostatika, která však mají mnoho nežádoucích účinků. První perorální přípravek registrovaný v České republice je fingolimod. Využívá se v indikaci remitentní roztroušené sklerózy a u řady pacientů vykazuje velmi dobrý farmaceutický efekt. Novou možnost léčby přinášejí monoklonální protilátky. V České republice je k dispozici první monoklonální protilátka využívána v neurologii - natalizumab. Tato protilátka má vyšší efekt oproti lékům 1....
|
|
|
Organic Cation Transporter 3 (OCT3/SLC22A3) and Multidrug and Toxin Extrusion 1 (MATE1/SLC47A1) Protein in the Placenta: Expression, Localization and Function
Ahmadimoghaddam, Davoud ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Trejtnar, František (oponent) ; Večeřa, Rostislav (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Pharmacology and Toxicology Kandidát Mgr. Davoud Ahmadimoghaddam Školitel Prof. PharmDr. František Štaud, Ph.D Název disertační práce Organic cation transporter 3 (OCT3) a multidrug and toxin extrusion protein 1 (MATE1) v placentě: exprese, lokalizace a funkce. Cílem této studie bylo popsat expresi, lokalizaci a funkci dvou transportérů, organic cation transporter 3 (OCT3) a multidrug and toxin extrusion protein 1 (MATE1) v placentě potkana. Pomocí qRT-PCR, Western blotting a imunohistochemie jsme detekovali vysokou expresi OCT3 na fetální straně placentárního trofoblastu a expresi MATE1 na straně mateřské. Pro studium role těchto transportérů v transplacentární farmakokinetice jsme využili in situ metodu duálně perfundované potkaní placenty v otevřeném i uzavřeném systému a 1-methyl-4-phenylpyridinium (MPP+) byl použit jako modelový substrát OCT3 a MATE1. Naše výsledky dokazují, že OCT3 a MATE1 způsobují asymetrii v transplacentárním přechodu MPP+ s výraznou převahou transportu z plodu do matky. Pomocí uzavřeného systému duální perfúze potkaní placenty jsme dále popsali schopnost OCT3 a MATE1 transportovat MPP+ z plodu do matky, a to i proti koncentračnímu gradientu. Dále jsme aplikovali různé hodnoty pH (6,5, 7,3, a 8,5)...
|
host ::
RSS.