|
|
Studium role vybraných izoforem cytochromu P450 v cytostatické rezistenci na úrovni apoptózy
Moriová, Magdalena ; Hofman, Jakub (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Magdalena Moriová Školitel: RNDr. Jakub Hofman, Ph.D. Název diplomové práce: Studium role vybraných izoforem cytochromu P450 v cytostatické rezistenci na úrovni apoptózy Cytostatická rezistence je jednou z nejzáludnějších terapeutických překážek v onkologické léčbě. Vedle mechanizmů farmakodynamických hrají v lékové rezistenci důležitou roli též faktory farmakokinetické. Mezi takové mechanizmy zřejmě patří i enzymatická transformace účinné látky na neaktivní metabolit v nádorových buňkách, důkazy o zapojení enzymů ve farmakokinetické rezistenci jsou však dosud veskrze pouze nepřímé nebo zatížené interferenčními elementy. Za využití komparativních experimentů v HepG2 liniích s/bez overexprese CYP3A4 jsme se zaměřili na zhodnocení role tohoto klinicky důležitého enzymu v rezistenci vůči docetaxelu. Metodicky se jednalo o stanovení indukce apoptózy (aktivace kaspáz 3/7, 8 a 9) pomocí komerčních luminiscenčních kitů. Naše výsledky poukazující na signifikantní zapojení enzymu CYP3A4 v omezení účinnosti docetaxelu v intervalu 48 h, přičemž v časnějších intervalech se tento závěr nepotvrdil. Tato zjištění výborně korelují s výsledky našich předchozích studií zaměřených na proliferační úroveň. Získané...
|
|
|
Study on interactions of PARP inhibitors with ABC drug efflux transporters
Dziaková, Lucia ; Hofman, Jakub (vedoucí práce) ; Čečková, Martina (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študentka: Lucia Dziaková Školiteľ: RNDr. Jakub Hofman, Ph.D. Názov diplomovej práce: Štúdium interakcií PARP inhibítorov s ABC liekovými efluxnými transportérmi. ABC efluxné transportéry sú integrálne membránové proteíny, ktoré využitím energie získanej z ATP prenášajú nespočetné množstvo telu vlastných látok von z buniek, no pozornosť je však upriamovaná hlavne na to, že prenášajú xenobiotika. Ich nadmerná expresia v nádorovom tkanive prispieva k mnohopočetnej liekovej rezistencii (MDR), ktorá vo väčšine prípadov vedie k zlyhaniu terapie. Inhibítory poly(ADP-ribóza)polymerázy (PARPi) predstavujú sľubný terapeutický prístup v liečbe nádorových ochorení, ktoré vykazujú defekty v homológnej rekombinácii (HR). Táto práca sa zameriava na štyri vybrané PARPi (olaparib, rucaparib, niraparib, veliparib) a ich interakčný potenciál voči ABC liekovým efluxným transportérom (ABCB1, ABCC1, ABCG2). Pre účely našej práce sme pracovali s MDCKII bunkami (parentné, transdukované skúmanými transportérmi) a využívali princíp akumulačných štúdií, ktoré sú založené na meraní intenzity fluorescencie špecifických modelových substrátov (hoechst33342, calcein AM, daunorubicín, mitoxantrón). Ako pozitívnu kontrolu sme využívali...
|
|
|
Comparison of platelet aggregation in healthy population.
Minarovičová, Júlia ; Mladěnka, Přemysl (vedoucí práce) ; Hofman, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študentka: Júlia Minarovičová Školiteľ: prof. PharmDr. Přemysl Mladěnka, Ph.D. Názov diplomovej práce: Porovnanie agregácie doštičiek u zdravých dobrovoľníkov Krvné doštičky majú nezastupiteľnú úlohu v procese agregácie. Na druhej strane, je ale ich zvýšená aktivita spojená s rozvojom kardiovaskulárnych ochorení. Tento dej možno ovplyvniť klinicky používanými látkami zo skupiny protidoštičkových liečiv, ktoré sa odlišujú svojou účinnosťou v rámci populácie. Počas tejto práce bola agregácia krvných doštičiek testovaná s využitím impedačnej agregometrie, ktorej princípom je zmena elektrickej impedancie medzi elektródami spôsobená adhéziou aktivovaných krvných doštičiek. Najskôr bola plná krv inkubována s klinicky používanými protidoštičkový liečiv (tikagrelor, vorapaxar a kyselina acetylsalicylová) a flavonoidným metabolitom, 4-metylkatecholom. Následne bol pridaný zodpovedajúci induktor agregácie krvných doštičiek (ADP, trombínový receptor aktivujúci peptid 6 /TRAP/, kolagén, kyselina arachidonová, ristocetin, U-46619 a dostičky aktivujúci faktor /PAF/) a proces bol monitorovaný po dobu 6 minút. Najpotentnejší inhibítor agregácie indukovanej kyselinou arachidonovou bola kyselina acetylsalicylová v koncentrácií 70 μM,...
|
|
|
Využití vybraných inhibitorů k překonání anthracyklinové rezistence v terapii nádorových onemocnění (in vitro studie).
Tučková, Kateřina ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Hofman, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Kateřina Tučková Školitel: prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. Konzultant: Mgr. Lenka Laštovičková, Ph.D. Název diplomové práce: Využití vybraných inhibitorů k překonání anthracyklinové rezistence v terapii nádorových onemocnění (in vitro studie) Výskyt rezistence na cytostatika je závažným problémem v léčbě onkologických pacientů, který výrazně ztěžuje šanci na jejich rekonvalescenci. Jednou z příčin vzniku rezistence je zvýšená exprese karbonyl redukujících enzymů v nádorových buňkách. Tyto enzymy dokáží redukovat cytostatika ze skupiny antracyklinů na jejich méně účinné deriváty a výrazně tak snižovat jejich účinek. Inhibitory karbonyl redukujících enzymů by proto mohly zvýšit účinek podávaných antracyklinů. Cílem je najít inhibitor s vysokou inhibiční aktivitou a zároveň nízkými vedlejšími účinky. V této diplomové práci byly testovány inhibitory asciminib, tucatinib, sotorasib a umbralisib hydrochlorid vůči karbonyl redukujícím enzymům z nadrodiny aldo-ketoreduktas (AKR1C3, 1A1, 1B1, 1B10) a dehydrogenas/reduktas s krátkým řetězcem (CBR1) za použití cytostatika daunorubicinu. Největší inhibiční potenciál byl pozorován u asciminibu a enzymu AKR1C3, proto se pro získání dalších kinetických parametrů...
|
|
|
Study of pharmacokinetic and pharmacodynamic mechanisms of drug resistance and their modulation in non-small cell lung cancer
Zhang, Yu ; Hofman, Jakub (vedoucí práce) ; Pešek, Miloš (oponent) ; Trejtnar, František (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Školicí pracoviště Katedra farmakologie a toxikologie Doktorský studijní program Farmakologie a toxikologie Kandidátka / kandidát Yu Zhang Školitelka / školitel Assoc. Prof. RNDr. Jakub Hofman, Ph.D. Konzultantka / konzultant Název disertační práce Studium farmakokinetických a farmakodynamických mechanizmů lékové rezistence a jejich modulace u nemalobuněčného plicního karcinomu Karcinom plic představuje jedno z nejnebezpečnějších zhoubných onemocnění, což se vysvětluje jeho nejvyšší morbiditou a mortalitou mezi všemi typy rakoviny. Farmakologické intervence sehrály v klinické léčbě nemalobuněčného karcinomu plic (NSCLC) působivou roli a výrazně zlepšily přežití pacientů. Nicméně nevyhnutelný vznik lékové rezistence jejich účinnost vážně snižuje. Tradiční chemoterapeutika byla do léčby NSCLC zavedena již před několika desetiletími. Nesčetné studie ukázaly, že vznik mnohočetné lékové rezistence (MDR) je hluboce spojen se dvěma farmakokinetickými faktory: (1) zvýšený eflux léčiv prostřednictvím transportérů ABC (ATP- binding cassette) a (2) zvýšená deaktivace léčiv biotransformačními enzymy, např. cytochromy P450 (CYPy). Již dříve jsme spolu s dalšími prokázali, že několik nových cílených léčiv může synergicky modulovat farmakokinetickou MDR...
|
|
|
Studium originálních ftalocyaninových fotosensitizérů na buněčné úrovni
Halašková, Marie ; Macháček, Miloslav (vedoucí práce) ; Pejchal, Jaroslav (oponent) ; Hofman, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Mgr. Marie Halašková Školitel: RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Název disertační práce: Studium originálních ftalocyaninových fotosensitizérů na buněčné úrovni Fotodynamická terapie (PDT) je léčebná metoda, která v posledních desetiletích zaznamenala velký pokrok a používá se k léčbě řady onemocnění a poruch jako jsou například věkem podmíněná makulární degenerace, psoriáza či některé druhy nádorových onemocnění. PDT je založena na kombinaci tří základních složek: léčiva citlivého na světlo (známé jako fotosensitizér, PS), světla o vhodné vlnové délce a kyslíku. Světlem aktivovaný PS reaguje s molekulárním kyslíkem za vzniku reaktivních forem kyslíku, jež v biologickém prostředí interagují s buněčnými složkami a spouštějí kaskádu reakcí, které způsobují biochemické poškození buňky, cévního systému nádoru a indukci lokální zánětlivé reakce. Výsledkem je významné narušení homeostázy buňky vedoucí k procesu buněčné smrti. Jako všechny nově navržené způsoby léčby, i v této oblasti je stále zapotřebí další výzkum, včetně vývoje a optimalizace syntézy nových PS pro zvýšení účinnosti terapie a zároveň minimalizace vedlejších účinků. V této práci jsme se rozhodli provést rozsáhlé studium vlastností několika různých...
|
|
|
Comparison of platelet aggregation in healthy population.
Minarovičová, Júlia ; Mladěnka, Přemysl (vedoucí práce) ; Hofman, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študentka: Júlia Minarovičová Školiteľ: prof. PharmDr. Přemysl Mladěnka, Ph.D. Názov diplomovej práce: Porovnanie agregácie doštičiek u zdravých dobrovoľníkov Krvné doštičky majú nezastupiteľnú úlohu v procese agregácie. Na druhej strane, je ale ich zvýšená aktivita spojená s rozvojom kardiovaskulárnych ochorení. Tento dej možno ovplyvniť klinicky používanými látkami zo skupiny protidoštičkových liečiv, ktoré sa odlišujú svojou účinnosťou v rámci populácie. Počas tejto práce bola agregácia krvných doštičiek testovaná s využitím impedačnej agregometrie, ktorej princípom je zmena elektrickej impedancie medzi elektródami spôsobená adhéziou aktivovaných krvných doštičiek. Najskôr bola plná krv inkubována s klinicky používanými protidoštičkový liečiv (tikagrelor, vorapaxar a kyselina acetylsalicylová) a flavonoidným metabolitom, 4-metylkatecholom. Následne bol pridaný zodpovedajúci induktor agregácie krvných doštičiek (ADP, trombínový receptor aktivujúci peptid 6 /TRAP/, kolagén, kyselina arachidonová, ristocetin, U-46619 a dostičky aktivujúci faktor /PAF/) a proces bol monitorovaný po dobu 6 minút. Najpotentnejší inhibítor agregácie indukovanej kyselinou arachidonovou bola kyselina acetylsalicylová v koncentrácií 70 μM,...
|
|
|
Expression of ABC transporters in cell cultures of non-small cell lung cancer: effect of selected targeted drugs
Žofajová, Barbora ; Hofman, Jakub (vedoucí práce) ; Červený, Lukáš (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študentka: Barbora Žofajová Školiteľ: doc. RNDr. Jakub Hofman, Ph.D. Názov diplomovej práce: Expresia ABC transportérov v bunkových kultúrach nemalobunkového pľúcneho karcinómu: efekt vybraných cielených liečiv ABC transportéry sú špeciálna rodina transmembránových proteínov, ich funkciou je aktívny eflux substrátov z buniek do extracelulárneho prostredia. Sú exprimované ako aj v normálnych tkanivách, tak aj nádorových bunkách. Tým pádom ovplyvňujú farmakokinetiku liečiv a zohrávajú úlohu pri vzniku mnohopočetnej liekovej rezistencie (MDR). Tyrozínkinázy majú dôležité funkcie, od bunkovej novotvorby cez diferenciáciu až po bunkovú smrť, ich mutácia môže spôsobiť, že sa z normálnej bunky stane nádorová. Nachádzanie, skúmanie a inhibícia funkcií týchto cieľov je sľubná stratégia na liečbu nádorových ochorení. Cieľom tejto práce bolo zistiť, či sa nami vybrané liečivá zapájajú do farmakokinetických interakcií, ktoré sú založené na indukcií génov ABC efluxných transportérov a či majú potenciál ovplyvniť MDR fenotyp nádorových buniek. Látky, ktoré sme študovali, boli tri cielené protinádorové liečivá (capmatinib, pralsetinib a tazemetostat) a dve známe chemoterapeutiká (pemetrexed a metotrexát). S výnimkou...
|
|
|
Study on the effect of selected targeted drugs on drug resistance mediated by ABC drug transporters
Paulusová, Viktória ; Hofman, Jakub (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študentka: Viktória Paulusová Školiteľ: doc. RNDr. Jakub Hofman, Ph.D. Názov diplomové práce: Štúdium vplyvu vybraných cielených liečiv na liekovú rezistenciu sprostredkovanú ABC liekovými transportérmi. Viacnásobná lieková rezistencia (MDR) je jedným z hlavných problémov súvisiacich s liečbou rakoviny. Kľúčovým determinantom MDR je zvýšený eflux liekov membránovými ATP-binding cassette (ABC) transportérmi, ktoré sú rodinou transportných proteínov. Ich nadmerná expresia prispieva k MDR tým, že vďaka efluxu rôznych liečiv z buniek sa znižuje intracelulárna koncentrácia liečiva. Zacieleným na ABC transportéry sa ukazuje sľubný prístup k eliminácii alebo dokonca aj potlačeniu liekovej rezistencie. Preto jednou stratégiou na zvrátenie rezistencie nádorových buniek exprimujúcich ABC transportéry je kombinované použitie chemoterapeutík s modulátormi ABC transportéra, ktoré zvýšia terapeutickú účinnosť. Cieľom tejto práce bolo preskúmať vplyv cielených liečiv (capmatinib, pralsetinib a tazemetostat) v kombinácii s cytostatikami (etoposid a topotekan) na liekovú rezistenciu sprostredkovanú ABC efluxnými transportérmi. Výsledky boli získane pomocou MTT testov a testov na stanovenie aktivity kaspáz vykonaných na...
|
|
|
Využití vybraných inhibitorů k překonání anthracyklinové rezistence v terapii nádorových onemocnění (in vitro studie).
Tučková, Kateřina ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Hofman, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Kateřina Tučková Školitel: prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. Konzultant: Mgr. Lenka Laštovičková, Ph.D. Název diplomové práce: Využití vybraných inhibitorů k překonání anthracyklinové rezistence v terapii nádorových onemocnění (in vitro studie) Výskyt rezistence na cytostatika je závažným problémem v léčbě onkologických pacientů, který výrazně ztěžuje šanci na jejich rekonvalescenci. Jednou z příčin vzniku rezistence je zvýšená exprese karbonyl redukujících enzymů v nádorových buňkách. Tyto enzymy dokáží redukovat cytostatika ze skupiny antracyklinů na jejich méně účinné deriváty a výrazně tak snižovat jejich účinek. Inhibitory karbonyl redukujících enzymů by proto mohly zvýšit účinek podávaných antracyklinů. Cílem je najít inhibitor s vysokou inhibiční aktivitou a zároveň nízkými vedlejšími účinky. V této diplomové práci byly testovány inhibitory asciminib, tucatinib, sotorasib a umbralisib hydrochlorid vůči karbonyl redukujícím enzymům z nadrodiny aldo-ketoreduktas (AKR1C3, 1A1, 1B1, 1B10) a dehydrogenas/reduktas s krátkým řetězcem (CBR1) za použití cytostatika daunorubicinu. Největší inhibiční potenciál byl pozorován u asciminibu a enzymu AKR1C3, proto se pro získání dalších kinetických parametrů...
|
host ::
RSS.