|
Liberace acikloviru z větvených oligoesterů
Vondráčková, Hana ; Šnejdrová, Eva (vedoucí práce) ; Dittrich, Milan (oponent)
10 Souhrn Cílem předložené diplomové práce bylo zjistit průběh liberace acikloviru z plastifikovaných oligoesterových nosičů. Jedná se o terpolymery kyseliny D,L-mléčné, kyseliny glykolové a dipentaerythritolu, resp. tripentaerythritolu [LA/GA/D(T)]. Teoretická část je věnována procesům probíhajícím při liberaci léčiva z polymerních nosičů, dále nejvýznamnější skupině degradabilních polymerů, tedy polyesterům kyseliny polymléčné, polyglykolové a jejich kopolymerům a polyhydroxylovému alkoholu pentaerythritolu. V experimentální části bylo provedeno stanovení uvolněného acikloviru použitím disolučních testů a následného spektrofotometrického stanovení. Průběh liberace léčiva byl zaznamenán graficky jako závislost kumulativních procent uvolněného léčiva na čase. Bylo zjištěno, že nejvhodnějším nosičem pro aciklovir se jeví nosič 3T, který má z testovaných nosičů nejvyšší molární hmotnost a nejvyšší stupeň větvení.
|
|
Hodnocení transdermální propustnosti pro kyselinu listovou pomocí methylparabenu jako markeru
Kubíková, Kateřina ; Berka, Pavel (vedoucí práce) ; Doležal, Pavel (oponent)
V teoretické části je stručně nastíněna problematika kůže ve vztahu k transdermální prostupnosti látek. Na tuto část navazuje obecně shrnuta problematika možnosti provádění samotného testování transdermálního průchodu. Dále byly v této části popsány základní vlastnosti methylparabenu a kyseliny listové jako látek použitých pro permeační pokusy. V experimentální části diplomové práce byly popsány podmínky, za kterých probíhalo in vitro měření permeací methylparabenu a kyseliny listové z TRIS pufru, TRIS pufru s propylenglykolem (PG) (3:2), isopropylmyristátu (IPM) nebo z isopropylmyristátu (IPM) s parafínovým olejem (PO) (2:3) přes prasečí kůži plné tloušťky. Byly zjištěny následující normalizované fluxy kys. listové JKLn: z TRIS pufru: 1,00 ± 0,47, RSD 46,5%; z TRIS pufru s PG: 0,28 ± 0,11, RSD 40,1%; z IPM: 0,86 ± 0,72, RSD 83,4%; z IPM s PO: 2,08 ± 3,91, RSD 188,2%. Dále byly vypočteny následující průměry poměrů normalizovaných fluxů kys. listové a methylparabenu JKLn/JMPn a jejich směrodatné odchylky a rel. směrodatné ochylky: z TRIS pufru: 0,98 ± 0,46, RSD 46,3%; z TRIS pufru s PG: 0,18 ± 0,09, RSD 52,2%; z IPM: 0,78 ± 0,77, RSD 98,9%; z IPM s PO: 1,76 ± 2,86, RSD 162,4%. Porovnáním těchto výsledků byl vyvozen závěr, že methylparaben není vhodným markerem při hodnocení transdermální...
|
|
Vliv pozdních důsledků perinatální hypoxie a pleiotropních účinků statinů na akutní ischmeicko/reperfuzní poškození myokardu
Malý, Jiří ; Pirk, Jan (vedoucí práce) ; Kittnar, Otomar (oponent) ; Pudil, Radek (oponent)
Úvod: V posledních desetiletích byly popsány stovky experimentálních intervencí, které dovedou ochránit ischemický myokard, avšak s výjimkou časné reperfuze, žádná z nich nenašla uplatnění v klinické praxi. V naší práci jsme proto zvolili jiný přístup: vycházeli jsme z existujících klinických situací a pokusili jsme se zjistit, jak mohou v experimentálníkm modelu ovlivnit odolnost srdečního svalu k ischemii. Vybrali jsme si dvě situace, které se v posledních letech stávají velice aktuální: 1. cyanotické vrozené srdeční vady a 2. dlouhodobá léčba hypercholesterolemie. Cíl: Zjistit, zda 1. neonatální hypoxie ovlivní odolnost dospělého srdce laboratorního potkana k akutní ischemii; 2. odolnost dospělého srdce laboratorního potkana k ischemii ovlivní akutní nebo chronické podání statinů. (...) Naopak u samic jsme pozorovali protektivní antiarytmický účinek, který se projevil prokazatelným snížením počtu ischemických arytmií. Vliv perinatální IHH na rozsah infarktu myokardu dospělých samců a samic jsme neprokázali. 2. Akutní podání statinu laboratorním potkanům in vivo významně snížilo rozsah infarktového ložiska vztaženého na velikost levé komory. Při vyjádření velikosti infarktu na ohroženou oblast byl protektivní vliv podávání statinu naznačen, ale nedosáhl statistické významnosti. Akutní podání statinu v...
|
|
The Role of Uncoupling in Down-regulation of Reactive Oxygen Species
Ježek, Jan ; Žáčková, Markéta (vedoucí práce) ; Modrianský, Martin (oponent) ; Drahota, Zdeněk (oponent)
Produkci superoxidu komplexem I lze tlumit odpřažením, které urychlí elektronový tok a protonové pumpování komplexu I. Za podmínek, kdy je znemožněné protonové pumpování komplexu I, např. v důsledku mutací mitochondriální DNA kódujicí podjednotku ND2, ND4 nebo ND5 komplexu I, podílející se na protonovém pumpování, by terapeutická intervence založená pouze na odpřažení nebyla účinná. V pokusech je model poruchy protonového pumpování simulován hydrofobním amiloridem EIPA. My jsme poprvé ukázali, že EIPA je inhibitor protonového pumpování i pro mitochondriální komplex I. Hledali jsme agens, jenž by na rozdíl od opřažení tlumilo oxidační stres v důsledku omezeného protonového pumpování komplexu I. Ubichinon cílený do mitochondrií MitoQ10 se pro tento účel ukázal být účinným antioxidantem při zvýšené produkci superoxidu způsobené zpomaleným elektronovým tokem na komplexu I. V souvislosti s prooxidačními účinky MitoQ10 je nutné jej při léčbě cílit do místa poškozené tkáně. Aktivací mitochondriální fosfolipasy iPLA2 mírným oxidačním stresem jsou uvolňovány hydroperoxidy mastných kyselin sloužící jako cyklující substráty pro UCP2, jenž mírným odpřažením zpětnovazebně tlumí produkci reaktivních sloučenín kyslíku. Buňky s nižším zastoupením oxidativní fosforylace adaptují méně účinně na podmínky fyziologické...
|
|
Mechanismy průniku sylicylátů monovrstvami buněk Caco-2: zapojení transportních proteinů.
Čierný, Jakub ; Doležal, Pavel (vedoucí práce) ; Šnejdrová, Eva (oponent)
Souhrn Práce se zabývá transportem kyseliny salicylové a jejích derivátu pres Caco-2 bunecné kultury a vlivem možných inhibitoru bunecného transportu. Dále se zabývá vlivem látek rozvolnujících tesné spoje (tight junctions) mezi Caco-2 bunkami. Hlavním cílem bylo zjistit typ transportu, jakým je kyselina salicylová prenášena, výsledky porovnat s transportem kyseliny gentisové a 5-hydroxyisoftalové, posoudit vliv ethylendiamintetraoctové kyseliny na prunik kyseliny salicylové a porovnat možný inhibicní úcinek _-kyano-4-hydroxyskoricové kyseliny, probenecidu, pravastatinu, kyseliny benzoové a 2-hydroxy-3-isopropylbenzoové. Predpokládal jsem, že na transportu kyseliny salicylové se podílí i pasivní difúze i transportní proteiny. Teoretická cást práce strucne shrnuje vlastnosti chemických látek, které mají vliv na transport pres bunecné membrány a predstavuje Caco-2 bunky jako prostredek výzkumu vstrebávání a distribuce léciv v lidském organismu. Definuje jednotlivé typy transportu pres bunecné membrány, popisuje typy transportních proteinu, které se nacházejí na membránách bunek lidského adenokarcinomu a podává strucný prehled souvisejících témat. Experimentální cást práce popisuje techniku kultivace Caco-2 bunek a metodiku transportních experimentu. Vetšina experimentu byla provádena pri teplote 37řC s pH...
|
|
Oligoesterové matrice s protimikrobními látkami II
Kapiasová, Jana ; Šnejdrová, Eva (vedoucí práce) ; Dittrich, Milan (oponent)
DP KAPIASOVÁ 2006 SOUHRN V teoretické části předložené diplomové práce jsou shrnuty fyzikální a chemické vlastnosti polyesterů kyseliny mléčné a glykolové a jejich kopolymerů, mechanismus hydrolytické degradace a význam citrátových plastifikátorů. Polymery jsou charakterizovány zejména molekukovou hmotností, teplotou skelného přechodu a stupněm krystalinity. Všechny tyto vlastnosti mají vliv na hydrolytickou degradaci. Ta je také značně závislá na velikosti vzorku, na přítomnosti plastifikátoru a dalších faktorech. U velkých vzorků hydrolýza probíhá heterogenně, tzn. že na povrchu probíhá pomaleji než uvnitř. Citrátové plastifikátory významně mění fyzikální vlastnosti polymerů, zejména teplotu skelného přechodu, a mechanické vlastnosti jako jsou pevnost a tažnost. Mají také silný vliv na hydrolýzu. V experimentální části byla studována liberace flukonazolu a terbinafinu z terpolymerů kyseliny mléčné a glykolové v poměru 1:1 větvených 3%, 5% a 8% dipentaerythritolu (D) nebo mannitolu (M). Matrice o hmotnosti 150 mg tvořené nosičem (oligoester), plastifikátorem (30% triethylcitrátu) a léčivem (flukonazol nebo terbinafin) byly připraveny tavením v mikrovlnné troubě při středním výkonu. Vzniklá směs byla velmi důkladně homogenizována. Liberačním médiem pro obě léčiva byl zvolen fosfát citrátový pufr pH 7,0. Po...
|
|
Vliv podávání MDOCTM na aterogenní proces u experimentálního modelu aterosklerózy.
Tomalová, Pavla ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Kopecký, Martin (oponent)
Vliv podávání MDOCTM na aterogenní proces u experimentálního modelu aterosklerózy. Mgr. Pavla Tomalová Cílem této rigorózní práce bylo zjistit potencionální hypolipidemické a protizánětlivé účinky modifikované oxidované celulózy (MDOC). V terapii hyperlipidemií a cévních komplikací (aterosklerózy) jsou dnes nejvýznamnějšími léky statiny. Bylo však také prokázáno, že podávání dietní vlákniny má pozitivní vliv na kardiovaskulární systém a to včetně hladiny cholesterolu. MDOC (polyanhydroglukuronová kyselina) se svými vlastnostmi pravděpodobně může řadit mezi rozpustnou vlákninu. Jako model byly použity apoE deficientní myši, kterým byla podávána aterogenní dieta. Byly sledovány hladiny celkového cholesterolu i jednotlivých lipidů a sérové koncentrace zánětlivých markerů (IL-6 a VCAM-1) v krvi. Celkové koncentrace cholesterolu byly hodnoceny enzymaticky na základě konvenčních diagnostických metod a spektrofotometrické analýzy. Pro zobrazení exprese VCAM-1 v aortálního sinu a části aortálního oblouku byly využity imunohistochemické metody a ke kvantifikaci jeho exprese stereologické metody. Výsledky biochemické analýzy ukázaly, že podávání MDOC neovlivnilo hladiny celkového cholesterolu, VLDL cholesterolu ani triacylglycerolů. Zaznamenali jsme však statisticky významné snížení hladin LDL cholesterolu a zvýšení...
|
|
Vliv podávání léčiva ze skupiny statinů na aterogenní proces u experimentálního modelu aterosklerózy.
Koutníková, Jitka ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Trejtnar, František (oponent)
Vliv podávání léčiva ze skupiny statinů na aterogenní proces u experimentálního modelu aterosklerózy. Mgr.Jitka Koutníková Cílem této rigorózní práce bylo detekovat a kvantifikovat změny endoteliální exprese VCAM-1 (marker endoteliální dysfunkce) a endoglinu (marker angiogeneze) ve stěně cévy u apoE deficientních myší. Endoglin je součástí receptorového komplexu transformačního růstového faktoru-beta (TGF-beta). Dále byl sledován vliv hypolipidemika atorvastatinu na změnu v expresi těchto endoteliálních markerů. V terapii hyperlipidemií a cévních komplikací (aterosklerózy) jsou dnes nejvýznamnějšími léky statiny. Vedle poklesu LDL cholesterolu snižují statiny též triglyceridemii. Na efektu statinů se podílí pravděpodobně i tzv. extralipidový efekt: snížení aktivity zánětlivých a protrombotických pochodů. Jako model byly použity apoE deficientní myši, kterým byla podávána standardní laboratorní dieta. U všech myší v experimentu byly stanoveny hladiny celkového cholesterolu v krvi a byla sledována exprese VCAM-1 a endoglinu v aortálním sinu a oblouku. Celkové koncentrace cholesterolu byly hodnoceny enzymaticky na základě konvenčních diagnostických metod a spektrofotometrické analýzy. Pro zobrazení exprese endoglinu a VCAM-1 v aortálním sinu a části aortálního oblouku byly využity imunohistochemické metody a...
|
|
Separace a stanovení farmaceuticky významných látek s využitím elektroforetických metod
Hamoudová, Rafífa ; Pospíšilová, Marie (vedoucí práce) ; Nobilis, Milan (oponent) ; Jokl, Vladimír (oponent)
This thesis deals with the use of electrophoretic methods in the analysis of pharmaceutically important compounds. In the theoretical part, the classification of capillary electrophoretic techniques is discussed. Capillary zone electrophoresis (CZE, capillary isotachophoresis (ITP), micellar elektrokinetic chromatography (MEKC), microemulsion elektrokinetic chromatography (MEEKC), isoelectric focusation (IEF), capillary electrochromatography (CEC) and capillary gel electrophoresis (CGE) are described. Further, on-line pre-concentration methods are described. Particular attention is given to the on-line combination of capillary isotachophoresis with capillary zone electrophoresis using column coupling arrangement. This combination enables the improvement of the selectivity of separation and the improvement of the limit of detection of analytes present in complex matrices of biological and environmental origin. Afterwards, the results of the experimental analyses are presented: 1. The first paper deals with the use of CZE in the analysis of ibuprofen and flurbiprofen in pharmaceuticals. Separation was carried out in a fused silica capillary (60 cm x 100 m I.D effective length 45 cm) at 30 kV with UV detection at 232 nm. The optimized background electrolyte was 20mM N-(2- acetamido)-2-aminoethanesulfonic acid...
|
|
Allooimmunosensitization in left ventricular assist device recipients and impact on post-transplantation outcome
Urban, Marián ; Netuka, Ivan (vedoucí práce) ; Ošťádal, Petr (oponent) ; Mrázek, František (oponent)
Úvod: V posledním desetiletí se mechanické srdeční podpory staly nedílnou součástí léčby pacientů v terminálním stádiu chronického srdečního selhání v rámci tzv. přemostění k transplantaci srdce. Jedním z popisovaných vedlejších účinků dlouhodobé mechanické srdeční podpory je zvýšená tvorba autoprotilátek, které mohou na podkladě komplexních imunologických interakcí negativně ovlivnit výsledek následné transplantace. Cíl: Hlavním cílem naší experimentální prospektivní studie bylo posoudit účinek pozitivity autoprotilátek vůči novějším typům sledovaných receptorů na výsledky chirurgické léčby pokročilého srdečního selhání (implantace mechanické podpory a navazující transplantace srdce). Metodika: Úvodní část práce tvoří literární přehled současných poznatků o možných mechanismech vedoucích k tvorbě protilátek u pacientů po implantaci mechanické podpory, nové metody detekce protilátek a nejnovější publikace pojednávající o možném negativním vlivu těchto protilátek na výsledky transplantace. Součástí experimentální práce bylo zavedení a praktické osvojení nové metodiky detekce autoprotilátek (Luminex). V první části experimentu jsme nejdříve stanovovali hladiny protilátek proti Angiotensin II Typ 1 Receptoru (AT1R) u 96 pacientů, kterým byla implantována dlouhodobá mechanická srdeční podpora Heart...
|
host ::
