|
|
Adaptogeny v rostlině Shizandra chinensis
Pospíchalová, Lucie ; Půčková, Helena (oponent) ; Kotlík, Josef (vedoucí práce)
Tato diplomová práce se zabývá rostlinnými adaptogeny (bioaktivními látkami) rostliny Schisandra chinensis. Teoretická část je zaměřena na charakterizaci rodu Schisandra, charakterizaci rostliny, její vlastnosti, výskyt a využití této rostliny. Dále je popsáno působení těchto adaptogenů na organismus a predikce možného využití v potravinových doplňcích. Také byly vytipovány vhodné regionální pěstební klimatické zóny. Experimentální část práce se zabývá extrakcí plodů a listů v rostlině Schisandra chinensis. Z extraktů listů byl dále stanoven obsah chlorofylu a, chlorofylu b pomocí UV – VIS spektrofotometrie, kdy bylo potvrzeno množství chlorofylu v poměru 3:1 pro rostliny v optimálních rostoucích podmínkách. Nakonec byl proměřen obsah adaptogenu schisandrinu A v sušených plodech s různou extrakcí pomocí HPLC. Ve všech plodech byl potvrzen schisandrin v odlišném množství.
|
|
|
Stanovení sladidel a konzervantů v energetických nápojích metodou HPLC
Zídková, Anežka ; Pořízka, Jaromír (oponent) ; Diviš, Pavel (vedoucí práce)
Diplomová práce je zaměřena na simultánní stanovení vybraných sladidel a konzervantů v energetických nápojích metodou kapalinové chromatografie ve spojení s DAD a ELSD detekcí. Metoda byla optimalizována pro stanovení aspartamu, acesulfamu K, sacharinu, sukralózy, steviol-glykosidů, kyseliny benzoové a kyseliny sorbové. Analýzy byly provedeny na koloně Poroshell 120 EC-C18 (4.6 x 150 mm, 2.7 m, Agilent) za použití směsi methanolu, acetonu a vody s přídavkem kyseliny mravenčí a triethylaminu jako mobilní fáze. Byla použita gradientová eluce při průtoku mobilní fáze 0,5 ml•min-1. Byly stanoveny validační parametry (limit detekce, limit kvantifikace, opakovatelnost a výtěžnost). Validovaná metoda byla použita pro analýzu reálných vzorků.
|
|
|
Development and validation of the analytical method for the purity assessment of Nalbumin hydrochloride
Děd, Jozef ; Maliarová,, Mária (oponent) ; Mrázová,, Viera (vedoucí práce)
High Performance Liquid Chromatography is currently used for the purpose of analytical evaluation of drugs. This is mainly because it allows the separation method both, a qualitative and a quantitative, analysis of high selectivity mixture evaluation and sensitivity. The diploma thesis deals with the issue of purity evaluation of pharmaceutical substance Nalbufin hydrochloride. The aim of the experimental part of the diploma thesis deals with the development and validation of the analytical method for assessing the purity of Nalbufin hydrochloride.An HPLC method was developed on a Nova-Pak C18 column. The mobile phase consisted of two components A and B. MF A composition was as follows: 0.97 g of sodium octane sulfonate was dissolved in 900 mL of water to which were added 100 mL of acetonitrile and 2 mL of triethylamine. Created solution was treated with phosphoric acid to pH 2.5. MF B had the following composition: 0.86g of sodium octanesulfonate was dissolved in 800 mL of water to which 200 mL was added acetonitrile of 2 mL of TEA. The resulting pH was adjusted to pH 2.5 with phosphoric acid. gradient MF had the following composition: From zero minutes from 100% A to 30 min. to 0% A. The 30-60min. 0% A, 60-61 min. with a linear change to 100% A, 61-70 min. equilibrium into the original conditions to 100% A at a flow rate of 1 mL/min. In the following section we evaluated the basic validation parameters: linear dynamic range 0.3 - 4.5 g/mL, we calculated the linear regression equation for Nalbuphine in R2 (0.9999), Oxycodone R2 (0.9999) and Noroxycodone R2 (0.9998). The method gave us detection limits for Nalbuphine 0.069 g/mL. Oxycodone had a detection limit of 0.053 g/mL and Noroxycodone 0.048mg / mL. The limist of quantification in these cases were 0.209 g / mL for Nalbuphine, 0.161 g/mL for Oxycodone and 0.147 g/mL for Noroxycodone. Repeatability for the limit of quantification was also set expressed by the relative standard deviation. For Nalbuphine - RSD = 0.40%, Oxycodone - RSD = 2.39% and Noroxycodone - RSD = 1.25% (RSD 7.0%). The following validation parameter was accuracy. The resulting RSD was 0.44% (RSD 5.0%). The last evaluated parameter was robustness. For pH 2.4, the change value was resolution of 1.5% and repeatability of RSD = 0.85%. The change of resolution value for pH 2.6 was 2.8% and repeatability RSD = 1.29% (max. 5% limit). The second factor observed for the robustness was the temperature change of the column. The arithmetic average was calculated from the individual peak areas and relative standard deviation RSD = 3.45% was evaluated with the change of resolution, which had a value of 3.34%. Thus, we can state that the developed chromatographic method has been verified in the givenvalidation parameters and is suitable for determining the purity of Nalbuphine hydrochloride.
|
|
|
Radioaktivní značení ramucirumabu s následnou studií jeho internalizace in vitro
Gajdoš, Jakub ; Bárta, Pavel (vedoucí práce) ; Kuchařová, Monika (oponent)
v českém jazyce Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie Student: Bc. Jakub Gajdoš Školitel: Mgr. Pavel Bárta, Ph.D. Název diplomové práce: Radioaktivní značení ramucirumabu s následnou studií jeho internalizace in vitro. Proces angiogeneze zajišťuje tvorbu krevního řečiště v místě jeho zvýšené potřeby. Není proto překvapením, že je angiogeneze mnohdy zahrnuta do procesu tvorby nádorů, jelikož zajišťuje nádorovým buňkám přístup živin a odvod metabolitů. Cílení angiogeneze se tak stalo klíčovým tématem některých vědeckých výzkumů. Proces tvorby krevního zásobení nádorů zajišťuje rodina vaskulárních endoteliálních faktorů (VEGF) a jejich příslušných receptorů, které se tak staly cílem útlumu angiogeneze v onkologické léčbě. Jednou z mnoha terapeutik je i monoklonální protilátka ramucirumab cílená proti VEGF receptoru typu 2 (VEGFR-2). Radioaktivní značení ramucirumabu vhodným radionuklidem může přinést výhody ať už v radioterapii nebo radiodiagnostice. Cílem této diplomové práce bylo nepřímé radioaktivní značení monoklonální protilátky ramucirumabu pomocí radiodiagnostického nuklidu 99m Tc přes chelatační činidlo succinimidyl-6-hydrazino-nikotinamid (HYNIC) s následným stanovením radiochemické čistoty připraveného radiofarmaka a zejména jeho...
|
|
|
Metabolismus tyrosinkinasového inhibitoru cabozantinibu jaterními mikrosomy potkana
Jurečka, Tomáš ; Indra, Radek (vedoucí práce) ; Mrízová, Iveta (oponent)
Cabozantinib je protinádorové léčivo, které bylo schváleno pro léčbu progresivního karcinomu štítné žlázy organizacemi FDA i EMA. Cabozantinib působí jako tyrosinkinasový inhibitor. Blokuje receptory signálních drah důležitých pro růst nádorů. Předkládaná bakalářská práce rozšiřuje poznatky o metabolismu cabozantinibu. V práci je studován metabolismus cabozantinibu jaterními mikrosomy izolovanými z různých laboratorních zvířat (potkan, myš a králík) a vliv jednotlivých izoforem cytochromů P450 (CYP) na metabolismus cabozantinibu jaterními mikrosomy potkana. Práce zahrnuje rovněž optimalizaci metody separace metabolitů cabozantinibu pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) a následnou identifikaci pomocí hmotnostní spektrometrie. Za použití mikrosomů izolovaných z různých laboratorních zvířat byly detekovány až tři metabolity: M1, monohydroxycabozantinib a O-desmethylcabozantinib. Pomocí myších mikrosomů byl cabozantinib metabolizován především na O-desmethylcabozantinib a pomocí králičích mikrosomů především na monohydroxycabozantinib. Mikrosomy z kontrolních potkanů tvořily dva metabolity s převahou monohydroxycabozantinibu. Největší množství metabolitů bylo tvořeno mikrosomy potkanů premedikovaných PCN. Tyto výsledky tak naznačují důležitost cytochromů 3A podrodiny na metabolické...
|
|
|
Fytoextrakce benzodiazepinů z vodných roztoků
Grasserová, Alena ; Smrček, Stanislav (vedoucí práce) ; Soudek, Petr (oponent)
Abstrakt, klíčová slova V této práci byly provedeny fytoextrakční experimenty se čtyřmi benzodiazepiny: chlordiazepoxidem, diazepamem, alprazolamem a bromazepamem, a to na rostlině kukuřici seté (Zea mays). Ke sterilně vysázeným rostlinám kukuřice seté bylo po 14 dnech růstu přidáno čerstvé médium (dle Murashiga a Skooga) obohacené o benzodiazepin o výchozí koncentraci 10 mg · l-1. Médium bylo následně odebíráno vždy po 24 hodinách a koncentrace benzodiazepinu zjištěna metodou HPLC s UV detekcí. Při stejných podmínkách byly na HPLC po ukončení fytoextrakčních experimentů měřeny i vzorky extrahovatelných reziduí benzodiazepinů za účelem zjištění míry translokace léčiv do nadzemních částí rostlin. Nejvyšší fytoextrakční účinnost (množství léčiva extrahovaného 1 gramem biomasy za 24 hodin) byla zjištěna pro chlordiazepoxid, následoval bromazepam a alprazolam, nejnižší fytoextrakční účinnost vykazoval diazepam. Analýza extrahovatelných reziduí potvrdila translokaci do nadzemních částí rostliny u všech testovaných benzodiazepinů. Touto cestou může tedy docházet ke kontaminaci potravních řetězců živočichů. Klíčová slova: fytoremediace, fytoextrakce, benzodiazepiny, extrahovatelná rezidua, HPLC.
|
|
|
HPLC analýza léčiv
Dohnalová, Monika ; Kubíček, Vladimír (vedoucí práce) ; Lázníčková, Alice (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biofyziky a fyzikální chemie Kandidát: Monika Dohnalová Konzultant: Ing. Vladimír Kubíček, CSc. Název diplomové práce: HPLC analýza léčiv Diplomová práce se zabývá vývojem a optimalizací metody HPLC pro současné stanovení vybraných polyfenolických látek: apigeninu, acteosidu a luteolinu. V průběhu experimentů byly hledány nejvhodnější podmínky pro separaci, testovány byly různé mobilní fáze a různé typy gradientových elucí. K analýze byla využita kolona Zorbax Eclipse XBD C18 250 x 4,6 mm; 5 µm. Detekce byla provedena detektorem s diodovým polem při vlnových délkách 249 nm a 350 nm, kolona byla termostatována na 30 řC. Nastřikovaný objem byl 10 µl. Nejlepších výsledků bylo dosaženo se složením mobilní fáze acetonitril a vodný roztok kyseliny mravenčí (0,03 mol/l) s průtokovou rychlostí 1ml/min.
|
|
|
Použití statistického přístupu pro vývoj HPLC metod
Vymyslický, Filip ; Křížek, Tomáš (vedoucí práce) ; Kozlík, Petr (oponent)
Cílem této diplomové práce byl vývoj systematického postupu pro vývoj HPLC metod pomocí statistického přístupu design of experiments. Systém byl vyvinut na základě vývoje tří HPLC metod na stanovení čistoty účinných látek. Pri vývoji systematického potupu pro vývoj HPLC metod pomocí statistického přístupu byla jako první vybrána HPLC metoda stanovení čistoty esomeprazolu. Pomocí přístupu design of experiments byl prozkoumán experimentální prostor v okolí metody za účelem nalézt vhodnější nastavení podmínek separace. Druhou metodou použitou pro vytvoření systému byla metoda stanovení čistoty bisoprololu. Metoda byla převedena na kolonu menších rozměrů a bylo upraveno složení vodné složky mobilní fáze oproti původní lékopisné metodě. Pomocí přístupu design of experiments byl prozkoumán experimentální prostor za účelem nalezení vhodnějších podmínek separace. Poslední byla zvolena metoda na stanovení čistoty risperidonu. Oproti původní lékopisné metodě byla změněna vodná složka mobilní fáze. Byl prozkoumán experimentální prostor v okolí metody přístupem design of experiments s cílem nalézt nejvhodnější podmínky separace. Pro všechny studované HPLC metody byly hodnoty sledovaných chromatografických parametrů získány průzkumem experimentálního prostoru a poté statisticky zpracovány metodou nejmenších...
|
|
|
Modifikace detektoru z uhlíkové plsti měděnými mikročásticemi
Baroch, Martin ; Dejmková, Hana (vedoucí práce) ; Schwarzová, Karolina (oponent)
Prvním cílem této práce bylo připravení mědí modifikované elektrody z uhlíkové plsti tak, aby jí bylo možné detekovat aminokyseliny, které jsou na běžných elektrodách elektrochemicky neaktivní. Jako modelový vzorek sloužil roztok fenylalaninu o koncentraci 1,0 mmol dm-3 . Elektroda modifikovaná pomocí elektrochemického nanášení mědi ze směsného roztoku síranu měďnatého a síranu sodného poskytovala velmi nízké odezvy, které v průběhu prvních měření klesly, zřejmě kvůli nedostatečnému množství nanesené mědi. Proto byly další experimenty prováděny s použitím mikročástic mědi jako modifikátoru. Mikročástice aktivované pomocí kyseliny dusičné o koncentraci 80 mmol dm-3 byly nanášeny na plst pomocí míchání plsti v suspenzi mikročástic mědi a kapáním této suspenze na různé strany plsti - na stranu u kapiláry (proximální), u kontaktu s měrnou nádobkou (distální) a mezi dvě poloviny uhlíkové plsti (sandwichové). Jako nejvhodnější se z hlediska stability a velikosti signálu jevily elektrody modifikované v distálním a sandwichovém uspořádání. V poslední fázi byla proto na těchto elektrodách změřena kalibrační závislost pro fenylalanin v rozsahu 0,025 mmol dm-3 až 1,0 mmol dm-3 . Pro ověření funkčnosti a použitelnosti elektrod byl pro analýzu reálného vzorku využit doplněk stravy s obsahem lysinu, kdy...
|
|
|
Obsah biologicky aktivních látek v pěstovaných druzích rodu brusnice (Vaccinium)
CARDOVÁ, Michaela
Tato bakalářská práce zahrnuje poznatky o obsahu biologických látek u nejčastějších druhů rodu brusnice (Vaccinium) pěstovaných na území České republiky. Aktivní látky byly analyzované v druhu brusnice brusinka Vaccinium vitis-idaea v odrůdách Koralle, Runo bielawskie, Sanna, Sussi, Linnea a Ida. Polyfenoly jsou biomolekuly nacházející se v produktech rostlin a byly u nich prokázány antioxidační a protizánětlivé účinky in vivo i in vitro (Chiva-Blanch, 2017). V průběhu evoluce se u rostlin vyvinuly schopnosti ke tvorbě sekundárních fenolických metabolitů, které nijak nezasahovaly do jejich růstu a vývoje, ale byly životně důležité pro interakci s okolním prostředím, pro reprodukční strategii a ochranné mechanismy (Cheynier, 2013). Mezi polyfenoly patří například flavonoidy, např. kvercetin, a anthokyany, které jsou svým charakterem spíše ko-pigmenty. Další analyzovanou sloučeninou je vitamín C neboli tzv. askorbová kyselina. Tato sloučenina je jednoduchým nízkomolekulárním karbohydrátem. Jeho syntéza probíhá, jak u rostlin, tak u většiny živočichů (Lykkesfeldt, 2014). Vitamín C je skvělým antioxidantem, který chrání organismus před reaktivními formami kyslíku a stimuluje imunitní systém. Cílem tohoto výzkumu bylo zjistit množství kvercetinu, celkových anthokyanů a askorbové kyseliny v šesti vybraných odrůdách brusnice (viz výše). Samotné stanovení proběhlo pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) a stanovení celkových anthokyanů bylo provedeno na spektrofotometru pro určení jejich koncentrace, vypočítané pomocí naměřené absorbance ve vzorku. Podařilo se stanovit všechny tři zmíněné skupiny látky. Nejvyšších hodnot u celkových anthokyanů bylo analyzováno u druhu Sussi a to 617, ? 8,7 mg/kg. U druhu Sanna askorbová kyselina dosahovala hodnot 110, ? 1,4 mg/kg a byl zde také naměřen obsah kvercetinu v hodnotě 1019 ? 36 mg/kg v sušině.
|
host ::
RSS.