|
|
Paternal methamphetamine exposure - effect on the development of offspring
Mihalčíková, Lýdia ; Šlamberová, Romana (vedoucí práce) ; Cendelín, Jan (oponent) ; Riljak, Vladimír (oponent)
Úvod do problematiky: Drogová závislost a její vliv na chování a vývoj potomstva se v naší společnosti stává závažným problémem. Metamfetamin (MA) je považován za jednu z nejčastěji zneužívaných drog v České republice, jehož zneužívání roste i celosvětově. Předchozí studie prokázaly negativní účinky zneužívání drog matkami, a především jejich nepříznivý vliv na jejich potomky. Ovšem podíl otce jako rodiče a dárce poloviny genetické informace zůstává dosud neobjasněný. Cíle práce: Prvním cílem této studie je prozkoumat vliv dlouhodobého podávání MA na sexuální chování samců, jejich lokomoční aktivitu, spermatogenezi a hladinu testosteronu. Druhým cílem je prozkoumat vliv paternitní expozice MA na vývoj, chování, lokomoční aktivitu a sociální interakci u potkaních potomků. Metodika: MA byl podáván dospělým samcům denně po dobu 30 dní v dávce 5mg/kg subkutánně. Kontrolní skupině byl aplikován fyziologický roztok (SA) ve stejným objemu a ve stejný čas. Během pokusů bylo testováno 6-8 jedinců z každé skupiny. Potkaní mláďata byla testována na senzomotorický vývoj v průběhu postnatálních dnů (PD) 1-23. Adolescentní mláďata (PD 30) byla dále testována v testu sociální hry. V dospělosti byl testován vliv MA na hladinu testosteronu, spermatogenezu a sexuální chování samců. Lokomoční aktivita (Laboras test)...
|
|
|
Psychiatric-Relevant Impairments in Mouse Models of Spinocerebellar Ataxias
Tichánek, Filip ; Cendelín, Jan (vedoucí práce) ; Riljak, Vladimír (oponent) ; Zumrová, Alena (oponent)
Spinocerebelární ataxie (SCA) jsou heterogenní skupinou onemocnění charakteristických dysfunkcí mozečku a narušením pohybu. Mnoho pacientů s SCA ale trpí i narušením paměti a psychickými obtížemi, včetně apatie, deprese a úzkosti. Tyto problémy dále pacientům zhoršují kvalitu života a mohou i akcelerovat postup onemocnění. Jejich příčiny, včetně případného kauzálního vlivu narušené funkce mozečku, však nejsou jasné. Tato práce si klade se cíl přispět k pochopení povahy těchto potíží u SCA, a to prostřednictvím studia relevantních myších modelů. Práce tedy zahrnovala výzkum abnormalit chování a funkcí mozku u myší s čistě olivocerebelární degenerací (lurcher) a u knock-in myšího modelu spinocerebelární ataxie 1 (myši SCA1). Metodika zahrnovala komplexní behaviorální testování, histologické techniky, biochemické analýzy, imunofluorescenční zobrazování a měření mitochondriálního oxidativního metabolismu. Získaná data byla následně analyzována moderními statistickými přístupy se statistickými simulacemi. Experimenty potvrdily kognitivní deficity u myší lurcher i SCA1. U myší SCA1 experimenty odhalily řadu abnormalit v chování, které dosud nebyly u zvířecích modelů SCA nikdy popsány, včetně snížené prepulzní inhibice, poškození kognitivní flexibility a vyšší míry chování připomínající depresivní a...
|
|
|
Studium mechanizmů vzniku a rozvoje perinatální hypoxie
Laštůvka, Zdeněk ; Riljak, Vladimír (vedoucí práce) ; Cendelín, Jan (oponent) ; Vízek, Martin (oponent)
Perinatální hypoxie je souhrnné označení pro hypoxický inzult proběhlý v perinatálním období. Zvířecí modely v průběhu let úspěšně reprodukovaly hypoxické podmínky a prohloubily znalosti mechanizmů poškození mozku. Předním zástupcem je Rice-Vannucciho zvířecí model, který využívá jednostranný podvaz společné krkavice s následnou expozicí hypoxickému prostředí. Sedmidenní myší mláďata kmene C57BL/6NTac podstoupila jednostranný podvaz pravé společné krkavice a byla exponována hypoxickému inzultu pobytem v komoře s 8% obsahem kyslíku (modifikovaný Rice-Vannucciho model). Byly vytvořeny též experimentální skupiny s izolovaným podvazem pravé společné krkavice nebo izolovanou expozicí hypoxickému inzultu. Pro pozorování změn chování myší byl využit automatizovaný systém pro dlouhodobou observaci chování drobných hlodavců v laboratorních podmínkách s názvem LABORAS. Změny chování byly sledovány 60. postnatální den, a to v několika různých doménách chování. Pro účely histologické analýzy byly zkoumány následující oblasti mozku: kortex, oblasti CA1 a CA3 hipokampu, hilus gyrus dentatus, ventrální a dorsální list gyrus dentatus. Indukovaná hypoxie s ischemií vyvolaly podstatné behaviorální i morfologické změny, které vedly k výrazné poruše habituace a poruše schopnosti myší vyrovnávat se s novými podněty....
|
|
| |
|
|
Circadian clock in the hippocampus
Liška, Karolína ; Sumová, Alena (vedoucí práce) ; Riljak, Vladimír (oponent) ; Ježek, Karel (oponent)
Cirkadiánní systém se vyvinul jako mechanismus adaptace živých organismů na pravidelně se střídající podmínky na Zemi. Jedná se o systém vnitřních hodin, který je u savců řízen centrálním oscilátorem v suprachiasmatických jádrech (SCN) hypotalamu, jenž řídí periferní oscilátory, nacházející se v tkáních a orgánech těla. Synchronizace tohoto systému s vnějším prostředím umožňuje správné načasování fyziologických procesů včetně kognice a paměti v průběhu dne. V nedávné době byla popsána přítomnost periferních cirkadiánních hodin v oblastech mozku, jako je hipokampus (HPK), které se na těchto procesech podílí. Přesná úloha těchto oscilátorů a mechanismus jejich synchronizace s vnějšími podmínkami nicméně dosud nejsou známy. Cílem mé doktorské práce byla detailní analýza cirkadiánních hodin v HPK hlodavců. Naším záměrem bylo charakterizovat oscilátory v jednotlivých částech HPK, identifikovat signály zodpovědné za jejich synchronizaci a porovnat vlastnosti hodin v HPK s neneuronálním oscilátorem v choroidním plexu (CP), který se nachází v těsné blízkosti HPK. Naším dalším cílem pak bylo prozkoumat úlohu hodin v HPK a dalších oblastech mozku v procesu tvorby paměti, a to se zaměřením na paměť časovou. Nejprve jsme charakterizovali hodiny v jednotlivých částech HPK, a to jak in vivo, tak za použití nově...
|
|
|
Morfologické koreláty u modelu hypoxicko-ischemické encefalopatie u potkana
Slotta, Michal ; Otáhal, Jakub (vedoucí práce) ; Riljak, Vladimír (oponent)
Název: Morfologické koreláty u modelu hypoxicko-ischemické encefalopatie u potkana Cíle: Cílem výzkumu je vytvořit model hypoxicko-ischemické encefalopatie u potkana, který by představoval poškození v perinatálním období u člověka a následně histologickým zobrazením odlišit nejčastěji poškozené mozkové struktury. Metody: Jedná se o experimentální studii. U pěti laboratorních potkaních mláďat jsme vyvolali hypoxicko-ischemickou encefalopatii podle Rice-Vannucci modelu. Kontrolní skupina představující dalších pět potkaních mláďat podstoupila hypoxii po dobu 1,5 hodiny. Následně byla zvířata vrácena k matce. Po 48 hodinách následovala mozková perfuze, parafinizace, krájení mozků na řezy a nanesení řezů na podložní sklíčka. Řezy k znázornění morfologických změn a degenerace neuronů byly nabarvené Hematoxylin-Eosinem, Fluoro Jade B a imunohistochemicky. Řezy jsme následně pozorovali a hodnotili pod světelným mikroskopem. Výsledky: Po navození hypoxicko-ischemické encefalopatie u 7-denních potkaních mláďat došlo k poškození v oblasti zkoumaných struktur u dvou zvířat. Ostatní zvířata experimentální skupiny projevily jen mírné morfologické změny nervových buněk pozorovatelné na barvení H&E. Mozky mláďat kontrolní skupiny byly intaktní. Klíčová slova: nekróza, apoptóza, zvířecí model, poškození mozku
|
|
|
Motorické a kognitivní důsledky perinatálního hypoxicko-ischemického poškození
Pernicová, Alice ; Otáhal, Jakub (vedoucí práce) ; Riljak, Vladimír (oponent)
Autor: Bc. Alice Pernicová Název: Motorické a kognitivní důsledky hypoxicko-ischemického poškození Cíle: Cílem této práce je posouzení vlivu Enriched Environment na vývoj potkana, který prodělal hypoxicko-ischemické poškození. Metody: V této práci bylo testováno 30 potkanů rodu Long Evans z chovu Fyziologického Ústavu Akademie věd České republiky. Všichni potkani byli podrobeni operaci karotidy, kdy došlo k jejímu přerušení. Následně byla náhodným výběrem polovina potkanů podrobena hypoxicko- ischemickému poškození. Skupina s hypoxickým postižením byla rozdělena na kontrolní a experimentální skupinu, potkani bez poškození byli také rozděleni na experimentální a kontrolní skupinu. Po dobu jednoho týdne byli potkani z experimentálních skupin umístěni do speciálně vybavených klecí Enriched Environment. Následně byli přemístěni po menších skupinách do menších klecí vybavených Enriched Environment. Potkani z kontrolních skupiny byli umístěni v klecích bez speciálního vybavení. Po konkrétní době byli všichni potkani testováni baterií testů: Reaching test, Ladder rung walking test, Bar holding test, Rotarod test, Morris water maze, Open field test. Pro analýzu dat bylo využito programů Microsoft Excel 365, Sigma plot. Výsledky: Výsledky testů ukázaly, že prostředí Enriched Environment může pozitivně...
|
|
|
Funkční důsledky perinatální hypoxie-ischémie u potkana
Nováková, Eva ; Otáhal, Jakub (vedoucí práce) ; Riljak, Vladimír (oponent)
Název: Funkční důsledky perinatální hypoxie-ischémie u potkana Cíle: Cílem diplomové práce je sestavit sadu behaviorálních testů pro efektivní zhodnocení motorických a kognitivně-behaviorálních schopností dospělých zvířat po experimentálně vyvolaném hypoxicko-ischemickém inzultu v perinatálním období (P7). Předpokládaným přínosem této práce je etablovat model motorických a kognitivně-behaviorálních deficitů po prodělané perinatální hypoxicko-ischemické atace. Metody: Předložená práce má teoreticko-empirický charakter. Praktická část diplomové práce byla provedena formou experimentu. Do experimetnu bylo zahrnuto 32 potkanů kmene Long Evans. Potkani byli náhodně rozděleni na dvě skupiny: skupina experimentální (HIE) a kontrolní (Ctrl). Hypoxicko-ischemický inzult byl proveden u sedmidenních potkanů uzavřením pravé arterie carotis communis s následnou systémovou hypoxií 8% kyslíkem a 92% dusíkem. Dospělá zvířata (stáří 55-75 dní) byla testována pomocí behaviorálních testů. Vybrány byly tyto testy: Bar holding test, Rotarod test, Ladder rung walking test, Reaching test, Open field test and Morris water maze test. Pro analýzu a statistické vyhodnocení dat byly použity programy Sigma Plot a Microsoft Excel 2010. Výsledky: Na základě výsledků Open Field testu, Ladder rung walking testu a Morris water...
|
|
| |
|
|
Aktivace zániku neuronů neurotoxickými vlivy a její ovlivnění
Riljak, Vladimír ; Langmeier, Miloš (vedoucí práce) ; Kozler, Petr (oponent) ; Herink, Josef (oponent)
Using histochemical analysis (NADPH-diaphorase, Fluoro-Jade В dye and bisbenzimide 33342 Hoechst) we studied the influence of intraperitoneal administration of nicotine, kainic acid and combination of both these substances on hippocampal neurons and their changes. In experiments, 18- 25- and 35-day-old male rats of the Wistar strain were used. 30 minutes prior to the kainic acid application (10 mg/kg), animals were pre-treated with 1 mg/kg of nicotine. After 2 days, the animals were transcardially perfused with 4% paraformaldehyde under deep thiopental anaesthesia. Cryostat sections were stained to identify NADPH-diaphorase positive neurons that were then quantified in the CA1 and CA3 areas of the hippocampus, in the dorsal and ventral blades of the dentate gyrus and in the hilus of the dentate gyrus. Fluoro-Jade В positive cells were examined, in the same areas, to elucidate possibly neurodegeneration. Results have shown that nicotine administration brings about the increase of the density of NADPH-diaphorase positive neurons in CA1 and CA3 areas of the hippocampus and in the hilus of the dentate gyrus in 18-day-old animals, in 25-dayold animals in CA3 area of the hippocampus, hilus of the dentate gyrus and in the vevrtal blade of the dentate gyrus, in 35-day-old animals only in the CA3 area of the...
|
host ::
RSS.