|
|
Charakterizace nízkomolekulárních syntetických markerů izoelektrických bodů kapilární zónovou elektroforézou a kapilární izoelektrickou fokusací
Brandejsová, Martina ; Kašička, Václav (vedoucí práce) ; Kubíčková, Anna (oponent)
Vysokoúčinné elektromigrační separační metody, kapilární zónová elektroforéza (CZE) a kapilární izoelektrická fokusace (CIEF), byly použity pro fyzikálně-chemickou charakterizaci nově syntetizovaných nízkomolekulárních markerů izoelektrických bodů. Amfoterní sloučeniny na bázi aminomethylnitrofenolů, jejich derivátů a jiných strukturně příbuzných látek byly analyzovány metodou CZE v sérii základních elektrolytů v širokém rozmezí pH 1,86 - 11,18. Ze změřené závislosti efektivních elektroforetických pohyblivostí analytů na pH (předem korigovaných na referenční teplotu 25řC) byly odečteny jejich izoelektrické body (pI) a nelineární regresní analýzou byly u vybraných látek určeny acidobazické disociační konstanty jejich ionogenních skupin (pKa). Analyty s ostře definovanými izoelektrickými body byly následně analyzovány metodou CIEF, kterou byla prokázána použitelnost těchto analytů jako markerů izoelektrických bodů pro kalibraci pH gradientu v CIEF při určování pI amfoterních látek, zejména peptidů a bílkovin. Stanovené hodnoty pKa ionogenních skupin vybraných sloučenin budou využity při vývoji nových markerů izoelektrických bodů s požadovanými hodnotami pI.
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
|
Stanovení elektroforetické mobility alkalických kationtů v micelárních systémech
Müllerová, Ludmila ; Gaš, Bohuslav (vedoucí práce) ; Kašička, Václav (oponent)
Micelární elektrokinetická chromatografie (MEKC) je iroce pou ívaná analytická separa ní metoda. Pro dosa ení separace vyu ívá interakci analyt s nabitými micelami obsa enými v základním elektrolytu (BGE). P ítomnost nabitých micel ovliv uje nejen mobility analyt , ale i mobility malých anorganických iont , které jsou obvykle sou ástí BGE. Pochopení t chto interakcí je nezbytné ke zp esn ní model popisujících separace v BGE obsahujících micely. Ke stanovení fyzikáln chemických konstant (nap íklad interak ních konstant a mobilit komplex ) pomocí kapilární elektroforézy je t eba p esn ur it hodnoty efektivních mobilit. K tomu je nutné i p esné stanovení mobility elektroosmotického toku (EOF), to je ale v BGE obsahujícím nabité micely problematické, proto e m e docházet k interakci neutrálního EOF markeru s micelami a tím k jeho mobilizaci. V rámci této práce byla navr ena nová dvoudetektorová metoda stanovení efektivní mobility v BGE obsahujícím interagující slo ku. P i této metod se analyt nachází v BGE obsahujícím nabité micely, zatímco EOF marker je obklopen BGE bez micel a nem e tedy s micelami interagovat. Navr enou dvoudetektorovou metodou byly stanoveny mobility sodného kationtu v závislosti na koncentraci dodecylsulfátu lithného tvo ícího micely. Sou asn byly pou ity r zné zp soby zpracování...
|
|
| |
|
| |
host ::
RSS.