|
|
Optimalizace metody pro testování viability u vlasovky slezové
Mašátová, Eva ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Vokřál, Ivan (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Eva Mašátová Školitel: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Konzultant: Mgr. Linh Thuy Nguyen Název diplomové práce: Optimalizace metody pro testování viability u vlasovky slezové Vlasovka slezová (Haemonchus contortus) patří mezi celosvětově rozšířené patogenní hlístice z čeledi Trichostrongylidae parazitující ve slezu malých přežvýkavců, především u ovcí. Nejčastějším projevem hemonchózy je anémie, neprospívání a hubnutí. U mladých zvířat může dojít i k jejich úhynu. Významnou komplikací léčby hemonchózy je rychle se tvořící rezistence vlasovky slezové na podaná léčiva, a to je v posledních letech celosvětový problém. Tato práce byla zaměřena na testování účinnosti benzimidazolových anthelmintik (tiabendazol a albendazol) u třech kmenů vlasovky slezové, které se liší svojí citlivostí k léčivům. Pracovali jsme s kmeny: ISE (Inbred Susceptible Edinburgh) kmen - citlivý, IRE (Inbred Resistant Edinburgh) kmen - rezistentní a WR (White-River) kmen - multirezistentní. Ke sledování účinnosti léčiv a ke sledování míry rezistence bylo využito testování líhnutí vajíček (egg hatch test; EHT). Vajíčka jednotlivých kmenů se izolovala z trusu infikovaných ovcí, poté se inkubovala 48 hodin při teplotě 27 řC v roztoku o...
|
|
|
Využití nových ex vivo testů pro nalezení syntetických látek s anthelmintickým účinkem
Mičundová, Magdalena ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Magdalena Mičundová Školitel: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Využití nových ex vivo testů pro nalezení syntetických látek s anthelmintickým účinkem Vlasovka slézová (Haemonchus contortus) je parazitická hlístice způsobující nemoc haemonchózu u ovcí a koz. Tento celosvětové rozšířený parazit se živí krví hostitele, čímž způsobuje anémie a edémy, které mohou vést až k úmrtí zvířete. Pro léčbu haemonchózy se používají anthelmintická léčiva, která v poslední době přestávají být účinná v důsledku lékové rezistence hlístic. Proto je nezbytné hledat nová léčiva, která budou účinná i u rezistentních kmenů hlístic. V této práci byl zkoumán anthelmintický účinek 13 nových derivátů benzyloxyamidu (BLK) na vajíčkách a dospělcích H. contortus. Nejprve byl použit test líhnutí vajíček, v němž byla nejúčinnější sloučenina BLK8. Na dospělcích H. contortus byla pro sledování vlivu BLK analogů na viabilitu využita nová metoda bioluminiscenčního stanovení adenosintrifosfátu (ATP). Účinnost BLK analogů byla porovnána s účinkem klasického anthelmintika levamisolu. Z výsledků je zřejmé, že několik BLK analogů (zvláště BLK7, BLK8 a BLK12) signifikantně snižuje viabilitu dospělců H. contortus, a to jak...
|
|
|
Stanovení parametrů ovariální funkce
Jará, Barbora ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Laštovičková, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Název práce: Stanovení parametrů ovariální funkce Vedoucí práce: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Školitelka: RNDr. Michala Vosátková, MBA Vypracovala: Barbora Jará Hladiny hormonů řídících funkce ovarií jsou důležitými ukazateli vývoje i zdravotního stavu ženského organismu. Pro správné diagnostické postupy je důležité laboratorní vyšetření a správná interpretace výsledků. Z hormonů ovariálních funkcí je nejčastěji testována hladina estradiolu, progesteronu, luteinizačního a folikulostimulačního hormonu. Používají se separační a imunochemické metody. Pro běžnou klinickou praxi jsou imunochemické metody vhodné zejména svou dostupností, relativní přesností, nenáročností a rychlostí zpracování. Jejich nedostatkem je nemožnost standardizace jednotlivých metodických přístupů. Sérii vyšetření a interpretaci výsledků získaných pomocí imunochemických metod lze provádět pouze v rámci jednoho pracoviště. Klíčová slova: estradiol, imunochemické metody, ECLIA, CMIA, RIA
|
|
|
Optimalizace nového analytického systému pro vybrané biochemické a imunochemické metody
Dvořáková, Kristýna ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Kristýna Dvořáková Vedoucí diplomové práce: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Konzultant: Mgr. Martina Hrdinová Název diplomové práce: Optimalizace nového analytického systému pro vybrané biochemické a imunochemické metody Specifické požadavky na validaci a verifikaci analytických metod dle normy ČSN EN ISO 15189:2013 musí splňovat každá zdravotnická laboratoř. Cílem práce bylo vyhovět požadavkům verifikace při zavedení nového analytického systému Cobas 8000 a porovnat výsledky s těmi získanými na starším analyzátoru Cobas 6000 v laboratoři klinické biochemie. Pro analýzu biochemických a imunochemických metod jsme použili diagnostické soupravy od stejného dodavatele Roche s.r.o. Vybrané klinicko-biochemické markery jsme stanovili základními metodami s využitím spektrofotometrie, imunoturbidimetrie a elektrochemiluminiscence. V rámci verifikace metod jsme používali certifikovaný kalibrační a kontrolní materiál. Pro opakovatelnost a porovnatelnost metod jsme použili směsná séra pacientů. Verifikace a opakovatelnost metod jsme vyhodnotili pomocí programu Microsoft Excel. Výsledné nejistoty měření a variační koeficienty mezilehlé preciznosti jsme porovnali s maximálními hodnotami přijatelných rozdílů z...
|
|
|
Účinek thujonu a piperitonu na expresi biotransformačních enzymů v jaterních řezech.
Štětková, Lenka ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Lenka Štětková Školitel: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Účinek thujonu a piperitonu na expresi biotransformačních enzymů v jaterních řezech Monoterpeny jsou přírodní látky, které jsou široce rozšířené v silicích celé řady druhů rostlin. Thujon a piperiton jsou obsaženy v některých druzích rostlin a mohou být součástí potravinových doplňků a jiných rostlinných přípravků nebo potravin, kde slouží jako dochucovadla. Cílem této diplomové práce bylo zjistit, jak thujon a piperiton ovlivňují expresi vybraných biotransformačních enzymů z nadrodiny cytochromů P450, sulfotransferas a UDP-glukuronosyltransferas. Pro měření byly použity ultratenké jaterní řezy získané z jater 3 lidských dárců. Řezy byly inkubovány s thujonem nebo piperitonem v koncentracích 10 μM a 50 μM po dobu 24 hodin. Po inkubaci bylo kvantifikováno množství mRNA a proteinů vybraných enzymů. Získané výsledky vykazovaly značnou interindividuální variabilitu. Exprese CYP1A2 na úrovni mRNA byla signifikantně zvýšena po ovlivnění řezů thujonem (50 μM) a piperitonem (10 μM i 50 μM), avšak pouze u jednoho dárce. Účinkem piperitonu (50 μM) byla zvýšena mRNA pro UGT1A9 rovněž pouze u jednoho dárce. Zvýšení množství mRNA...
|
|
|
Využití nových ex vivo testů pro nalezení kapradin s anthelmintickým účinkem
Bednářová, Klára ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Klára Bednářová Školitel: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název: Využití nových ex vivo testů pro nalezení kapradin s anthelmintickým účinkem Haemonchus contortus patří mezi celosvětově rozšířené hlístice parazitující v gastrointestinálním traktu malých přežvýkavců. Hlístice způsobují onemocnění zvané hemonchóza. Typickým příznakem onemocnění je anémie vznikající v důsledku sání krve hlísticemi. S onemocněním se také snižuje produktivita a může docházet k úmrtí hostitele. Pro léčbu hemonchózy se využívá pouze několik léčiv, počet nově zavedených léčiv je nízký. V dnešní době je stále větším problémem vznikající rezistence na anthelmintika právě díky vysoké adaptibilitě H. contortus a také nesprávnému užívání syntetických léčiv. Syntetická léčiva znečišťují životní prostředí, i proto je snaha nalézt rostlinné produkty s anthelmintickým účinkem. U některých asijských a afrických kapradin byl prokázán anthelmintický účinek, proto jsme se rozhodli provézt testy na průkaz anthelmintické aktivity u evropských druhů kapradin. U vybraných druhů se testoval anthelmintický účinek proti hlísticím, konkrétně H. contortus s využitím testu líhnutí vajíček a bioluminiscenční analýzy ATP u dospělců. Kapradiny, které...
|
|
|
Epigenetické změny vyvolané obezitou a jejich dědičnost
Roušová, Lucie ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
Obezita, chronické onemocnění charakterizované ukládáním nadměrného množství tuku v těle, je příčinou vzniku mnoha dalších komorbidit. V posledních letech se toto onemocnění objevuje u čím dál mladších lidí. Na rozvoji obezity se podílí jak genetické, tak enviromentální faktory. Pojítkem mezi těmito faktory by mohly být epigenetické modifikace. Epigenetické změny jsou změny ve fenotypu člověka beze změny jeho genotypu. Tyto změny, mezi které se řadí methylace DNA a modifikace histonů, tedy ovlivňují expresi a funkci genů, beze změn sekvence DNA. Cílem mé rešeršní bakalářské práce bylo vyhledat, které epigenetické změny jsou spojeny s obezitou a jaké geny jsou takto ovlivněny. Zaměřila jsem se jak na změny, které obezita vyvolává, tak na změny, které zapřičiňují vznik obezity. Dále jsem se snažila najít informace o tom, zda jsou tyto modifikace genomu dědičné a kolik generací je jimi případně ovlivněno. Z dostupných informací je zřejmé, že existuje spoustu epigenetických modifikací, které jsou nějakým způsobem spojeny s obezitou. Například byly zjištěny změny v genech proopiomelanokortinu, tapsinu či inzulínu podobnému růstovému faktoru 2. Některé modifikace jsou spojeny s otcovskou obezitou (např. gen hypoxií indukovatelného faktoru 3 alfa), ale mnohem více jich vzniká v důsledku mateřské obezity,...
|
|
|
Vliv flubendazolu na podání temozolomidu v buňkách glioblastoma multiforme
Dvořáková, Kateřina ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Pávek, Petr (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Kateřina Dvořáková Školitel: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv flubendazolu na podání temozolomidu v buňkách glioblastoma multiforme Glioblastoma multiforme (GBM) je jedním z nejčastějších a nejagresivnějších nádorů mozku u dospělých. I přes značné pokroky v léčbě se jedná o nevyléčitelné nádorové onemocnění s velmi špatnou prognózou a s mediánem přežití pouze 12 až 15 měsíců od stanovení diagnózy. Zlatým standardem léčby je maximální možná chirurgická resekce následovaná chemo-radioterapií za použití protinádorového léčiva temozolomidu (TMZ). Problémem u použití TMZ však bývá rychle se rozvíjející rezistence. Cílem této práce bylo prozkoumat účinek potenciálního protinádorového léčiva, anthelmintika flubendazolu (FLU) a účinek FLU v kombinaci s TMZ na buňky GBM. Pro tuto práci byly použity dvě GBM buněčné linie - A172 a T98G. FLU obecně vykazoval vyšší efekt na životnost buněk GBM, zejména u buněk T98G. Navíc použití různých kombinací TMZ + FLU prokázalo ještě vyšší inhibiční účinek na životaschopnost buněčných linií GBM. Kombinace TMZ + FLU také snižovala expresi -tubulinu a III-tubulinu, zároveň byly pozorovány zajímavé změny v expresi STAT3 a EGFR a dále snížení exprese...
|
|
|
The effect of flubendazole and mebendazole on epithelial-mesenchymal transition.
Hochmalová, Martina ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Ambrož, Martin (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Martina Hochmalová Školiteľ: prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Konzultant: RNDr. Věra Králová, Ph.D. Názov diplomovej práce: Vplyv flubendazolu a mebendazolu na epitelálne- mezenchymálnu tranzíciu Epiteliálne-mezenchymálna tranzícia (EMT) je proces, kedy nepohyblivé epiteliálne bunky strácajú svoje epiteliálne charakteristiky a prechádzajú do pohyblivého mezenchymálneho stavu. Tento proces je typický pre rozličné nádorové procesy, vrátane nádorových metastáz. EMT je indukovaná najmä transformujúcim rastovým faktorom beta (TGF-β), ktorý je produkovaný nádorovými bunkami a reguluje transkripčné faktory, ktorými sú SNAIL, ZEB a TWIST. V rámci EMT prebiehajú aj zmeny bunkového povrchu a migrácia do okolitých tkanív, na ktorých sa podieľajú mikrotubuly.. Predpokladáme, že pri zablokovaní funkcie mikrotubulov, by bolo možné zabrániť EMT, následne migrácii buniek a vďaka tomu aj metastázovaniu nádorov. V našich in vitro experimentoch bol testovaný vplyv benzimidazolových anthelmintik flubendazolu (FLU) a mebendazolu (MBZ) na EMT indukovanú TGF-β v dysplastických orálnych keratinocytoch. Metódou RT-PCR sme sledovali zmeny expresie jednotlivých molekúl zahrnutých v procese EMT na úrovni mikroRNA a mRNA. Pomocou...
|
|
|
Nádorové markery
Karmazínová, Simona ; Dršata, Jaroslav (vedoucí práce) ; Skálová, Lenka (oponent)
Nádorová onemocnění jsou stará jako život sám, představují závažný celospolečenský problém a každý se s nimi už někdy setkal. Znečištěné prostředí a moderní způsob života zapříčinily, že na tyto civilizační choroby umíráme stále častěji. Nádorová onemocnění se mohou v určité formě objevit u všech vícebuněčných organismů a jejich známky byly nalezeny už u pravěkých lidí nebo u egyptských mumií. Samotné pojmenování "CANCER" pochází z antického Řecka. Laboratorní průkaz nádorového onemocnění se objevuje v odborné literatuře již v polovině 19. století. Ve stejném období dochází ke vzniku oboru klinická biochemie. V té době nebyla ještě k dispozici laboratorní technika a testování spočívalo v jednoduchých fyzikálně chemických reakcích. K velkému rozmachu studia a vyšetřování nádorových markerů dochází až ve druhé polovině 20. století. V dnešní době může stanovovat nejběžnější nádorové markery téměř každá biochemická laboratoř. Téma mé práce "Nádorové markery" je velmi široké, každá jednotlivá kapitola by si zasloužila být samostatným tématem, a tak má diplomová práce ani zdaleka nepředstavuje podrobný rozbor jednotlivých nádorových markerů, případně metod jejich stanovení. Mým cílem je poskytnout stručný přehled nejčastějších nádorových onemocnění a s tím souvisejících nádorových markerů, v...
|
host ::
RSS.