|
|
Úloha lidských papilomavirů v etiopatogenezi zhoubných nádorů sinonazální krajiny
Sieglová, Kateřina ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Petera, Jiří (oponent)
Cílem této diplomové práce je komparace imunohistochemických a molekulárně biologických metod pro detekci lidských papilomavirů (HPV) v nádorové tkáni s jejich následným využitím při studiu HPV v etiopatogenezi zhoubných nádorů sinonasální krajiny. Z množství metod používaných k detekci lidských papilomavirů byla vybrána in situ hybridizace, imunohistochemická detekce exprese proteinu p16INK4a , klasická polymerázová řetězová reakce v kombinaci se dvěma detekčními metodami a to enzymoimunoanalýzou a reverzní hybridizací, dále pak polymerázová řetězová reakce v reálném čase a reverzní transkripce. V porovnání všech metod užitých k detekci HPV byla zjištěna velice dobrá shoda, kde všechny prováděné metody vykazovali vzájemnou korelaci p˂0,0001 (p16, DNA in situ hybridizace, RNA in situ hybridizace, kvantitativní polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí (RT- qPCR) mRNA) až na metodu detekce p16 vs. DNA polymerázovou řetězovou reakcí (PCR), jejichž korelační koeficient dosáhl p=0,004 v celém souboru, respektive p=0,002 v souboru dlaždicobuněčného karcinomu. Lze tedy k detekci HPV s výhodou využít detekci p16 imunohistochemicky v kombinaci s detekcí mRNA pomocí RT-qPCR, jež poskytne informaci jak o vlivu HPV na buněčný cyklus, tak i o jeho transkripční aktivitě a typu. Výše zmíněnými metodami...
|
|
|
Effects of obesity and sleeve gastrectomy on fungiform papillae in a model of Wistar rat
Zadražilová, Jana ; Němečková, Ivana (vedoucí práce) ; Nachtigal, Petr (oponent)
Jana Zadražilová Vliv obezity a tubulizace žaludku na houbovité papily u potkanů Wistar Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Obezita se stala celosvětovým problémem, v jejímž rozvoji hrají významnou roli vnímání chutí a výběr potravy. Nejúčinnější léčbou morbidně obézních pacientů je bariatrická operace. V naší pilotní studii jsme se snažili stanovit vliv obezity, vyvolané vysokokalorickou stravou, a tubulizace žaludku (SG) na histologickou stavbu jazyka potkanů a zvláště pak jejich efekt na změny v počtu houbovitých papil (FP). V pokusu byli použiti samci potkanů kmene Wistar. Obezita byla navozena podáváním vysokotukové stravy. Poté vybrané skupiny zvířat podstoupily SG nebo sham operaci. Jako kontrolní skupiny byli použiti potkani jak na vysokotukové dietě tak potkani na standardní laboratorní dietě. Po šestnácti týdnech byla zvířata usmrcena a bylo provedeno histologické hodnocení jazyka. Největší počet FP (průměr: 5.11 ± 1.45) byl u vysokotukovou stravou induko- vaných obézních potkanů, kteří poslední 4 týdny experimentu dostávali stravu vyváže- nou. Nejméně FP (průměr: 3.38 ± 1.45) bylo nalezeno u potkanů, kteří byli krmeni stravou s vysokým obsahem tuku po celou dobu pokusu a kteří ve třináctém týdnu podstoupili SG. Mezi skupinami nebyl...
|
|
|
Sledování exprese vybraných markerů funkce endotelu u myší s vysokými hladinami solubilního endoglinu
Škodová, Sabina ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Blažíčková, Kateřina (oponent)
Bc. Sabina Škodová Sledování exprese vybraných markerů funkce endotelu u myší s vysokými hladinami solubilního endoglinu. Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Odborný pracovník v laboratorních metodách Cíl práce: Cílem této diplomové práce bylo popsat změny exprese endotelové NO syntázy a ICAM-1 ve stěně aorty u myší s nízkou a vysokou hladinou solubilního endoglinu (Sol- Eng+). Snahou bylo tedy porovnání exprese obou markerů jak z hlediska intenzity, tak z hlediska plochy barvení. K tomuto účelu jsme použili imunohistochemické metody s detekcí ve fluorescenčním mikroskopu. Metody: Ke studii byly použity transgenní myši s vysokými hladinami lidského solubilního endoglinu (Sol-Eng+ ). Samice myší byly od svých šesti měsíců věku krmeny dietou bohatou na tuky, která obsahovala 1,25% cholesterolu a 40% tuku (Research Diets, Inc, USA). Touto dietou byly myši krmeny následující tři měsíce. Stejně staré samice myši ze stejného vrhu s nízkou hladinou solubilního endoglinu v plazmě byly použity jako kontrolní skupina. Exprese eNOS a ICAM-1 byla na řezech aorty myší stanovena pomocí fluorescenční imunohistochemie. Výsledky: Imunohistochemická analýza prokázala slabou expresi eNOS u obou skupin myší, a to pouze na cévním endotelu. Exprese ICAM-1 byla velmi podobná...
|
|
|
Farmakologické ovlivnění aterogeneze u experimentálních zvířecích modelů ateroskleózy
Rathouská, Jana ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Vrablík, Michal (oponent) ; Vohnout, Branislav (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Kandidát: Mgr. Jana Rathouská Školitel: Doc. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Název disertační práce: Farmakologické ovlivnění aterogeneze u experimentálních zvířecích modelů aterosklerózy Ateroskleróza je pozvolný zánětlivý proces v arteriální stěně, jenž je jako součást kardiovaskulárních chorob hlavním zdrojem morbidity a mortality vyspělého světa. Hledání možností léčby aterosklerózy však vyžaduje nejprve detailní poznání patogeneze samotného onemocnění. Jednu z možností studia patogeneze aterosklerózy nabízí využití myších modelů, které umožňují řadu intervencí, jež by v humánní medicíně byly neakceptovatelné. Užitím diety s vysokým obsahem lipidů jsme schopni pružně navodit změny lipidového spektra u myší, přičemž cílenou genetickou manipulací může být navíc dosaženo značně pokročilých plátů v relativně krátkém časovém horizontu. Rovněž lze u myších modelů do procesu aterogeneze s výhodou zasáhnout podáním některých hypolipidemik, například léčiv ze skupiny statinů, které byly v našich studiích reprezentovány atorvastatinem. Sledováním reaktivity cévy na podání atorvastatinu pak získáme další údaj (kromě vlivu na hladiny lipidů), který může poodhalit některé účinky statinu na lipidech...
|
|
|
Toll-like receptory při bakteriálních infekcích
Svobodová, Barbora ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Hrnčíř, Tomáš (oponent)
Bc. Barbora Svobodová Toll-like receptory při bakteriálních infekcích Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Odborný pracovník v laboratorních metodách Cíl práce: Stanovení aktivace a exprese toll-like receptorů 2, 4, 5 a 9 pomocí polymerázové řetězové reakce v reálném čase a western blottingem (WB). Zavedení metody WB na pracovišti Mikrobiologického ústavu AV ČR, v.v.i. v Novém Hrádku. Metody: 1) Optimalizace metody WB - extrakce proteinů, měření koncentrace proteinů, elektroforéza, western blotting, imunodetekce proteinů. 2) 4 skupiny gnotobiotických selat: kontrolní bezmikrobní skupina (GF), skupina infikovaná bakterií Salmonella enterica sérovar Typhimurium kmen LT2 (LT2), skupina infikovaná kmenem Escherichia coli O55 (O55) a skupina kolonizovaná Escherichia coli Nissle 1917 (EcN). 3) Real-time PCR - izolace celkové RNA, spektrofotometrické stanovení koncentrace a odhad čistoty RNA, syntéza cDNA, real- time PCR, normalizace a relativizace dat z real-time PCR. Výsledky: Optimalizovali jsme WB detekci TLR5 v tkáňových homogenátech ilea a mezenteriálních lymfatických uzlin. Otestovali jsme protilátky proti prasečím TLR2, 4 a 9. V ileu skupiny EcN byla zvýšena exprese mRNA TLR5 a TLR9. U skupiny O55 nebyl nalezen statisticky významný rozdíl v expresi...
|
|
|
Arteriální hypertenze a její vztah k rozvoji aterosklerózy
Evlogimenou, Theodosia ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Hronek, Miloslav (oponent)
Tato práce se zabývá arteriální hypertenzí ve vztahu s aterosklerózou, kde lidé s vysokým krevním tlakem mají větší pravděpodobnost vzniku ischemické choroby srdeční. Obě nemoci jsou pro život nebezpečné. Podstatou této práce je posoudit a analyzovat, v první části arteriální hypertenzi, poté budeme zkoumat vše o ateroskleróze a v poslední fázi budeme analyzovat vztah mezi nimi. Závěrem posuzování hypertenze a aterosklerózy je způsob jejich léčby, zahrnuje užívání léků, dávkování a vše co se týká lékové terapie. Do této diplomové práce lze také zahrnout prevenci a řízení hypertenze a aterosklerózy.
|
|
|
AIDS známe tohle onemocnění?
Kopová, Martina ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Jílek, Petr (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd AIDS známe tohle onemocnění? Bakalářská práce Martina Kopová Vedoucí práce: doc. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Cíl práce: Bakalářská práce AIDS se skládá ze dvou částí. V teoretické části bylo mým úkolem provést rešerši stávajících poznatků o problematice AIDS. V experimentální části práce jsem provedla průzkum o informovanosti mladých lidí ve věku 15 -16 let o nákaze HIV resp. onemocnění AIDS. Výzkum jsem řešila formou anonymních dotazníků, které obsahovaly 18 otázek. Otázky jsem zaměřila na znalosti studentů o infekci a jejich přístup k této problematice. Průzkum jsem prováděla na čtyřech středních školách v Hradci Králové. Výsledky: Z výsledků vyplynulo, že informovanost o problematice HIV/AIDS u 247 studentů na středních školách v Hradci Králové je 60, 2 %. Výsledky na jednotlivých typech škol se moc neliší. Závěr: HIV infekce a následné onemocnění AIDS se neustále šíří. Ke snížení počtu nakažených by mohlo dojít, pokud by se zvýšila v celém světě prevence a informovanost o způsobu přenášení nákazy. Klíčová slova: AIDS, HIV, sexuálně přenosná choroba, dotazník
|
|
|
Exprese P-selektinu v arteria brachiocephalica během aterogeneze
Kadlecová, Magda ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Blažíčková, Kateřina (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Exprese P-selektinu v arteria brachiocephalica během aterogeneze Diplomová práce Magda Kadlecová Vedoucí práce: doc. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Cíl práce: Sledovali jsme expresi P-selektinu v arteria brachiocephalica u apoE/LDL-receptor deficientních myší, které byly krmeny dietou s vysokým obsahem proteinů a nízkým obsahem cukrů. Metody: Pro tuto práci byly použity apoE/ LDLR-/- myší samice rozdělené do dvou skupin po 6 zvířatech. Jedna skupina (kontrolní) byla krmena standardní stravou (AIN-93G), druhá skupina byla následujících 8 týdnů krmena stravou s nízkým obsahem cukrů a vysokým obsahem proteinů (LCHP - low-carbohydrate, high-protein). Imunohistochemická detekce P- selektinu byla realizována pomocí Avidin-biotin metody (ABC) s detekčním činidlem diaminobenzidinem (DAB). Výsledky: U myší krmených LCHP dietou prokázala biochemická analýza významné zvýšení hladin cholesterolu oproti myším krmeným kontrolní dietou. Imunohistochemické barvení odhalilo, že P-selektin se exprimuje u všech pozorovaných myší jen na cévním endotelu, intenzivnější zbarvení pak bylo na endotelu aterosklerotických plátů. Aterosklerotické pláty byly téměř u všech myší v LCHP skupině oproti kontrolní skupině, tam u...
|
|
|
Vliv bilirubinu na progresi nespecifických střevních zánětů.
Patková, Anna ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Hronek, Miloslav (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Vliv bilirubinu na progresi nespecifických střevních zánětů Diplomová práce Anna Patková Vedoucí práce: doc. PharmDr. Petr Nachtigal, Ph.D. Cíl práce: Nespecifické střevní záněty, mezi které řadíme především Crohnovu nemoc a ulcerózní kolitidu, jsou chronické záněty střev, na jejichž patogenezi se pravděpodobně podílí genetická predispozice a faktory vnějšího prostředí. Předpokládá se, že tkáňové poškození je do jisté míry způsobeno také oxidačním stresem. Jak hemoxygenáza-I, tak bilirubin jsou silnými antioxidanty a poskytují protizánětlivý účinek. Cílem této diplomové práce bylo popsat změny exprese HO-I v tlustém střevě normobilirubinemických a hyperbilirubinemických potkanů po indukci akutní či chronické experimentální kolitidy. Metody: Pro tuto práci byli použiti potkani kmene Gunn s vrozeným defektem UDP- glukuronyltransferázy, který je příčinou vzniku hyperbilirubinemie. Kontrolní skupinu tvořili heterozygotní sourozenci těchto potkanů, u nichž jsou hladiny sérového bilirubinu v normě. Všem zvířatům byl podáván dextran sulfát sodný za účelem vyvolání experimentální kolitidy. Potkani byli rozděleni do dvou skupin, z nichž každá obsahovala hyperbilirubinemické i normobilirubinemické jedince....
|
|
|
Atherosclerosis, statins and fibrates treatment benefits
Vechtsalis, Sotiris ; Nachtigal, Petr (vedoucí práce) ; Rathouská, Jana (oponent)
Cílem diplomové práce je analýza aterosklerózy a její spojitost s kardiovaskulárním onemocněním. Také opatření proti rozvoji aterosklerotické léze a jejími následnými komplikacemi. Budou uvedeny aspekty, jako jsou diagnóza, patogeneze a změna endotelu, a s nimi spojené komplikace a klinické projevy. Budou analyzovány farmakologické látky/léčiva bránící rozvoji tohoto onemocnění s látkami/léčivy proti dyslipidémii - která je jedním z hlavních rizikových faktorů rozvoje aterosklerózy - je centrem pozornosti tohoto příspěvku je. V dalších kapitolách bude popsán nový pohled na prevenci a léčbu aterosklerózy používající statiny a fibráty, analýza výhod a toxicity jednotlivých statinů, a také možnosti přínosů a rizik při jejich kombinaci.
|
host ::
RSS.