|
|
Inhibiční účinek anthokyanidinů na jaterní karbonylreduktasu
Hlaváčová, Jitka ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Jitka Hlaváčová Školitel: Prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Inhibiční účinek anthokyanidinů na jaterní karbonylreduktasu Karbonylreduktasa (CBR) je redukční enzym, jenž hraje významnou roli v první fázi biotransformace endogenních i exogenních substrátů. Podílí se na detoxikaci mnoha xenobiotik, mezi nimi i důležitých léčiv. Rozdíly v expresi a aktivitě jaterních biotransformačních enzymů mohou ovlivnit efektivitu a bezpečnost léčby. Cílem této práce bylo porovnat aktivitu a expresi CBR u starých a mladých jedinců, stanovit inhibiční vliv vybraných anthokyanidinů na aktivitu CBR u lidí a potkanů a pro nejsilnější inhibitory určit hodnotu IC50 a typ inhibice. U starých potkanů byla zjištěna významně vyšší aktivita CBR než u mladých potkanů a také se u nich projevila větší interindividuální variabilita. Při měření aktivity CBR u lidských vzorků nebyly zjištěny signifikantní rozdíly v souvislosti s věkem. Anthokyanidiny vykazovaly mírný až středně silný inhibiční vliv na CBR. U lidí byl enzym nejsilněji inhibován delfinidinem (IC50 = 16 µM) a u potkanů pelargonidinem (IC50 = 23 µM). Delfinidin působil jako nekompetitivní inhibitor CBR, zatímco u pelargonidinu byl zjištěn smíšený...
|
|
|
Klonování, exprese a purifikace vybraného mykobakteriálního enzymu
Švidrnochová, Michaela ; Novotná, Eva (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Řešitel: Michaela Švidrnochová Školitel: Mgr. Eva Novotná, Ph.D. Název diplomové práce: Klonování, exprese a purifikace vybraného mykobakteriálního enzymu Mycobacterium tuberculosis produkuje řadu enzymů, které jsou pro její růst a přežití nezbytnou součástí. Inhibice enzymů, účastnících se biosyntéz řady významných molekul bakterie, se stává potenciálním cílovým místem nových látek v léčbě tuberkulózy. Naftoátsyntasa je mykobakteriální enzym účastnící se biosyntézy menachinonu, který má zásadní význam pro elektronový transportní řetězec v anaerobním prostředí. Naftoátsyntasa (menB) patří do krotonové nadrodiny proteinů, katalyzuje přeměnu o-sukcinylbenzoyl-CoA (OSB-CoA) na 1,4-dihydroxy-2-naftoyl-CoA (DHNA-CoA). K přípravě rekombinantního proteinu menB byl použit plazmid pET-28b(+) a úsek DNA, kódující sekvenci menB, namnožený polymerázovou řetězovou reakcí. Zaligovaný plazmid byl transformován do buněk E.coli HB101 metodou tepelného šoku. Pro expresi byly použity expresní buňky E.coli BL21 a vlastní exprese byla indukována přidaním IPTG. Připravený protein byl izolován a přečištěn přístrojem Äkta, který vyžívá metod afinitní chromatografie.
|
|
|
Hledání a testování nových inhibitorů vybraného mykobakteriálního enzymu
Komrsková, Jitka ; Novotná, Eva (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Jitka Komrsková Školitel: Mgr. Eva Novotná, Ph.D. Název diplomové práce: Hledání a testování nových inhibitorů mykobakteriálního enzymu Mycobacterium tuberculosis zůstává i nadále jedním ze smrtících patogenů, které jsou hrozbou pro celý svět. Efektivní léčba sice existuje v podobě kombinace antituberkulotik, nicméně je velmi zdlouhavá a ne vždy úspěšná, neboť se velkým problémem posledních let stávají i multirezistentní formy tuberkulózy a také koinfekce virem HIV. Proto se stává v současnosti téměř nutností nalézt nové antituberkulotikum, které bude účinné proti rezistentním kmenům mykobakterií a zároveň také při léčbě HIV. Za potenciální terč mykobakterií se považuje enzym isocitrátlyasa, který hraje klíčovou roli v glyoxylátovém cyklu, kde katalyzuje přeměnu isocitrátu na sukcinát a glyoxylát. Tento enzym mykobakterie vyžadují zejména pro přežití během akutní fáze infekce. Cílem této práce je stanovit, zda S-benzylisothiosemikarbazony a flavonoidy inhibují aktivitu enzymu isocitrátlyasy a mohou se tak stát potenciálními novými antituberkulotiky. V naší studii byla spektrofotometricky stanovena aktivita tohoto enzymu na základě množství vzniklého glyoxylátu po proběhlé enzymatické reakci v...
|
|
|
Stanovení a monitorování kardiomarkerů u akutního koronárního syndromu
Kopecká, Magda ; Dršata, Jaroslav (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Unverzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Autor: Kopecká Magda Studijní program: Zdravotnická bioanalytika Název práce: Stanovení a monitorování kardiomarkerů u akutního koronárního syndromu Druh práce: Bakalářská práce Vedoucí bakalářské práce: prof. MUDr. Jaroslav Dršata, CSc. Cíl práce: Cílem práce je charakterizovat akutní koronární syndrom, poskytnout přehled základních charakteristik biomarkerů, které mají význam pro klinické užití v diagnostice a monitorování pacientů s akutním koronárním syndromem, především s akutním infarktem myokardu, podat informaci o jejich racionálním využití, objasnit možnosti a principy jednotlivých stanovení a v neposlední řadě pojednat o problematice správného ordinování požadavků na vyšetření jednotlivých kardiomarkerů. ABSTRACT Assessment and monitoring of cardio-markers in acute coronary syndrome. - The aim of the thesis is to characterize an acute coronary syndrome, provide an overview of basic biomarker characteristics, which are important for clinical application in diagnostics and monitoring of patients with an acute coronary syndrome, primarily an acute heart attack, provide information about their rational utilization, clarify the possibilities and principles of particular assessments and also address the issue of proper...
|
|
|
Obnova zaniklých cest- tratí mezi Moravou a Dolním Rakouskem
Chlupová, Jana ; Matoušková, Petra (oponent) ; Žalmanová, Petra (vedoucí práce)
Práce se zabývá obnovou zrušené železniční cesty mezi Hevlím a Laa an der Thaya. Obnova nádraží v Hevlíně je rozdělena na jednotlivé etapy. V první fázi se jedná o rekonverzi secesní výpravní budovy na muzeum. V další etapě proběhne vybudování nástupiště s úpravou nádražních ploch. Důležitým momentem v této fázi je vybudování zastřešení budoucí výpravní budovy, které bude fungovat jako místo pro letní kulturní akce anebo trh. Na nádraží vznikne nová funkce, která využívá potenciálu jinak volné plochy nástupiště. V poslední závěrečné etapě dostavěním obvodových stěn výpravní budovy začne stavba fungovat jako plnohodnotná zastávka. Společně s realizací mostu se obnoví propojení mezi Hevlínem a Lávou a tím i další propojení mezi Brnem a Vídní. Cílem práce je obnova sousedských vztahů mezi Dolním Rakouskem a jižní Moravou.
|
|
|
Vyhledání referenčních genů pro relativní kvantifikaci mRNA z Haemonchus contortus
Růžičková, Michaela ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Zemanová, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Michaela Růžičková Školitel: Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Název diplomové práce: Vyhledání referenčních genů pro relativní kvantifikaci mRNA z Haemonchus contortus Haemonchus contortus je parazitická hlístice, jejíž multirezistence k anthelminti- kům je celosvětovým problémem ohrožujícím hlavně chovy malých přežvý- kavců. V roce 2013 byl publikován její genom a transkriptom, což umožnilo rozsáhlý výzkum genové exprese. Referenční geny pro tyto studie prozatím ne- byly stanoveny. Použití vhodných referenčních genů je nezbytné pro správnou normalizaci hladin exprese genů. Cílem této práce bylo navrhnout a zhodnotit potenciální referenční geny pro studie genové exprese u dospělců H. contortus. Navrženo bylo 11 genů, stabilita jejich exprese byla hodnocena na samcích a sa- micích dvou kmenů H. contortus, jednoho na anthelmintika vnímavého (ISE) a druhého multirezistentního (WR). Z jedinců byla extrahována RNA, přepsána reverzní transkripcí do cDNA. Tato byla zředěna a analyzována kvantitativní real-time PCR s detekcí pomocí SYBR Green I. Stabilita exprese byla hodnocena počítačovými programy BestKeeper, geNorm, NormFinder a komparativní CT metodou. Nejstabilnějšími geny se jeví ncbp, ama, sodc, gapdh a...
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
|
Re-interpretace vzdělávacího prostředí
Hamrník, Ondřej ; Matoušková, Petra (oponent) ; Mléčka, Jan (vedoucí práce)
Transformace v systému veřejného vzdělávání probíhá v současné době po celém vyspělém světě, všichni si jsou vědomí toho že pouze klasický způsob jakým je vedena výuka už nám do buducna stačit nebude. Namísto návrhu stavby nové jsem vybral stavbu která slouží potřebám vzdělávání téměř stopadesát let. Tou stavbou je byskupské gymnásium v hradci králové.
|
host ::
RSS.