|
|
Vliv vybraných prenylflavonoidů na účinek cytostatik v nádorových buňkách
Pešková, Klára ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Skálová, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Klára Pešková Školitel: Ing. Petra Matoušková Ph.D. Název diplomové práce: Vliv vybraných prenylflavonoidů na účinek cytostatik v nádorových buňkách Prenylflavonoidy 6-prenylnaringenin a 8-prenylnaringenin a flavonoid naringenin jsou látky s antiproliferačními vlastnostmi. Prenylflavonoidy najdeme především v chmelu a v pivu. Hlavním zdrojem naringeninu jsou především citrusové plody. V této práci byl jejich účinek testován pomocí testu neutrální červeně na buněčných liniích SW480 a SW620. Látky byly testovány na každé linii samostatně a poté každá v kombinaci s cytostatikem oxaliplatinou. Oxaliplatina se používá v léčbě nádorových onemocnění. V testovaných koncentracích se jako nejúčinnější jevil 6-prenylnaringenin u obou buněčných linií. Statistické vyhodnocení výsledků bylo provedeno pomocí programu Graphpad metodou One-way ANOVA v porovnání s kontrolou. Kombinační indexy byly určeny v programu Compusyn metodou dle Chou-Talalay.
|
|
|
Stanovení vybraných mikroRNA-potenciálních biomarkerů kardiotoxicity
Vernerová, Andrea ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Hanušová, Veronika (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Andrea Vernerová Vedoucí: Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Název diplomové práce: Stanovení vybraných mikroRNA - potenciálních biomarkerů kardiotoxicity Kardiotoxicita je vlastnost některých léčiv, které svým působením poškozují srdce. Sledování potenciálních biomarkerů kardiotoxicity by mohlo mít pozitivní vliv na eliminaci toxického působení léčiv na srdeční tkáň. A proto, v současné době, stále vzrůstá zájem o mikroRNA (miRNA) jako potenciální biomarkery kardiotoxicity. MiRNA je velmi stabilní krátká nekódující RNA, která má schopnost post-transkripčně regulovat genovou expresi. Podle bioinformatických analýz mohou miRNA regulovat více než polovinu lidských genů. V různých studiích se ukázaly miRNA jako mnohem specifičtější a rychlejší diagnostické biomarkery oproti troponinům. MiRNA jako biomarkery ještě nejsou zavedeny v rutinní klinické praxi. Zatím všechny studie o miRNA jsou v procesu hledání a optimalizace metod. V mé diplomové práci byly sledovány vybrané miRNA pro detekci kardiotoxicity doxorubicinu (DOX) in vivo u myších vzorků srdeční tkáně a in vitro na potkaních kardiomyocytech. Z biologických vzorků byla provedena izolace RNA a reverzní transkripce, kde bylo využito Stem-loop RT primeru....
|
|
|
Genetické markery pro sledování posttransplantačního chimerismu
Řehounková, Michaela ; Beránek, Martin (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Michaela Řehounková Školitel: doc. PharmDr. Martin Beránek, Ph.D. Název diplomové práce: Genetické markery pro sledování posttransplatačního chimerismu Cíle práce: Zpracování dat pacientů, kteří prodělali alogenní transplantaci krvetvorných buněk v letech 2010 až 2014 ve Fakultní nemocnici Hradec Králové a jejich chimerismus byl sledován na Úseku molekulární biologie v Ústavu klinické biochemie a diagnostiky. Po zpracování dat se studoval možný vztah mezi vybranými klinickými parametry a použitými genetickými markery k vyšetření chimerismu. Na závěr se zhodnotily vlivy vybraných parametrů na úspěšnost léčby a úmrtnost v potransplantačním období. Metody: Pro vyšetření potransplantačního chimerismu byla použita metoda vyšetření lokusů krátkých tandemových repetic (STR), která využívá genetické variability mezi dárcem a příjemcem transplantovaného štěpu. DNA dárce a příjemce je izolována pomocí kolonkové soupravy QIAmp DNA Blood Mini Kit (QIAGEN, SRN), k amplifikaci se využívá souprava AmpFlSTR Identifier Kit (Applied Biosystems, USA) a k separaci kapilární elektroforéza (analyzátor ABI 3130-4, Applied Biosystems, USA) Závěr: Mezi nejinformativnější patřily markery D21S11, D2S1338, THO1, FGA a...
|
|
|
Vliv monepantelu na expresi vybraných enzymů u vlasovky slezové
Jelenková, Klára ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Raisová Stuchlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Klára Jelenková Školitel: Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv monepantelu na expresi vybraných enzymů u vlasovky slezové Vlasovka slezová (Haemonchus contortus) je parazitická hlístice, která je původcem hemonchózy, celosvětově rozšířeného onemocnění malých přežvýkavců způsobujícího pokles produktivity a v mnoha případech i úmrtí zvířat. Pro prevenci a léčbu tohoto onemocnění jsou dlouhodobě využívaná léčiva - anthelmintika. Vlivem jejich častého používání a nedostatku inovací v této skupině farmak si na ně parazité postupně vybudovali rozsáhlou rezistenci. Novou nadějí v terapii hemonchóz je monepantel, léčivo ze skupiny derivátů aminoacetonitrilu s jedinečným mechanismem účinku uvedené na trh po více než 25 letech od registrace posledního léčiva ze skupiny anthelmintik. I přes počáteční velký úspěch se v posledních letech stále častěji objevují informace o výskytu rezistence na toto léčivo. Současné poznatky o mechanismech rozvoje rezistence a faktorech, které ji ovlivňují, jsou stejně jako informace o působení léčiv na molekulární úrovni stále nedostatečné. Pro omezení rozvoje rezistence v budoucnosti je důležité tyto vědomosti intenzivně rozvíjet. V této práci byl zkoumán...
|
|
| |
|
|
Působení alfa-humulenu a karyofylenoxidu na ovariální nádorové buňky
Žáková, Kateřina ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Svobodová, Hana (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Kateřina Žáková Školitel: Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Název diplomové práce: Působení alfa-humulenu a karyofylenoxidu na ovariální nádorové buňky. Seskviterpeny α-humulen a β-karyofylenoxid jsou látky s antiproliferační aktivitou vůči mnoha nádorovým buněčným liniím. V této práci byl antiproliferační účinek α-humulenu a β-karyofylenoxidu testován metodou NRU jak samostatně, tak v kombinaci s doxorubicinem. Na doxorubicin citlivá buněčná linie A2780 byla vůči působení doxorubicinu i seskviterpenů citlivější než linie SKOV3, přirozeně doxorubicin-rezistentní. Pro stanovení vzájemných interakcí seskviterpenů s doxorubicinem byl použit softwarový program CalcuSyn pracující na základě metody Chou-Talay. Byly stanoveny kombinační indexy seskviterpenů s doxorubicinem. Oba seskviterpeny působily na doxorubicin v linii A2780 antagonisticky a v linii SKOV3 synergisticky. Mechanismus antiproliferativního účinku všech tří testovaných látek je ovlivnění produkce ROS. Pro stanovení prooxidačních účinků látek byla použita metoda DCF. Výsledky ukázaly dobré prooxidační vlastnosti doxorubicinu, který zvyšoval produkci ROS v obou testovaných buněčných liniích. Seskviterpeny vykazovaly pouze slabé prooxidační účinky...
|
|
|
Koimunoprecipitace jako nástroj pro studium interakcí DHRS7 enzymu s proteiny
Fassmannová, Dominika ; Zemanová, Lucie (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Dominika Fassmannová Školitel: RNDr. Lucie Zemanová, Ph.D. Název diplomové práce: Koimunoprecipitace jako nástroj pro studium interakcí enzymu DHRS7 s proteiny DHRS7 enzym je člen nadrodiny enzymů dehydrogenáz/reduktáz s krátkým řetězcem. Enzym se in vitro chová jako NADPH-dependentní reduktáza s katalytickou aktivitu pro některé endogenní sloučeniny obsahující karbonylovou skupinu, zahrnující androstendion nebo trans-retinal. Vykazuje také úzkou homologii s enzymem 11β-hydroxysteroiddehydrogenáza 1. Fyziologická funkce DHRS7 je zatím neznámá a úroveň poznání enzymu velmi nízká. V poslední době se objevují informace o roli DHRS7 v některých onemocnění, např. v rakovině prostaty nebo v inzulínové rezistenci. Role málo charakterizovaného enzymu DHRS7 může být poodhalena na základě znalosti jeho interakčních partnerů, protože proteiny v buňce obvykle nepracují samy, ale jsou součástí obrovského proteinového komplexu, označeného jako "interactome". Poznání takových interakcí nám pomáhá porozumět funkci a regulaci proteinů uvnitř buněk nebo organismu. Cílem této studie je výzkum proteinů interagujících s DHRS7 pomocí metody koimunoprecipice. Imunoprecipitace byla zavedena s využitím dostupné protilátky...
|
|
|
Influence of TNF-α on hENaC subunits expression
Martan, David ; Svobodová, Hana (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Universität Wien Fakultät für Lebenswissenschaften Department für Pharmakologie und Toxikologie Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: David Martan Školitelé: Prof. Dr. Rosa Lemmens-Gruber, PharmDr. Hana Bártíková, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv TNF-α na expresi podjednotek hENaC Lidský amilorid-senzitivní epiteliální sodíkový kanál (hENaC) je typem iontového kanálu, který má schopnost kontrolovat solnou a vodní homeostázu. Z toho důvodu je hlavní hybnou silou pro reabsorpci vody v alveolárním epitelu. Dysfunkce tohoto kanálu, respektive tohoto mechanismu, vede k velmi vážné chorobě - plicnímu edému. V předchozích studiích byla testována droga AP301 (nedávno pojmenovaná solnatid). AP301 je cyklický protein zahrnující sekvenci lektinu podobné domény lidského tumor nekrotizujícího faktoru. Tato droga byla nedávno vyvinuta jako potenciální lék proti plicnímu edému. Principem je aktivace lidského epiteliálního sodíkového kanálu pomocí zvýšení pravděpodobnosti jeho otevření. Také bylo dokázáno, že AP301 přechodně zvyšuje expresi tohoto kanálu v buňkách savců. V této studii jsme použili metodu Western blot k testování vlivu tumor nekrotizujícího faktoru α (TNF-α) na expresi podjednotek kanálu hENaC a tyto výsledky jsme porovnali s výsledky...
|
|
|
Vliv ivermektinu na dospělce vlasovky slézové
Mertová, Ivana ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Vokřál, Ivan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Ivana Mertová Školitel: Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv ivermektinu na dospělce vlasovky slézové Helmintóza je onemocnění způsobené paraziticky žijícími hlísticemi, mezi které patří i vlasovka slezová (Haemonchus contortus - H. contortus), způsobující hemonchózu. Jedná se o vážné onemocnění, poškozující chovy malých přežvýkavců, neboť způsobuje ztrátu produktivity zvířat, oslabení chovů a v konečném důsledku smrt zvířat. V boji s touto nemocí jsou široce využívána anthelmintika, s jejichž častým používáním v minulé i současné době došlo k rozvoji helmintorezistence. Rezistence na látky s anthelmintickou aktivitou se stává kvůli svému nárůstu celosvětovým problémem, a proto je vyvíjena snaha o poznání mechanismů rezistence a přispívajících faktorů, díky kterým by bylo možno předcházet vzniku a rozšiřování rezistence. Jednou z nejpoužívanějších látek v terapii veterinárních helmintóz zůstává dodnes ivermektin (IVE). Jedná se o makrocyklický lakton, jehož mechanismus účinku pravděpodobně spočívá v poškození chloridových kanálů glutaminergních synapsí parazita. V této práci byl sledován vliv IVE na dospělce H. contortus ze dvou kmenů: kmene citlivého, tzv. ISE (Inbred...
|
|
|
Gene expression analysis of selected UDP-glucosyltransferases from Haemonchus contortus
Janura, Michal ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Mgr. Michal Janura Školitel: Ing. Petra Matoušková, PhD. Název rigorózní práce: Stanovení exprese mRNA vybraných UDP-glukosyltransferas u parazita Haemonchus contortus Hemonchóza je jednou z nejzávažnějších parazitárních onemocnění u malých přežvýkavců způsobena parazitem Haemonchus contortus (vlasovka slézová). Rezistence na anthelmintika způsobuje problémy v léčbě této nemoci a zvyšuje náklady na její léčbu. Při účinné terapii proti rezistentním parazitům by se zlepšila ekonomická situace v zemědělství. Mechanizmy způsobující rezistenci u H. contortus jsou pořád nedostatečně známé. Rezistentní H. contortus je schopen produkovat mnohem víc glukózových konjugátů benzimidazolového anthelmintika albendazolu (ABZ) než citliví jedinci. V genomu H. contortus bylo identifikováno více než 40 genů pro UDP-glukosyltransferázy (UGT), které disponují širokou rozmanitostí v této rodině enzymů. Táto práce je část systematického výzkumu zaměřeného na stadium UGT enzymů, kterými je ABZ detoxifikován. Pro zjištění, který z UGT enzymů způsobuje zvýšený metabolismus ABZ se analyzovaly mRNA hladiny 8 vybraných genů z dospělých jedinců rezistentního kmene H. contortus pomocí real-time PCR, které se následně...
|
host ::
RSS.