Název: Rekombinantní exprese a studium receptoru dendritických buněk DCL-1
Překlad názvu: Recombinant expression and studies on DCL-1, receptor of dendritic cells
Autoři: Pospíšilová, Eliška ; Bezouška, Karel (vedoucí práce) ; Novák, Petr (oponent)
Typ dokumentu: Bakalářské práce
Rok: 2010
Jazyk: cze
Abstrakt: [cze] [eng]
Rekombinantní exprese a studium receptoru dendritických buněk DCL-1 Eliška Pospíšilová Univerzita Karlova v Praze, Přírodovědecká fakulta, Katedra biochemie ABSTRAKT Dendritické buňky, vyskytující se v hojném počtu téměř ve všech tkáních, na svém povrchu exprimují C-lektinový receptor DCL-1 (CD302). Tato molekula se řadí k transmembránovým receptorům první třídy, což znamená, že N-terminální část, na které se nachází signální sekvence a doména typu C-lektinů vázající sacharidové struktury (CTLD), je lokalizována extracelulárně, zatímco C-terminální část, která obsahuje potenciální fosforylační místa a signální sekvenci pro intracelulární transport, se nachází v cytosolu. Jelikož je sekvence tohoto proteinu v rámci všech savců vysoce konzervovaná, lze usuzovat na jeho důležitou fyziologickou úlohu. Přesto je tato molekula stále málo prozkoumaná. Tato práce se zabývá extracelulární částí receptoru DCL-1, především úsekem obsahujícím CTLD. Abychom se o této molekule více dozvěděli, byl na základě předchozích zkušeností laboratoře vybrán vhodný produkční systém, zahrnující bakteriální buňky E. coli BL21 (DE3) Gold, které produkují cílený protein ve formě inkluzních tělísek do cytoplasmy. Dále byly optimalizovány podmínky in vitro renaturace a analytickými metodami bylo zkontrolováno, zda je protein v dostatečně... Recombinant expression and studies on DCL-1, receptor of dendritic cells Eliška Pospíšilová Charles University in Prague, Faculty of Science, Department of Biochemistry ABSTRACT Dendritic cells, which could be found in large numbers in many tissues, exprime C-type lectine receptor DCL-1 (in CD nomenclature CD302) on their surface. This molecule belongs to the class one transmembrane proteins. N-terminal sequence a C-type lectin-like domain (CTLD) it has on the extracellular side. Whereas the C-terminus, which contains potential phosphorylation site and signals for intracellular transport, is in the cytosol. As the sequence of this protein is highly conserved through all mammalian species, it is likely to play an important role in the immune system. Despite this fact, the DCL-1 molecule is still poorly investigated. This work deals with the extracellular part - especcially with the CTLD containing part - of the DCL-1 receptor. To learn more about this molecule, we attempted its recombinant expression in bacteria. We used pET-30a(+) based vector pDCL1E, and bacterial cells E. coli BL21 (DE3) Gold, which produced the target protein in the form of inclusion bodies into the cytoplasm. Therefore conditions for in vitro renaturation were optimalized, and it was prooved that the protein had native conformation...
Klíčová slova: C-lektiny; DCL-1; dendritické buňky; C-type lectins; DCL-1; dendritic cells

Instituce: Fakulty UK (VŠKP) (web)
Informace o dostupnosti dokumentu: Dostupné v digitálním repozitáři UK.
Původní záznam: http://hdl.handle.net/20.500.11956/39661

Trvalý odkaz NUŠL: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-491025


Záznam je zařazen do těchto sbírek:
Školství > Veřejné vysoké školy > Univerzita Karlova > Fakulty UK (VŠKP)
Vysokoškolské kvalifikační práce > Bakalářské práce