Název:
Vývoj opsonofagocytárního testu pro měření funkční aktivity protilátek proti Bordetella pertussis
Překlad názvu:
Development of an opsonophagocytic assay for the measurement of functional antibody activity against Bordetella pertussis
Autoři:
Brázdilová, Ludmila ; Bumba, Ladislav (vedoucí práce) ; Dráber, Peter (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2019
Jazyk:
eng
Abstrakt: [eng][cze] The Gram-negative pathogen bacterium Bordetella pertussis is the infectious agent causing pertussis or whooping cough. The infection is dangerous to infants, often being deadly if untreated. Since whole-cell pertussis vaccines have been replaced by acellular pertussis vaccines, pertussis has become the most prevalent vaccine-preventable disease in developed countries. Therefore, the development of a new generation of pertussis vaccines has become a high priority. Opsonophagocytic assays are one method used to assess the efficacy of new vaccines. The main objective of the thesis is to develop opsonophagocytic killing and uptake assays for the measurement of functional antibody activity against Bordetella pertussis. Neutrophils from mice and humans were isolated by three different methods and used for the assessment of different human and mouse sera in opsonophagocytic killing and uptake assays. Different experimental conditions were tested, including multiplicity of infection and serum dilutions. The opsonophagocytic uptake assay proved to discriminate between naïve and immune sera. Serum from mice vaccinated with the whole-cell pertussis vaccine enhanced opsonophagocytic uptake of B. pertussis cells into neutrophils, while serum from mice immunized with the acellular pertussis vaccine did not....Gram-negativní bakterie Bordetella pertussis je pathogen způsobující onemocnění zvané pertuse nebo černý kašel. Infekce je zvláště nebezpečná pro kojence a pokud není léčena, může být pro ně až smrtelná. Po zavedení acelulární pertusové vakcíny místo celobuněčné dochází k nárůstu případů onemocnění a pertuse je v rozvinutých zemích nejrozšířenější nemoc, jíž lze předejít očkováním. Z toho důvodu je důležitý vývoj nové generace vakcín a stoupá i důležitost metod vyhodnocujících účinnost vakcín. Měření opsonofagocytických procesů je jedna z metod využívaná k vyhodnocení odpovědi na vakcinaci. Hlavní cíl této práce je vývoj opsonofagocytických testů, které měří pohlcení částic a zabíjení mikroorganizmů pro měření funkčních vlastností protilátek proti Bordetella pertussis. Myší a lidské neutrofily byly izolovány třemi různými metodami, jejich opsonofgocytická aktivita byla porovnána a byly použity pro zhodnocení lidských a myších sér v opsonofagocytických testech. Různé experimentální podmínky opsonofagocytických testů byly testovány, včetně různých poměrů fagocytických buněk k bakteriálním buňkám a různých ředění sér. Opsonofagocytický test rozlišil naivní od imunizovaného séra. Sérum z myší vakcinovaných celobuněčnou vakcínou zvýšilo účinnost fagocytózy, kdežto to z myší vakcinovaných acelulární...
Klíčová slova:
Bordetella pertussis; neutrofil; opsonofagocytoza; protilatka; vakcina; antibody; Bordetella pertussis; neutrophil; opsonofagocytosis; vaccine