Název:
Myosin-PIP2 interakce v buněčném jádře
Překlad názvu:
Myosin-PIP2 interaction in the cell nucleus
Autoři:
Yildirim, Sükriye ; Hozák, Pavel (vedoucí práce) ; Černý, Jan (oponent) ; Forstová, Jitka (oponent) Typ dokumentu: Disertační práce
Rok:
2013
Jazyk:
eng
Abstrakt: [eng][cze] Even though nuclear myosin 1 (NM1) and myosin 1C (Myo1C) are the products of the same gene, NM1 has additional 16 amino acids at the N-terminus due to alternative start of transcription. Studies claim that NM1 and Myo1C are nuclear and cytoplasmic proteins, respectively. Therefore, researchers thought that NM1 translocates into nucleus via nuclear localization signal (NLS) in its N-terminal extension. However, here we show that NLS is placed within second IQ domain where calmodulin (CaM) binds in a calcium- dependent manner. Since both NM1 and Myo1C have identical neck domains where NLS resides, we have confirmed that both myosin isoforms localize to nucleus. Based on findings indicating Myo1C binding to phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate (PIP2) via its tail domain, we tested if NM1 and Myo1C can interact with PIP2 in the nucleus. We show that both isoforms can bind to PIP2 via their tail domains, and interactions with PIP2 can recruit other nuclear proteins into this lipo-protein complex. PIP2 makes complex with a subset of Pol I transcription and processing machinery proteins and modulate their functions in the nucleolus. Moreover, PIP2 depletion results in a dramatic loss of Pol I transcription activity. NM1 and actin were already shown to promote Pol I transcription. Here, we show that...SOUHRN Přestože jaderný myosin 1 (NM1) a myosin 1C (Myo1C) jsou produkty stejného genu, jejich struktura není stejná. Díky alternativnímu startu transkripce obsahuje NM1 navíc 16 aminokyselin na N-konci. Podle dosavadních vědeckých studií je Myo1c lokalizován v cytoplasmě, zatímco NM1 je přítomen v jádře buněk. Proto byla za jaderný lokalizační signál (NLS) považována právě N-terminální extenze NM1. V této práci ovšem ukazujeme, že NLS je obsažena ve druhé IQ doméně, která váže kalmodulin (CaM) v závislosti na hladině vápníku. Vzhledem k tomu, že NLS je obsažen v doméně, která je společná pro NM1 i Myo1C, obě izoformy jsou schopny lokalizovat do buněčného jádra, což jsme experimentálně prokázali. Je známo, že Myo1C v cytoplasmě váže fosfatidylinositol 4,5-bisfosfát (PIP2) ocasní doménou. Testovali jsme, zda NM1 a Myo1c mohou interagovat s PIP2 v jádře. Zjistili jsme, že obě izoformy vážou PIP2 ocasem a tato interakce umožňuje vazbu dalších jaderných proteinů do tohoto lipoproteinového komplexu. PIP2 vytváří komplex s proteiny účastnícími se transkripce polymerasou I (Pol I) a následného úpravy rRNA. Kromě toho byl pozorován významný pokles v transkripční aktivitě Pol I po snížení hladiny PIP2. NM1 a aktin jsou z literatury známy jako proteiny podporující transkripci. Z našich experimentálních dat vyplývá,...
host ::
