|
|
Izolace alkaloidů druhu Geissospermum vellosii Allemão a studium jejich biologické aktivity VI.
Váňová, Lucie ; Šafratová, Marcela (vedoucí práce) ; Chlebek, Jakub (oponent)
Lucie Váňová: Izolace alkaloidů druhu Geissospermum vellosii Allemão a studium jejich biologické aktivity VI. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2022. Klíčová slova: kůra, Geissospermum vellosii Allemão, alkaloidy, preparativní TLC, GC-MS, NMR, (+)-19,20-dehydrotubifolidin, aspidolimidin, geissoreticulatin, inhibiční aktivita, AChE, BuChE, Alzheimerova choroba Cílem této diplomové práce byla izolace alespoň tří alkaloidů v čisté formě z frakce GV-5, která pocházela z kůry jihoamerického stromu Geissospermum vellosii Allemão. Z této frakce se pomocí preparativní tenkovrstvé chromatografie (TLC) získalo 9 podfrakcí (GV-5-A až GV-5-I). Ty, které se vyznačovaly dostatečnou hmotností, byly následně podrobeny dalšímu dělení. Přečištěním pomocí preparativní TLC byly izolovány tři alkaloidy v čisté formě, a to konkrétně: GV-5-B-3-A, GV-5-C-4-C, GV-5-C-2-B-1. Získané obsahové látky byly poté analyzovány prostřednictvím plynové chromatografie s hmotnostní spektrometrií (GC-MS) a nukleární magnetické rezonance (NMR). Pomocí porovnání získaných spekter s dostupnými daty a literaturou, byly získané alkaloidy identifikovány jako: (+)-19,20-dehydrotubifolidin (GV-5-B-3-A), aspidolimidin (GV-5-C-4-C) a...
|
|
|
Screening biologické aktivity různých druhů rodu Narcissus sp. I
Komendová, Karolína ; Suchánková, Daniela (vedoucí práce) ; Chlebek, Jakub (oponent)
Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky Kandidát: Karolína Komendová Školitel: PharmDr. Daniela Hulcová, Ph.D. Název diplomové práce: Screening biologické aktivity různých druhů rodu Klíčová slova: Amaryllidaceae, Alkaloidy čeledi Amaryllidaceae jsou dodnes jedny z nejvýznamnějších vanějších alkaloidů vůbec. Je tomu tak díky jejich strukturní rozmanitosti a širokému spektru biologických účinků. Hlavním cílem této práce bylo získat sumární extrakty alkaloidů čerstvých cibulí sedmi různých kultivarů rodu a najít kultivary s největším potenciálem inhibovat acetylcholinesterasu (AChE) či butyrylcholinesterasu (BuChE). Těchto účinků se hojně využívá právě v léčbě Alzheimerovy choroby. Sumární extrakty byly získány následujících kultivarů: - - - - - - - Získané sumární extrakty byly dále podrobeny GC/MS analýze. Analýza ukáz většině extraktů přítomnost následujících alkaloidů: galanthamin, galantin, haemanthamin, lykorin, lykoramin, krinin, narcissidin, hippeastrin a dalších. U každého extraktu byla stanovena také inhibiční aktivita vůči AChE a BuChE Ellmanovou metodou za použití rekombinantních enzymů. Výsledné hodnoty byly porovnány s referenčními látkami Nejvyšší inhibiční aktivitu vůči AChE vykazovaly tyto kultivary: Apotheose (84,24 %), %) a Hungarian...
|
|
|
Alkaloids of Papaver rhoeas L. (Papaveraceae) and their biological activity related to Alzheimerʼs disease IV.
Gergely, Eszter ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Hradiská Breiterová, Kateřina (oponent)
Gergely, E.: Alkaloidy Papaver rhoeas L. (Papaveraceae) a ich biologická aktivita vzťahujúca sa na Alzheimerovu chorobu IV. Diplomová práca, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2022, počet strán 61. Spojený chloroformový alkaloidový extrakt vňate Papaver rhoeas L. (Papaveraceae) vykazoval významnú inhibičnú aktivitu voči ľudskej butyrylcholínesteráze (IC50hBuChE = 3,94 ± 0,35 µg/ml) [1,2]. hBuChE je jedným z kľúčových enzýmov hrajúcich rolu v patogenéze Alzheimerovej choroby. Hlavnými cieľmi tejto práce bola izolácia čistých alkaloidov pomocou tzv. bio-guided assay, využitím flash chromatografie a preparatívnej TLC, objasnenie ich štruktúr (pomocou MS, NMR a optickou otáčavosťou) a určenie ich biologickej aktivity pomocou Ellmanovej spektrofotometrickej metódy. Bola vypočítaná pravdepodobnosť prechodu izolovaných molekúl cez hematoencefalickú bariéru (HEB) pomocou logBB. Potenciálna cytotoxicita najaktívnejšej molekuly bola preverená na deviatich rakovinových bunkových líniách a jednej nerakovinovej línii MRC-5. Izolovaný identifikovaný alkaloid (+)-kaverín vykazoval sľubnú selektívnu inhibičnú aktivitu voči hBuChE (IC50hBuChE = 4,09 ± 0,50 µM a IC50hAChE > 100 µM) a mal by ochotne prechádzať pasívnou difúziou...
|
|
|
Biologická aktivita alkaloidů z Peganum harmala L. a jejich semisynteticky připravených derivátů I.
Víchová, Barbora ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Křoustková, Jana (oponent)
1 ABSTRAKT Víchová Barbora: Biologická aktivita alkaloidů z Peganum harmala L. a jejich semisynteticky připravených derivátů I. Diplomová práce 2022. Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmakognosie a farmaceutické botaniky. β-Karbolinové alkaloidy jsou přírodní látky s potencionálním využitím v terapii nádorů. Zejména pak harmin, který působí cytotoxicky hned několika mechanismy. Cílem této diplomové práce bylo připravit N9-substituované deriváty harminu, objasnit jejich strukturu na základě běžných spektrometrických a spektroskopických metod (ESI, ESI-MS, NMR) a následně změřit jejich biologickou aktivit (cytotoxicitu, inhibice AChE, BChE a GSK-3β). Z těchto testů vzešlo hned několik aktivních derivátů, vhodných kandidátů k dalšímu detailnějšímu studiu. 9-N-(2-nitrobenzyl)harmin (HMA-22) působil výrazně cytotoxicky vůči buněčné linii Jurkat (16% viabilita buněk po 48 hodinách v porovnání s kontrolou, výraznější cytotoxicita než standard doxorubicin při koncentraci 1 µM. Další velice aktivním derivátem byla sloučenina 9-N-(5-bromopentyl)harmin (HMA-30), který působil cytotoxicky na většinu testovaných buněčným linii lépe než doxorubicin (1 µM) a většina ostatních derivátů, zároveň byl HMA-30 shledán i silným inhibitorem BChE (IC50 4,06 ± 0,48 µM). 9-N-(4- nitrobenzyl)harmin...
|
|
|
Biologická aktivita alkaloidů z Peganum harmala L. a jejich semisynteticky připravených derivátů II.
Fejtková, Martina ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Cahlíková, Lucie (oponent)
Fejtková Martina: Biologická aktivita alkaloidů z Peganum harmala L. a jejich semisynteticky připravených derivátů II. Diplomová práce 2022. Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky. Tato diplomová práce se věnuje přípravě semisyntetických derivátů alkaloidu harminu a studiu jejich biologické aktivity. Z podfrakce PH-F1 alkaloidního extraktu byl izolován a pomocí preparativní tenkovrstvé chromatografie dočištěn alkaloid harmin. Inkorporací různých substituentů do polohy N9 harminu byla chemickou reakcí připravena řada semisyntetických derivátů. Pro účely této diplomové práce bylo připraveno 17 derivátů, které byly následně identifikovány na základě LC-MS, ESI-HRMS a NMR analýzy. Po ověření totožnosti a čistoty derivátů byla studována jejich biologická aktivita. U připravených látek byl testován jejich inhibiční vliv vůči lidské acetylcholinesterase (AChE), lidské butyrylcholinesterase (BuChE), glykogen syntase kinase 3β (GSK-3β) a dále byla měřena jejich cytotoxická aktivita na vybraných nádorových a leukemických liniích a jedné zdravé buněčné linii. Některé připravené deriváty vykázaly zajímavý selektivní inhibiční potenciál vůči lidské BuChE, nejaktivnějším derivátem byl 9-N-(4-isopropylbenzyl)harmin (IC50 BuChE 2,50 ± 0,78 μM)....
|
|
|
Alkaloidy Papaver rhoeas L. (Papaveraceae) a jejich biologická aktivita vztažená k Alzheimerově chorobě III.
Bučková, Anna ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Suchánková, Daniela (oponent)
Alkaloidy Papaver rhoeas L. (Papaveraceae) a jejich biologická aktivita vztažená k Alzheimerově chorobě III. ABSTRAKT Bučková, A.: Alkaloidy Papaver rhoeas L. (Papaveraceae) a jejich biologická aktivita vztažená k Alzheimerově chorobě III.; Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2022, počet stran 59 Tato diplomová práce se zabývá separací spojeného výtřepku (CHCl3 +EtOAc + I- ) Papaver rhoeas L. flash chromatografií a následnou izolací alkaloidů z vybraných frakcí preparativní TLC. Objasnění struktury izolovaných látek probíhalo na základě spektrometrických a spektroskopických metod (MS, NMR a optické otáčivosti). Alkaloidy byly identifikované jako (+)-rhoeadin, (+)-rhoeagenin a (+)-isorhoeagenin. Po objasnění struktury byly alkaloidy testovány in vitro na schopnost inhibovat enzymy hrající roli v patogenezi Alzheimerovy choroby (acetylcholinesterasa, butyrylcholinesterasa a prolyloligopeptidasa). Na základě získaných výsledků se studované alkaloidy jeví jako neaktivní vůči vybraným enzymům (hodnoty IC50 > 100 µM). Klíčová slova: Papaver rhoeas, Papaveraceae, Alzheimerova choroba, acetylcholinesterasa, butyrylcholinesterasa, prolyloligopeptidasa
|
|
|
Izolace alkaloidů druhu Geissospermum vellosii Allemão a studium jejich biologické aktivity VI.
Váňová, Lucie ; Šafratová, Marcela (vedoucí práce) ; Chlebek, Jakub (oponent)
Lucie Váňová: Izolace alkaloidů druhu Geissospermum vellosii Allemão a studium jejich biologické aktivity VI. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2022. Klíčová slova: kůra, Geissospermum vellosii Allemão, alkaloidy, preparativní TLC, GC-MS, NMR, (+)-19,20-dehydrotubifolidin, aspidolimidin, geissoreticulatin, inhibiční aktivita, AChE, BuChE, Alzheimerova choroba Cílem této diplomové práce byla izolace alespoň tří alkaloidů v čisté formě z frakce GV-5, která pocházela z kůry jihoamerického stromu Geissospermum vellosii Allemão. Z této frakce se pomocí preparativní tenkovrstvé chromatografie (TLC) získalo 9 podfrakcí (GV-5-A až GV-5-I). Ty, které se vyznačovaly dostatečnou hmotností, byly následně podrobeny dalšímu dělení. Přečištěním pomocí preparativní TLC byly izolovány tři alkaloidy v čisté formě, a to konkrétně: GV-5-B-3-A, GV-5-C-4-C, GV-5-C-2-B-1. Získané obsahové látky byly poté analyzovány prostřednictvím plynové chromatografie s hmotnostní spektrometrií (GC-MS) a nukleární magnetické rezonance (NMR). Pomocí porovnání získaných spekter s dostupnými daty a literaturou, byly získané alkaloidy identifikovány jako: (+)-19,20-dehydrotubifolidin (GV-5-B-3-A), aspidolimidin (GV-5-C-4-C) a...
|
|
|
Screening of selected alkaloids of Fumariaceae and Amaryllidaceae families on Farnesoid X receptor and the G protein-coupled bile acid receptor 1
Hutníková, Miriama ; Pávek, Petr (vedoucí práce) ; Chlebek, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študent/ka: Miriama Hutníková Školiteľ: prof. PharmDr. Petr Pávek, PhD. Názov diplomovej práce: Skríning aktivity vybraných alkaloidov z čeľadí Fumariaceae a Amaryllidaceae na Farnezoidný X receptor a Receptor žlčových kyselín spojený s G proteínom 1 Farnesoidní X receptor (FXR) a receptor žlučových kyselin spojený s G proteinem 1 (TGR5) výrazně ovlivňují metabolické děje v lidském organismu. Byla objevena i role FXR při neuronální apoptóze u Alzheimerovy choroby (AD). Možná strukturní podobnost malých lipofilních molekul vážících se na tyto receptory a alkaloidů vyskytujících se v rostlinách Corydalis cava a Narcissus pseudonarcissus, a zároveň bohaté využití těchto rostlin v lidové medicíně, představuje potenciální terapeutický cíl těchto molekul. V našich skríningových metodách jsme provedli testy pomocí luciferázové genové reportérové eseje na určení schopnosti zkoumaných alkaloidů interagovat s FXR a TGR5 receptory v buněčné linii HepG2. Mnoho derivátů prokázalo silnou schopnost antagonizovat FXR a TGR5 aktivovaný kyselinou obeticholovou (OCA), resp. litocholovou (LCA) v této eseji. Naopak některé testované látky prokázaly schopnost potencovat účinky OCA nebo LCA. Testy na cytotoxicitu byly provedeny k...
|
|
|
Ovlivnění kinas uplatňující se v patogenezi Alzheimerovy choroby.
Polzerová, Iveta ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Polzerová, I: Ovlivnění kinas uplatňující se v patogenezi Alzheimerovy choroby. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2016, 91 s. Tato rešeršní diplomová práce čerpá především ze zahraniční odborné literatury. Poskytuje přehled dosud prozkoumaných přírodních látek z mořských organismů vykazujících inhibiční kinasovou aktivitu. Úvodní kapitola Alzheimerova choroba popisuje charakteristiku choroby, etiopatogenezi, rizikové faktory a současnou dostupnou léčbu. Na začátku druhé kapitoly jsou zmíněny nové perspektivní přístupy terapie Alzheimerovy choroby. Větší část této kapitoly se zabývá kinasami jako potenciálními terapeutickými cíli v terapii Alzheimerovy choroby. Jsou zde uvedeny fyziologické a patofyziologické funkce GSK-3β a CK-1δ v organismu a zmíněny jsou zde i další kinasy, které se podílejí na patogenezi nemoci. Další oddíl se věnuje analytickým metodám vhodným k testování aktivity a inhibice kinas in vitro a in silico, zabývá se souhrnem syntetických kinasových inhibitorů a popisuje jejich vlastnosti. V této kapitole je uvedena také stěžejní část práce - ucelený přehled dosud prozkoumaných přírodních produktů z mořských organismů s inhibiční kinasovou aktivitou. Tato část je rozdělena...
|
|
|
Alkaloidy Narcissus 'Dutch Master' (Amaryllidaceae) a jejich biologická aktivita III.
Rýdlová, Kateřina ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Cahlíková, Lucie (oponent)
Rýdlová Kateřina: Alkaloidy Narcissus 'Dutch Master' (Amaryllidaceae) a jejich biologická aktivita III. Diplomová práce 2017. Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie. Cílem této práce byla izolace obsahových látek z přidělené frakce ND 3 - 5, která byla připravena sloupcovou chromatografií alkaloidního extraktu z Narcissus 'Dutch Master'. Příprava alkaloidního extraktu a sloupcová chromatografie byla provedena Mgr. Danielou Hulcovou v rámci její doktorské práce. Pomocí sloupcové a preparativní TLC chromatografie byly z frakce ND 3 - 5 získány 2 látky v čistém stavu NDM-1 a NDM-2. Pomocí NMR, GC-MS analýzy, optické otáčivosti a porovnáním získaných údajů s literaturou byly tyto struktury určeny jako (+)-masonin a (+)-homolykorin. Izolované alkaloidy byly následně testovány na inhibiční aktivitu vůči lidské erytrocytární acetylcholinesterase, plazmatické butyrylcholinesterase a prolyloligopeptidase. Aktivita alkaloidů byla vyjádřena jako IC50: (+)-masonin (IC50 AChE = 305 ± 34 μM, IC50 BuChE = 229 ± 24 μM, IC50 POP = 314 ± 34 μM), (+)-homolykorin (IC50 AChE = 63,7 ± 4,3 μM, IC50 BuChE = 151 ± 20 μM, IC50 POP = 173 ± 41 μM). V porovnání se standardy galanthaminem (IC50 AChE = 1,710 ± 0,1 μM, IC50 BuChE = 42,3 ± 1,3 μM), huperzinem A...
|
host ::
RSS.