|
|
Biologická aktivita alkaloidů z Peganum harmala L. a jejich semisynteticky připravených derivátů II.
Fejtková, Martina ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Cahlíková, Lucie (oponent)
Fejtková Martina: Biologická aktivita alkaloidů z Peganum harmala L. a jejich semisynteticky připravených derivátů II. Diplomová práce 2022. Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky. Tato diplomová práce se věnuje přípravě semisyntetických derivátů alkaloidu harminu a studiu jejich biologické aktivity. Z podfrakce PH-F1 alkaloidního extraktu byl izolován a pomocí preparativní tenkovrstvé chromatografie dočištěn alkaloid harmin. Inkorporací různých substituentů do polohy N9 harminu byla chemickou reakcí připravena řada semisyntetických derivátů. Pro účely této diplomové práce bylo připraveno 17 derivátů, které byly následně identifikovány na základě LC-MS, ESI-HRMS a NMR analýzy. Po ověření totožnosti a čistoty derivátů byla studována jejich biologická aktivita. U připravených látek byl testován jejich inhibiční vliv vůči lidské acetylcholinesterase (AChE), lidské butyrylcholinesterase (BuChE), glykogen syntase kinase 3β (GSK-3β) a dále byla měřena jejich cytotoxická aktivita na vybraných nádorových a leukemických liniích a jedné zdravé buněčné linii. Některé připravené deriváty vykázaly zajímavý selektivní inhibiční potenciál vůči lidské BuChE, nejaktivnějším derivátem byl 9-N-(4-isopropylbenzyl)harmin (IC50 BuChE 2,50 ± 0,78 μM)....
|
|
|
Fenotypová a funkční charakterizace leukocytů pacientů s dysregulací imunitního systému
Fejtková, Martina
Vrozené poruchy imunity (IEI; inborn errors of immunity) jsou heterogenní skupinou onemocnění imunitního systému způsobující narušení funkcí přirozené i adaptivní imunity. Každý rok jsou celosvětově objevovány nové mutace genů kódujících nejrůznější proteiny figurující v imunitním systému. V současné době počet těchto nálezů překračuje 400. (Tangye et al., 2020) V této práci jsou popsány 3 nově identifikované autoinflamatorní poruchy u pacientů s IEI. Toll-like receptory (TLR) 7 a 8 jsou endosomální receptory přirozené imunity, kde figurují jako molekuly rozpoznávající patogeny i endogenní autoantigeny. Dysregulace receptorů TLR7 a TLR8 u myší vede k autoimunitě a zánětu, u člověka je zatím imunopatologie TLR8 a TLR7 nejasná. Identifikovali jsme X-vázanou mutaci c.1715G>T v genu TLR8, která vede k autoimunitní hemolytické anémii a autoinflamatorním projevům u dvojčat, chlapců, v důsledku dysregulace TLR8 a TLR7 odpovědi zejména myeloidních buněk (snížení hladiny proteinu TLR8, jeho zkřížené reaktivitě na ligandy TLR7 a zesílení odpovědi receptoru TLR7). Hematopoetická kináza (HCK; hematopoetic cell kinase) patří do rodiny Src kináz a hraje roli v migraci, adhezi a degranulaci myeloidních buněk. Aktivita kináz v rámci imunitní odpovědi musí být striktně regulována. U HCK tuto regulační funkci plní...
|
|
|
Fenotypová a funkční charakterizace leukocytů pacientů s dysregulací imunitního systému
Fejtková, Martina ; Kanderová, Veronika (vedoucí práce) ; Vlková, Marcela (oponent) ; Balounová, Jana (oponent)
Vrozené poruchy imunity (IEI; inborn errors of immunity) jsou heterogenní skupinou onemocnění imunitního systému způsobující narušení funkcí přirozené i adaptivní imunity. Každý rok jsou celosvětově objevovány nové mutace genů kódujících nejrůznější proteiny figurující v imunitním systému. V současné době počet těchto nálezů překračuje 400. (Tangye et al., 2020) V této práci jsou popsány 3 nově identifikované autoinflamatorní poruchy u pacientů s IEI. Toll-like receptory (TLR) 7 a 8 jsou endosomální receptory přirozené imunity, kde figurují jako molekuly rozpoznávající patogeny i endogenní autoantigeny. Dysregulace receptorů TLR7 a TLR8 u myší vede k autoimunitě a zánětu, u člověka je zatím imunopatologie TLR8 a TLR7 nejasná. Identifikovali jsme X-vázanou mutaci c.1715G>T v genu TLR8, která vede k autoimunitní hemolytické anémii a autoinflamatorním projevům u dvojčat, chlapců, v důsledku dysregulace TLR8 a TLR7 odpovědi zejména myeloidních buněk (snížení hladiny proteinu TLR8, jeho zkřížené reaktivitě na ligandy TLR7 a zesílení odpovědi receptoru TLR7). Hematopoetická kináza (HCK; hematopoetic cell kinase) patří do rodiny Src kináz a hraje roli v migraci, adhezi a degranulaci myeloidních buněk. Aktivita kináz v rámci imunitní odpovědi musí být striktně regulována. U HCK tuto regulační funkci plní...
|
|
|
Biologická aktivita alkaloidů z Peganum harmala L. a jejich semisynteticky připravených derivátů II.
Fejtková, Martina ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Cahlíková, Lucie (oponent)
Fejtková Martina: Biologická aktivita alkaloidů z Peganum harmala L. a jejich semisynteticky připravených derivátů II. Diplomová práce 2022. Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky. Tato diplomová práce se věnuje přípravě semisyntetických derivátů alkaloidu harminu a studiu jejich biologické aktivity. Z podfrakce PH-F1 alkaloidního extraktu byl izolován a pomocí preparativní tenkovrstvé chromatografie dočištěn alkaloid harmin. Inkorporací různých substituentů do polohy N9 harminu byla chemickou reakcí připravena řada semisyntetických derivátů. Pro účely této diplomové práce bylo připraveno 17 derivátů, které byly následně identifikovány na základě LC-MS, ESI-HRMS a NMR analýzy. Po ověření totožnosti a čistoty derivátů byla studována jejich biologická aktivita. U připravených látek byl testován jejich inhibiční vliv vůči lidské acetylcholinesterase (AChE), lidské butyrylcholinesterase (BuChE), glykogen syntase kinase 3β (GSK-3β) a dále byla měřena jejich cytotoxická aktivita na vybraných nádorových a leukemických liniích a jedné zdravé buněčné linii. Některé připravené deriváty vykázaly zajímavý selektivní inhibiční potenciál vůči lidské BuChE, nejaktivnějším derivátem byl 9-N-(4-isopropylbenzyl)harmin (IC50 BuChE 2,50 ± 0,78 μM)....
|
|
|
Chimérické antigenní receptory (CAR) v léčbě nádorů
Fejtková, Martina ; Macková, Jana (vedoucí práce) ; Fraiberk, Martin (oponent)
Chimérický antigenní receptor (CAR) je uměle vytvořený receptor T-lymfocytů skládající se z extracelulární části vázající antigen, tvořené jednořetězcovou protilátkou, transmembránové oblasti a intracelulární signální domény spouštějící aktivaci buňky. Má tedy přednosti cílené specifity monoklonální protilátky a zároveň schopnost aktivovat T-lymfocyty svými aktivačními kostimulačními doménami. T-lymfocyt nesoucí CAR je schopen vyhledat a eliminovat cílovou buňku s daným povrchovým antigenem a zároveň aktivovat i ostatní složky imunitního systému produkcí cytokinů. CAR T-lymfocyty představují obrovský potenciál v léčbě hematologických malignit a výzkum přináší i nové úspěchy v modifikaci CARů pro eliminaci solidních nádorů.
|
|
|
Cell signaling aberrations in primary immunodeficiencies
Fejtková, Martina ; Kanderová, Veronika (vedoucí práce) ; Vlková, Marcela (oponent)
Primární imunodeficience (PID) jsou charakterizovány zvýšenou náchylností k infekcím a různě závažnými imunologickými poruchami. S rozvojem masivně paralelního sekvenování je ve skupině PID identifikováno stále více poruch v genech asociovaných s imunitním systémem. Biologická podstata mnoha nalezených mutací je ale často neznámá. Je proto nezbytné vyvíjet metodické nástroje, které pomohou objasnit kauzalitu daných mutací a mohou pomoci nalézt optimální terapii. Jedněmi z nově objevených mutací jsou aktivační, tzv. gain-of-function, mutace v genu pro STAT1 způsobující chronickou mukokutánní kandidózu. Kandidózu mohou zmírňovat antimykotika nebo cílený JAK-STAT inhibitor, ruxolitinib. Pro našeho pacienta s nově nalezenou mutací ve STAT1 jsme vyvinuli jednoduchý test pro detekci fosforylace STAT molekul v lymfocytech plné periferní krve. Tímto testem jsme potvrdili aktivační charakter dané mutace a použili jej i pro monitorování cílené léčby ruxolitinibem. U druhého pacienta, který trpí lymfadenopatií a imunodeficitem, byla identifikována dosud nepopsaná mutace v genu pro kaspázu-8. Prokázali jsme inhibiční, tzv. loss-of-function character dané mutace projevující se sníženým štěpením samotné kaspázy-8 i jejího substrátu kaspázy-3, poruchou v buněčné apoptóze a sníženou signalizací NFB. U třetí...
|
|
|
Cell signaling aberrations in primary immunodeficiencies
Fejtková, Martina ; Kanderová, Veronika (vedoucí práce) ; Vlková, Marcela (oponent)
Primární imunodeficience (PID) jsou charakterizovány zvýšenou náchylností k infekcím a různě závažnými imunologickými poruchami. S rozvojem masivně paralelního sekvenování je ve skupině PID identifikováno stále více poruch v genech asociovaných s imunitním systémem. Biologická podstata mnoha nalezených mutací je ale často neznámá. Je proto nezbytné vyvíjet metodické nástroje, které pomohou objasnit kauzalitu daných mutací a mohou pomoci nalézt optimální terapii. Jedněmi z nově objevených mutací jsou aktivační, tzv. gain-of-function, mutace v genu pro STAT1 způsobující chronickou mukokutánní kandidózu. Kandidózu mohou zmírňovat antimykotika nebo cílený JAK-STAT inhibitor, ruxolitinib. Pro našeho pacienta s nově nalezenou mutací ve STAT1 jsme vyvinuli jednoduchý test pro detekci fosforylace STAT molekul v lymfocytech plné periferní krve. Tímto testem jsme potvrdili aktivační charakter dané mutace a použili jej i pro monitorování cílené léčby ruxolitinibem. U druhého pacienta, který trpí lymfadenopatií a imunodeficitem, byla identifikována dosud nepopsaná mutace v genu pro kaspázu-8. Prokázali jsme inhibiční, tzv. loss-of-function character dané mutace projevující se sníženým štěpením samotné kaspázy-8 i jejího substrátu kaspázy-3, poruchou v buněčné apoptóze a sníženou signalizací NFB. U třetí...
|
|
|
Chimérické antigenní receptory (CAR) v léčbě nádorů
Fejtková, Martina ; Macková, Jana (vedoucí práce) ; Fraiberk, Martin (oponent)
Chimérický antigenní receptor (CAR) je uměle vytvořený receptor T-lymfocytů skládající se z extracelulární části vázající antigen, tvořené jednořetězcovou protilátkou, transmembránové oblasti a intracelulární signální domény spouštějící aktivaci buňky. Má tedy přednosti cílené specifity monoklonální protilátky a zároveň schopnost aktivovat T-lymfocyty svými aktivačními kostimulačními doménami. T-lymfocyt nesoucí CAR je schopen vyhledat a eliminovat cílovou buňku s daným povrchovým antigenem a zároveň aktivovat i ostatní složky imunitního systému produkcí cytokinů. CAR T-lymfocyty představují obrovský potenciál v léčbě hematologických malignit a výzkum přináší i nové úspěchy v modifikaci CARů pro eliminaci solidních nádorů.
|
host ::
RSS.