|
Příprava DNA vazebné domény transkripčního faktoru FoxO4 pro tryptofanová fluorescenční měření
Vácha, Petr
Tato práce je součástí projektu, který se zabývá způsobem interakce 14-3-3 proteinů s forkhead transkripčním faktorem FoxO4. 14-3-3 proteiny jsou proteiny interagující s celou řadou buněčných proteinů. Touto interakcí ovlivňují aktivitu, či buněčnou lokalizaci svých vazebných partnerů. Transkripční faktor FoxO4 hraje významnou roli v regulaci buněčného cyklu, apoptózy, reakce na oxidativní stres a řady dalších buněčných procesů. Transkripční aktivita FoxO4 je řízena skrze fosforylaci protein kinasou B. Fosforylace způsobí inhibici vazby FoxO4 na DNA, navázání 14-3-3 proteinu na FoxO4 a transport vzniklého komplexu z jádra. Jedním z cílů projektu je objasnění molekulárního mechanismu těchto interakcí. Hlavním cílem této práce bylo vytvoření mutantní cDNA proteinu FoxO4 obsahujícího pouze dva tryptofanové zbytky pomocí cílené bodové metageneze, který poslouží jako modelový systém pro studium konformačních změn DNA vazebné domény FoxO4 při interakci se 14-3-3 proteinem. Po získání cílové mutantní cDNA tento protein exprimovat a purifikovat. Kromě toho byla součástí práce ještě exprese a purifikace proteinu 14-3-3, který je součástí modelového systému pro studium mechanismu interakce těchto dvou proteinů.
|
|
Aktivita cytochromů P450 1A1, 1A2 a 3A4 exprimovaných v eukaryotních a prokaryotních systémech
Indra, Radek ; Stiborová, Marie (vedoucí práce) ; Mizerovská, Jana (oponent)
Cytochromy P450 (CYP) tvoří superrodinu hemových proteinů, jenž je široce rozšířená v přírodě. Jsou důležité pro metabolismus širokého spektra substrátů a katalyzují řadu chemických reakcí. Hrají centrální roli v metabolismu chemoterapeutik (léčiv). Mají také schopnost aktivovat některé protinádorové činidla. Ellipticin, alkaloid nalezený v rostlinách čeledi Apocynaceae, je příkladem takového substrátu cytochromů P450. V práci byla testována efektivita lidských rekombinantních cytochromů P450 exprimovaných v eukaryotickém a prokaryotickém expresním systému, jmenovitě v SupersomechTM , což jsou mikrosomy izolované z hmyzích buněk transfekovaných baculovirem nesoucím cDNA lidských CYP1A1, 1A2 a 3A4 s NADPH:cytochrom P450 reduktasou nebo v Bactosomech, které jsou membránovou frakcí buněk E. coli transfekovaných cDNA stejných lidských cytochromů a NADPH:cytochrome P450 reduktasou, pro oxidaci jejich markerových substrátů a ellipticinu. Cytochrom b5, fakultativní složka systému oxidas se smíšenou funkcí, která metabolizuje xenobiotika, byl také exprimován v některých systémech. Výsledky získané v diplomové práci demonstrují, že lidské CYP1A1, 1A2 nebo 3A4 exprimované v prokaryotickém nebo eukaryotickém systému oxidují své markerové substráty (EROD pro CYP1A1/2, MROD pro CYP1A2 a 6β-hydroxylaci testosteronu pro...
|
|
Charakterizace myší s konstitutivně aktivní Wnt/beta-katenin signální dráhou v oční čočce
Antošová, Barbora ; Kozmik, Zbyněk (vedoucí práce) ; Pavlínková, Gabriela (oponent)
Vývoj a diferenciace oční čočky jsou striktně regulované procesy. Narušení těchto vývojových procesů může vést k patologiím, které omezí kvalitu zraku. Oční čočka obratlovců je tvořena epiteliálními a terminálně diferencovanými fibrilárními buňkami. Diferenciace fibrilárních buněk je spojena s expresí specifických proteinů (např. krystalinů), s opuštěním buněčného cyklu a s degradací jádra a organel. Wnt/β-katenin signální dráha hraje důležitou roli během časného vývoje oka stejně jako později během diferenciace oční čočky. Abychom zjistili důsledky aktivace Wnt/β-katenin signální dráhy ve fibrilárních buňkách čočky, byla vytvořena transgenní myš nazvaná CLEF. Konstitutivní aktivace Wnt/β-katenin signální dráhy ve fibrilárních buňkách CLEF myši je zajištěna expresí transgenního proteinu CLEF, který obsahuje C-koncovou aktivační doménu β- kateninu fúzovanou s N-koncem plnodélkového proteinu Lef1. Exprese CLEF transgenu je řízena αA-krystalinovým promotorem. V důsledku konstitutivní aktivace Wnt/β-katenin signální dráhy mají dospělé CLEF myši kataraktu a menší oči. Morfologie očních CLEF čoček je narušena. Expresi transgenní CLEF mRNA detekujeme od stádia E13.5 a následně v mutantních čočkách detekujeme i CLEF protein (ve stádiu E16.5). Abychom lépe porozuměli molekulárním změnám, provedli jsme microarray...
|
|
Návrh a zpracování výukových postupů přístrojové navigace
Bandúr, Juraj ; Vosecký, Slavomír (oponent) ; Chlebek, Jiří (vedoucí práce)
Práca sa zaoberá návrhom jednotlivých kľúčových úloh pre lety podľa prístrojovej navigácie, pričom úlohy sú navrhnuté s ohľadom na požiadavky predpisu JAR FCL 1. Práca obsahuje aj oboznámenia princípov fungovania vybraných rádionavigačných zariadení, ktoré sú v jednotlivých úlohách demonštrované, vďaka čomu môžu úlohy dobre poslúžiť aj pri výučbe predmetov Navigácie. Súčasťou práce je tiež hodnotenie simulátora FlitePro z pohľadu získateľnosti certifikácie ako výcvikové zariadenie.
|
|
Essay on Financial Innovation, Credit Constraints, and Welfare
Janíčko, Martin ; Chytil, Zdeněk (vedoucí práce) ; Tlustý, Adolf (oponent) ; Pavelka, Tomáš (oponent) ; Frait, Jan (oponent)
Předkládaná disertační práce je složena ze tří rozdílných článků, jejichž společnými tematickými jmenovateli jsou finanční inovace, úvěrová omezení a obecný dopad na blahobyt. První příspěvek se zabývá teoretickým ukotvením interakce mezi finanční a reálnou sférou ekonomiky, s důrazem na roli finančních inovací ve fungování hospodářského cyklu. Pro tento účel je často využit teoretický aparát školy regulace a postkeynesovské ekonomie, přičemž je zároveň konfrontován s přístupy ekonomie hlavního proudu a částečně i s některými jinými přístupy mimo něj. Všechny tyto směry určitým specifickým způsobem interpretují roli finančních inovací v moderních ekonomikách, a to ať již v souladu s jejich zaměřením, nebo pod vlivem posledních ekonomických událostí. Obecně lze konstatovat, že existuje jistý konsenzus napříč jednotlivými školami, přičemž ale některé z nich byly evidentně podstatně úspěšnější při predikování krizových událostí než jiné. V následujících dvou článcích jsou konstruovány dva makroekonomické modely, využívající dynamického přístupu, které mimo jiné demonstrují efekty větší úvěrové dostupnosti na příkladu bydlení pro tzv. úvěrově omezené a úvěrově neomezené domácnosti. I zde se ukazuje nepřímý dopad finančních inovací jako velice nejednoznačný. Je zřejmé, že uvolnění úvěrových podmínek také pomocí finančně-inovativních aktivit, mající dopad na úrokové míry nebo např. poměr mezi půjčkou a hodnotou nemovitosti, a jejich následný vliv na ceny nemovitostí, může mít rozdílné dopady pro domácnosti s pevným úvěrovým omezením a domácnosti bez takovéhoto omezení. Situace je analyzována pomocí dílčí a celkové rovnováhy, přičemž pro rozdílné použité metody lze nikoli překvapivě dojít k odlišným výsledkům, které jsou determinovány incidencí různých šoků v průběhu kreditního cyklu. V modelu dílčí rovnováhy jsou patrnější a jednoznačnější efekty uvolnění úvěrových omezení, jež zároveň nabízejí poměrně jednoduchý a intuitivní logický sled mezi růstem cen a obecným blahobytem. Tento sled je především viditelný u úvěrově omezených domácností. Na druhou stranu v modelu celkové rovnováhy je jasněji a pochopitelněji znázorněna tranzitivní dynamika celého procesu a zároveň dopad na různě úvěrově omezené domácnosti je méně jednoznačný a rozdílný od intuitivního modelu dílčí rovnováhy z předcházející stati.
|
|
Analysis of specific instruments applied in the financial management of TNC with a focus on transfer pricing
Baluchová, Daniela ; Taušer, Josef (vedoucí práce) ; Sato, Alexej (oponent) ; Baláž, Peter (oponent)
Transferové ceny (transfer pricing) hrají důležitou roli v rámci finančního řízení TNC, protože ovlivňují alokaci výnosů a nákladů mezi jednotlivými afilace umístěnými v zemích s rozdílnou mírou zdanění, úrokovými sazbami, politickým režimem a ekonomickým prostředím. V poslední době se transferové ceny spojují především ve spojitosti s daňovými strukturami TNC vytvořenými za účelem minimalizace či vyhýbání se dani, což vyvolává konflikty zájmů s vládami (správci daně) v jednotlivých zemích jejich působení. Vzhledem k významnému zastoupení nadnárodních korporací v ČR transferové ceny sjednány českými afilacemi se zahraničními spojenými osobami zásadně ovlivňují vykazování zisku těchto společností, jakož i statistických údajů zahraničního obchodu ČR i dalších položek platební bilance ČR. Hlavním cílem disertační práce je prozkoumat a přinést nové poznatky v oblasti nastavení transferových cen a jejich využití v rámci daňového plánování TNC v ČR. Tento cíl je naplňován řadou dílčích cílů, které byly formulovány ve dvou rovinách, a to z pohledu TNC působících v ČR a české daňové správy. S ohledem na komplexnost problematiky převodních cen se předmětem zkoumání staly výrobní afilace TNC v ČR. Z pohledu TNC v ČR bylo cílem disertační práce zmapovat teoretické a dosavadní empirické poznatky ohledně tvorby převodních cen a prozkoumat, jakým způsobem je možné využít transferové ceny při daňové optimalizaci a konfrontovat uvedené zjištění v podmínkách ČR. Na základě výsledků výzkumu vyplynulo, že u výrobních TNC působících v ČR jsou transferové ceny stanoveny nejčastěji prostřednictvím netržních metod. Jako podkladová báze je nejčastěji použita nákladová kalkulace navýšena o přirážku. Výzkum dále poukázal, že nejdůležitějšími faktory při nastavení převodních cen jsou interní ekonomické podmínky a kurzové riziko. Restrikce ohledně repatriace zisku a daňová optimalizace jsou vnímány respondenty jako důležité faktory, ale ne nejvýznamnější proměnné zvažovány v rámci cenotvorby. Dalším přínosem této práce je identifikace nesouladu mezi deklarovaným a skutečným rizikovým profilem zkoumaných společností. Z pohledu české daňové správy je cílem disertační práce zjistit, jakým způsobem reaguje český správce daně na aktuální výzvy v oblasti transferových cen a zhodnotit potenciální rizika v případě prokázání nesouladu transferových cen s principem tržního odstupu. Na základě zjištění v rámci výzkumu je možné konstatovat, že v návaznosti na mezinárodní iniciativu Akční plán BEPS se přístup české daňové správy k této oblasti zdanění zintenzivnil. V první řadě je možné registrovat zvýšený počet kontrol transferových cen, přičemž u poloviny respondentů dotazníkového šetření byla zahájena daňová kontrola v posledních dvou letech, tj. v době zahájení akčního plánu BEPS. Výsledky dotazníkového šetření potvrdily, že daňové kontroly byly prováděny cíleně u vybraných rizikových společností, jakými jsou společnosti uplatňující, daňové ztráty či příjemci investičních pobídek v podobě slevy na dani. Výzkum dále poukazuje na fakt, že se pozornost úředních osob při kontrole transferových cen upírá nejen na samotné ocenění, ale i zjištění ověření skutečností rozhodných pro posouzení správnosti nastavení cenotvorby. Dále bylo zjištěno, že potenciální rizika v oblasti převodních cen vyplývají jednak ze administrativně-právní, jakož i trestně-právní odpovědnosti a dotýkají se nejen samotných korporací, ale i jejich statutárních orgánů. Kromě toho, při úvahách o převodních cenách by management společnosti měl brát v úvahu nejen potenciální daňová rizika, ale i jiné povinnosti plynoucí z obchodněprávních vztahů. Jednou z nich je povinnost jednat s péčí řádného hospodáře, podle níž nese každý statutární orgán odpovědnost za prověření souladu tvorby převodních cen s tržním principem. Jinak hrozí, že nepodnikl potřebné kroky a opatření k předejití újmy společnosti. V tomto kontextu je třeba vidět nejen slepé akceptování transferových cen diktovaných ze skupiny, ale i situaci, kdy management společnosti upřednostní méně výhodnou transakci se spojenou osobou, přesto, že je dostupná výhodnější obchodní příležitost na trhu a společnost takto přichází o zisk.
|
|
Regulace finančních trhů v mezinárodních souvislostech
Nistorenco, Taisia ; Žamberský, Pavel (vedoucí práce) ; Jiránková, Martina (oponent)
Tato diplomová práce se zabývá teoretickou, deskriptivní, komparativní a ekonometrickou analýzou regulace finančních trhů v mezinárodních souvislostech. V první kapitole popisuji a analyzuji charakteristiky moderních finančních trhů, příčiny a účel jejich regulace a modely institucionálního uspořádaní regulace. Druhá kapitola poskytuje náhled do historie finanční regulace a zkoumá, jakou roli sehrál regulatorní faktor v propuknutí světové finanční krize z roku 2008. Ve třetí kapitole provádím srovnání regulatorní odezvy na finanční krizi v USA a EU. Čtvrtá kapitola obsahuje regresní analýzu vztahu mezi indikátory finančního zdraví tří vybraných zemí. Závěry práce poukazuji na to, že regulace je efektivní v otázce nápravy tržních selhání, zatímco v jiných aspektech jsou její dopady nejednoznačné. Míra intenzity regulace hrála druhořadou roli ve vzniku finančních krizí, ve skutečnosti je vhodné hovořit spíše o selhání dohledu než regulace. Díky mezinárodním snahám o harmonizaci postupu nápravy následků finanční krize, měla regulatorní odezva v USA a EU velmi shodný průběh a formu. Statistické postupy nepotvrdily předpoklad o tom, že regulace představuje významnou překážku pro zvýšení profitability kapitálu úvěrových institucí.
|
|
Provize a trh finančního zprostředkování
Macura, Marek ; Smrčka, Luboš (vedoucí práce) ; Zámečník, Petr (oponent)
Tato práce se zabývá trhem finančního zprostředkování a distribuce na finančním trhu. Pomocí situační analýzy odhaluje vazby a principy fungování trhu finančního zprostředkování a zaměřuje se na roli regulace finančního trhu a provizní odměny. Analyzuje dopady změn provizního odměňování na různé distribuční modely.
|
|
Vliv estrogenních hormonů na kapacitaci a akrozomální reakci myších spermií in vitro.
Tejnická, Magda ; Komrsková, Kateřina (vedoucí práce) ; Maňásková, Pavla (oponent)
- 6 - Abstrakt V životním prostředí se vyskytuje stále více látek, které mohou působit na repro- dukční parametry, jak v samčím, tak v samičím organismu. Současným světovým problé- mem je snížení kvality spermií, což vede k nárůstu početí dítěte nepřirozenou cestou za použití technik asistované reprodukce na specializovaných klinikách. Mezi tyto látky patří i přírodní estrogeny, které se po vyloučení z těla močí dostá- vají do odpadních vod. Do lidského těla se zpět dostávají v pitné vodě nebo z potravy a interferují s činností endogenních hormonů již při velmi nízkých koncentracích, proto je vysoce aktuální se v současné době zabývat vlivem těchto látek na savčí spermie. Estrogeny jsou brány jako typicky samičí pohlavní hormony, ale mají významnou roli i v regulaci samčí reprodukce. Endogenní estrogeny jsou u savčích samců důležitou částí endokrinního systému. Účastní se vývoje zárodečných buněk, pochodů spermatoge- neze a procesů vedoucích k úspěšnému oplození vajíčka jako je kapacitace a akrozomální reakce. Tyrozinová fosforylace proteinů je jedním ze zásadních kroků pro úspěšný průběh kapacitace u spermií, na kterou navazuje fúze plazmatické a vnější akrozomální membrány s následným vylitím akrozomálního váčku a splynutí spermie s vajíčkem. Na laboratorních myších kmene BALB/c byl detailně studován vliv...
|
|
Assessment of expression markers of HLA class II genes.
Zajacová, Marta ; Černá, Marie (vedoucí práce) ; Černý, Jan (oponent)
ÚVOD: Molekuly HLA hrajú centrálnu úlohu v imunitnej odpovedi. HLA II. triedy sa zúčastňujú selekcie T bunkového repertoáru v týmuse a prezentácie antigénnych peptidov CD4-pozitívnym T lymfocytom. HLA II. triedy fungujú ako reštrikčné prvky v prezentácii antigénov T lymfocytom a ich expresia na povrchu buniek je nutná pre spustenie imunitných odpovedí. Regulácia transkripcie génov HLA II. triedy predstavuje komplexný systém zahŕňajúci "cis-acting" DNA sekvenciu a "trans-acting" proteínové faktory. Bol publikovaný alelový polymorfizmus regulačných oblastí génov HLA II. triedy, DQA1, DQB1 a DRB1. Väčšina polymorfizmov je uchovávaná súhlasne s haplotypom. Hierarchia sekvenčnej homológie, ktorá existuje medzi štrukturálnymi génmi, však nemá obdobu medzi ich promótorovými sekvenciami. Zaujalo nás, že najviac prekvapujúci rozpor bol nájdený pre alely viazané k DR4, DQB1*0301 a DQB1*0302, ktoré boli popísané ako časté rizikové faktory pre niektoré autoimunitné choroby. Štrukturálne gény týchto dvoch aliel sú najviac príbuzné, ale ich regulačné sekvencie sú najviac odlišné v porovnaní s ostatnými DQB1 alelami. Tieto sekvenčné rozdiely zodpovedajú funkčnej variabilite: promótorová sila DQB1*0301 alely je trikrát až štyrikrát väčšia než promótorová sila DQB1*0302 alely. Funkčná rozdielnosť medzi alelami HLA...
|
host ::
