|
|
Stanovení a porovnání elektromigračních vlastností markerů pro izoelektrickou fokusaci
Lorinčíková, Kateřina ; Gaš, Bohuslav (vedoucí práce) ; Kašička, Václav (oponent)
Byly proměřeny závislosti elektroforetické mobility na pH pro 14 pI markerů využívaných pro izoelektrickou fokusaci připravených skupinou Šlaise, které jsou založené na substitucích na nitrofenolovém jádře, a pro 5 pI markerů připravených Shimurou, které mají strukturu oligopeptidů. Pomocí programu AnglerFish byly z těchto závislostí získány termodynamické disociační konstanty a limitní elektroforetické pohyblivosti daných látek. Ze získaných hodnot byly následně vypočítány hodnoty pI příslušných markerů. Provedlo se srovnání získaných hodnot pI s těmi, jež jsou uváděny v literatuře, avšak byly stanoveny jinými analytickými metodami. Klíčová slova kapilární zónová elektroforéza, izoelektrická fokusace, pI markery, izoelektrický bod, termodynamická disociační konstanta, limitní iontová pohyblivost
|
|
|
Využití hmotnostní spektrometrie pro analýzu biologicky aktivních látek
Kaliba, David
Předložená disertační práce je komentovaným souborem čtyř publikací popisujících využití kapilární elektroforézy, kapalinové chromatografie a UV/Vis spektrometrie ke studiu komplexů rhenia s aromatickými ligandy. Ke strukturální charakterizaci jednotlivých komplexů byly využity metody hmotnostní spektrometrie s měkkými ionizačními technikami, 1 H a 13 C nukleární magnetické resonance a infračervené spektrometrie. Komplexy byly připraveny v reakcích rheniového prekurzoru tetrabutylamonium tetrachlorooxorhenátu s odpovídajícím ligandem za aerobních i anaerobních podmínek. V průběhu výzkumu byla zjištěna nestabilita připravených komplexů (s Re v oxidačním čísle +V a +VI) a jejich přechod na jinou stabilnější formu (Re+VII ). V průběhu výzkumu byly úspěšně realizovány následující dílčí projekty: Návrh a úspěšná realizace postupu syntézy vybraných rheniových komplexů s aromatickými ligandy 1,2-dihydroxybenzen, 1,2,3-trihydroxybenzen a 2,3- dihydroxynaftalen v reakcích bez přístupu vzduchu a s přístupem vzduchu a jejich strukturální charakterizace metodami ESI-MS, APPI-MS, LDI-MS, ESI-MS/MS, NMR a IR. ESI-MS SRM a UV/Vis časové studie chování primárně vzniklých rheniových komplexů (Re+V ) s aromatickými ligandy v reakční směsi v závislosti na přídavku triethylaminu jako akcelerátoru reakce a přeměna...
|
|
|
Komplexační rovnováhy beta-blokátorů v CZE
Kanizsová, Lívia
Látky využívané ve farmaceutickém průmyslu se často vyskytují ve formě směsi více isomerů s odlišnou biologickou aktivitou. V případě, že má některý isomer nežádoucí účinek, je důležité jej ze směsi oddělit a ověřit chirální čistotu léku. Kapilární zónová elektroforéza hraje důležitou roli v chirálních separacích. Pro rozdělení jednotlivých isomerů je zde využívána jejich rozdílná afinita ke komplexačním činidlům. Míru jejich interakce charakterizuje komplexační konstanta. Pro chirální separaci β-blokátorů se nejčastěji používají cyklodextriny, které mohou být neutrální nebo nabité. S β-blokátory interagují pravděpodobně prostřednictvím tvorby inkluzních komplexů. U všech studovaných β-blokátorů, kterými byly labetalol, pindolol, alprenolol a atenolol, byla úspěšně provedena enantioseparace na základní linii použitím základního elektrolytu s obsahem nabitých cyklodextrinů. Největší rozlišení píků bylo pozorováno při použití sulfatovaných cyklodextrinů.
|
|
|
Komplexní analýza výstražných a obranných látek ploštic vysokoúčinnými separačními metodami
Krajíček, Jan
V průběhu evoluce se vyvinulo mnoho strategií obrany hmyzu před jeho predátory. Evolučně nejstarší a nejrozšířenější je chemická obrana následovaná akustickou nebo optickou obranou. Spousta druhů hmyzu však používá najednou více typů varovných signálů, které působí na různé smyslové receptory jejich predátora. Takovýto komplexní způsob varovné signalizace se nazývá multimodální. Může vznikat například současným podílem chemických a optických signálů nebo kombinací akustické a optické signalizace. Právě kombinace chemicko-optické signalizace kořisti vůči predátorovi je pravděpodobně nejčastější formou multimodální signalizace. Předkládaná práce se zabývá analýzou biologicky aktivních látek, které participují při obranných mechanismech jednoho z rozšířených druhů hmyzu - ploštic. Deriváty pterinu představují rozsáhlou skupinu přírodních látek odvozených od bicyklického heterocyklu pteridinu a vyskytují se prakticky ve všech živých organismech od bakterií k obratlovcům. U hmyzu primárně slouží jako pigmenty a například kutikulám ploštic propůjčují jejich nápadné zabarvení. První část disertační práce byla zaměřena na identifikaci a kvantifikaci derivátů pterinu v kutikulách vybraných druhů ploštic. Pro separaci a kvantifikaci deseti derivátů pterinu (L-sepiapterin, 7,8-dihydroxanthopterin,...
|
|
|
Application of advanced models of electromigration by means of computer software
Malý, Michal ; Dubský, Pavel (vedoucí práce) ; Petr, Jan (oponent) ; Thormann, Wolfgang (oponent)
Pohyb iontů v elektrickém poli je předmětem vědeckého výzkumu po mnoho desetiletí. Přínos tohoto výzkumu byl zvlášť významný pro kapilární elektroforézu, pro kterou byly vyvinuty matematické modely elektromigrace. S rostoucí sofistikovaností modelů rostla i náročnost výpočtů nutných k jejich vyřešení. Aby bylo možné plně využít možnosti pokročilých matematických modelů, je zapotřebí příslušná počí- tačová implementace schopná vyřešit netriviální problémy dostatečně rychle. Tato disertační práce se zabývá aplikací počítačových implementací matematických modelů vztahujících se k elektromigraci ve dvou oblastech. Hlavním tématem této práce je lineární teorie elektromigrace. Je diskutována rozšířená teorie elektromigrace uvažující více rovnováh než pouze rovnováhy acidobaz- ické a počítačová implementace této teorie, která je specializována pro rovnováhy komplexační, aby bylo možné řešit problémy afinitní kapilární elektroforézy. Jsou zmíněny i některé technické aspekty počítačové implementace. Dále jsou rozebrány vybrané systémy afinitní kapilární elektroforézy. Cílem tohoto rozboru bylo odvodit již dříve známé zákony platné v systémech afinitní kapilární elektroforézy pomocí rozšířené lineární teorie elektromigrace a objasnit tak jevy, které byly dříve nepozorované či ne- dostatečně vysvětlené....
|
|
|
Matematické modelování lineárních a nelineárních jevů v kapilární elektroforéze
Dvořák, Martin ; Dubský, Pavel (vedoucí práce) ; Kašička, Václav (oponent) ; Gebauer, Petr (oponent)
Kapilární elektroforéza je jedna z předních analytických separačních metod. V současné době existuje řada počítačových programů, které jsou schopny předpovědět výsledek elektroforetického experimentu. Jde jednak o programy založené na numerickém řešení příslušných rovnic kontinuity a rovnic chemické rovnováhy a jednak o programy založené na aproximativních modelech kapilární elektroforézy. Programy z první skupiny jsou použitelné pro širokou škálu módů kapilární elektroforézy a poskytují přesné řešení. Jejich nevýhodou je však jejich značná časová náročnost. Aproximativní modely naopak dávají výsledek téměř okamžitě a navíc poskytují teoretické vztahy užitečné při optimalizaci separační metody. Tato disertační práce se zaměřuje na vylepšení a rozšíření oblasti platnosti stávajících aproximativních modelů kapilární elektroforézy. V rámci této práce je představen model vhodný pro plnohodnotný popis kapilární elektrokinetické chromatografie. Tento model je implementován do programu PeakMaster 6. Dále je pozornost věnována nelineárnímu modelu elektromigrace bez difúze. Tento model umožňuje velmi dobrý popis elektromigrační disperze včetně efektů spojených se vzájemnou interakcí mezi píky. Činí tak ovšem na úkor úplného zanedbání difúze. V této práci je nelineární model elektromigrace bez difúze...
|
|
|
Korekce pKA konstant a elektroforetických mobilit slabých elektrolytů na nulovou iontovou sílu
Lorinčíková, Kateřina ; Gaš, Bohuslav (vedoucí práce) ; Sobotníková, Jana (oponent)
Byly proměřeny závislosti elektroforetické mobility histidinu na pH ve dvou sadách pufrů o iontové síle 20 mM. Parametry získané z těchto křivek byly následně zkorigovány na nulovou iontovou sílu pomocí staršího přístupu a pomocí nově vyvinutého programu AnglerFish. Je ukázán vliv iontové atmosféry na pKA a mobilitu a tvar příslušných korekcí, které umožňují stanovit pKa a mobilitu při nekonečném zředění. Rovněž byla proměřena nová látka, imatinib, což je čtyřmocně kladně nabitá dusíkatá heterocyklická látka, a byly stanoveny její pKA a mobility. Klíčová slova kapilární zónová elektroforéza, iontová síla, limitní mobilita, pKA, korekce na nulovou iontovou sílu
|
|
|
Změny základního elektrolytu způsobené elektrolýzou při průběhu kapilární zónové elektroforézy
Novotný, Tomáš ; Gaš, Bohuslav (vedoucí práce) ; Křížek, Tomáš (oponent)
3 Abstrakt Elektrodové reakce jsou nevyhnutelným vedlejším jevem standardní separace kapilární zónovou elektroforézou. Elektrolytické produkty vznikající následkem elektrolýzy vody, ke které dochází ve většině využívaných konfigurací, mohou způsobit postupné změny základního elektrolytu nacházejícího se v zásobních vialkách a uvnitř křemenné separační kapiláry. Degradací základního elektrolytu dochází ke snížení přesnosti a reprodukovatelnosti experimentů provedených kapilární zónovou elektroforézou. Změny ve složení základního elektrolytu jsou významně ovlivněny samotným složením výchozího pufru, kdy různé elektrolyty mají různou tendenci se s časem degradovat. Správný výběr složení a správná manipulace se základním elektrolytem v elektrodových vialkách může vést k vyšší přesnosti a reprodukovatelnosti provedených experimentů. Klíčová slova: Kapilární zónová elektroforéza, elektrolýza, základní elektrolyt, bezkontaktní vodivostní detekce
|
|
|
Elektroforetické stanovení inhibitorů koroze v chladicích kapalinách
Smrž, Dominik ; Kubíčková, Anna (vedoucí práce) ; Coufal, Pavel (oponent)
Stanovení inhibitorů koroze v chladicích kapalinách představuje vzhledem k jejich rozdílným fyzikálně chemickým vlastnostem obtížný analytický problém. V současnosti je k jejich stanovení nutné použít více instrumentálních technik. Hlavním cílem této práce bylo vyvinout metody pro stanovení těchto látek pomocí jedné instrumentální techniky. Jako vhodná metoda byla vybrána kapilární zónová elektroforéza, pomocí které byly vyvinuty tři metody stanovení jednotlivých skupin inhibitorů koroze. Metoda pro stanovení anorganických aniontů v rozsahu 5 až 50 ppm, s limitem detekce kolem 1 ppm. Základní elektrolyt pro tuto metodu sestával z roztoku chromanu sodného, CTAB a CHES. Analyty byly detegovány nepřímo při 450 nm. Dále byla vyvinuta metoda pro stanovení organických kyselin, které byly stanovovány v rozsahu od 5 do 500 ppm. Limity detekce všech analytů se pohybovali kolem 1 ppm. Měření bylo prováděno s roztokem PDC a CTAC ve vodě. Pro stanovení byla použita nepřímá detekce a to při 350 nm. Poslední metodou vyvinutou v rámci této práce lze stanovit aryltriazoly v rozsahu koncentrací od 5 do 500 ppm. Limit detekce se pohyboval kolem 1 ppm. Jako základní elektrolyt byl použit roztok tetraboritanu sodného. Vyvinuté metody byly validovány. Následně byla potvrzena vhodnost metod pro stanovení inhibitorů...
|
|
|
Komplexační rovnováhy beta-blokátorů v CZE
Kanizsová, Lívia
Látky využívané ve farmaceutickém průmyslu se často vyskytují ve formě směsi více isomerů s odlišnou biologickou aktivitou. V případě, že má některý isomer nežádoucí účinek, je důležité jej ze směsi oddělit a ověřit chirální čistotu léku. Kapilární zónová elektroforéza hraje důležitou roli v chirálních separacích. Pro rozdělení jednotlivých isomerů je zde využívána jejich rozdílná afinita ke komplexačním činidlům. Míru jejich interakce charakterizuje komplexační konstanta. Pro chirální separaci β-blokátorů se nejčastěji používají cyklodextriny, které mohou být neutrální nebo nabité. S β-blokátory interagují pravděpodobně prostřednictvím tvorby inkluzních komplexů. U všech studovaných β-blokátorů, kterými byly labetalol, pindolol, alprenolol a atenolol, byla úspěšně provedena enantioseparace na základní linii použitím základního elektrolytu s obsahem nabitých cyklodextrinů. Největší rozlišení píků bylo pozorováno při použití sulfatovaných cyklodextrinů.
|
host ::
RSS.