|
|
Adaptivní imunitní odpověď proti BK polyomavirové infekci
Rezlerová, Adéla ; Saláková, Martina (vedoucí práce) ; Roubalová, Kateřina (oponent)
BK polyomavirus je malý neobalený virus, který se vyskytuje ve velké části lidské populace. K infekci BKPyV dochází běžně už v raném dětství. Virus zakládá perzistentní infekci v renálních tubulárních buňkách a buňkách uroepitelu. U imunosuprimovaných jedinců, zejména po transplantaci ledvin či hematopoetických kmenových buněk, může reaktivace BKPyV vést k závažným komplikacím, jako je BKPyV asociovaná nefropatie (BKVAN), stenóza ureteru či hemoragická cystitida. Adaptivní imunita hraje zásadní roli při kontrole replikace a progrese infekce BKPyV. Důležitá je zejména T buněčná odpověď, kdy dochází k produkci CD4+ a CD8+ T- lymfocytů. Důležité jsou i B-lymfocyty, které produkují virus neutralizující protilátky. V současné době neexistují žádné účinné protivirové látky proti infekci BKPyV a snížení imunosuprese zůstává hlavní strategií k potlačení reaktivace. Zkoumání terapií založených na imunitním systému nabízí slibné možnosti účinné léčby komplikací spojených s polyomavirovou infekcí. Klíčová slova: BK polyomavirus, T buněčná odpověď, protilátky, hemoragická cystitida, BK polyomavirus-asociovaná nefropatie
|
|
|
Analysis of serological cross-reactivity between antibodies against BK polyomavirus variants
Caisová, Helena ; Horníková, Lenka (vedoucí práce) ; Roubalová, Kateřina (oponent)
BK polyomavirus (BKPyV), který asymptomaticky infikuje zhruba 80 % lidské populace, se může reaktivovat u imunosuprimovaných pacientů po transplantaci ledviny a způsobit nefropatii. V evropské populaci kolují nejčastěji dva subtypy BKPyV, BKPyV-I a BKPyV- IV, které se chovají jako odlišné sérotypy. Ukazuje se, že recipienti, kteří přijímají ledvinu od dárce pozitivního na jiný BKPyV subtyp, mají větší riziko odmítnutí štěpu. Jen pomocí sérologického testu ELISA ale nelze rozhodnout, zda je pacient infikován subtypem BKPyV-I či BKPyV-IV, jelikož protilátková odpověď proti těmto dvěma subtypům je zkřížená. Tato práce si kladla za cíl identifikovat epitopy na hlavním antigenním proteinu VP1, které jsou zodpovědné za vazbu křížově reagujících a/nebo subtypově specifických protilátek. Identifi- kace takových epitopů by mohla dále vést ke zlepšení pretransplantační diagnostiky a lepšímu managementu pacientů po transplantaci. Proto byly připraveny dva typy antigenů složené z VP1 proteinu subtypu BKPyV-IV se zavedenými mutacemi charakteristickými pro BKPyV-I v DE a EF smyčce VP1, které byly otestovány pomocí kompetiční eseje na panelu lidských sér. Výsledky ukázaly, že oblast DE smyčky je imunogenní epitop, který váže specifické proti- látky pro subtyp I. Naopak mutace v EF smyčce porušily epitop, který je obecně...
|
|
|
Studium celogenomové variability lidského cytomegaloviru.
Dvořák, Jan ; Tachezy, Ruth (vedoucí práce) ; Roubalová, Kateřina (oponent)
Tato práce je součástí projektu zabývající se variabilitou HCMV, jejímž dlouhodobým cílem je zmapovat geografické rozložení genotypů, zjistit vliv variability genotypů na průběh HCMV asociovaných onemocnění a vytipovat úseky genomu s potenciálním využitím pro diagnostiku a preventivní terapii. Práce je zaměřena na metodiku přípravy materiálu z klinických izolátů HCMV pro nově vyvinutou metodu celogenomového sekvenování (next-generation sequencing, NGS) a na postupy pro vyhodnocení získaných sekvenačních dat. V práci byly použity vzorky krve a moči od pacientů po transplantaci hematopoetických kmenových buněk a od kongenitálně infikovaných dětí. Vybrané vzorky vhodné pro NGS byly sekvenovány platformou Illumina a sekvence složeny postupem anglicky označovaným jako de novo assembly v kombinaci s mapping assembly. Vzorky moči ve srovnání s krví vykazovaly vyšší výtěžnost materiálu pro NGS. Ze vzorků pozitivních na HCMV DNA (7 z 50) po amplifikaci na tkáňových kulturách měl pouze jeden vysoký podíl virové buněčné DNA (98 %), u 6 vzorků činil tento podíl méně než 7 %. Ze vzorku obsahujícího 98% virové DNA byla vytvořena sekvence celého genomu a srovnána se sekvencemi dalších klinických izolátů z Belgie v 11 polymorfních oblastech. Analýza těchto oblastí ukázala, že pouze 2 izoláty vykazují shodu ve...
|
|
|
Psychosomatické souvislosti u funkčních poruch horní části trávicího traktu a jejich význam pro léčebnou rehabilitaci
Roubalová, Kateřina ; Bitnar, Petr (vedoucí práce) ; Strapková, Zuzana (oponent)
Tato práce se zabývá problematikou organicky nevysvětlitelných příznaků horní části trávicího traktu Z pohledu gastroenterologie, psychiatrie a fyzioterapie, představuje psychiatrickou diagnostickou jednotku somatoformní poruchy. Dále se v rámci komplexního přístupu ve fyzioterapii u těchto poruch zaměřuje na vzájemné vztahy mezi hybným a trávicím systémem a psychikou. V praktické části byl použit psychologický sebeposuzovací dotazník SCL-90 pro screening psychopatologie u 19 pacientů s funkční poruchou trávení. Z 15 vrácených dotazníků pouze u 3 z nich odhalil celkové hodnoty psychopatologie. Pacienti byly dále fyzioterapeuticky vyšetřeni pro přítomnost tzv. viscerálních vzorců a globálních poruch hybného systému, které by mohly mít vliv na jejich obtíže. Tyto změny (viscerální vzorce i globální změny hybného systému) byly u převážné většiny z nich nalezeny. Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)
|
|
|
Construction of various types of vaccines based on the structural proteins of mouse polyomavirus and analysis of immune response after their administration to mice
Hrušková, Veronika ; Forstová, Jitka (vedoucí práce) ; Roubalová, Kateřina (oponent) ; Reiniš, Milan (oponent)
Shrnutí Humorální a buněčná odpověď myší na intranasální aplikaci modelových polyomavirových VLPs nesoucích zelený fluorescenční protein Imunizovali jsme myši modelovými chimerickými EGFP-VLPs a studovali jsme jejich imunitní odpovědi. Detekovali jsme protilátky proti proteinu VP1, ale ne protilátky proti proteinu EGFP v sérech imunizovaných myší. Prokázali jsme produkci IL-2 a IFN u splenocytů z imunizovaných myší. Pozorovali jsme proliferaci CD4+, ale ne CD8+ T buněk, specifickou na VP1 i na EGFP. Nepodařilo se nám prokázat cytotoxickou aktivitu specifickou proti EGFP. Presentace EGFP-VLPs v souvislosti s MHC II třídy byla blokována inhibitory endolysosomálních i proteasomálních kompartmentu. Zaznamenali jsme změny v počtech CD25+Foxp3+ subpopulací CD4+ T buněk ve slezinách imunizovaných myší. Chimerické VLPs odvozené od myšího polyomaviru nesoucí epitopy lidského fúzního proteinu Bcr-Abl (Bcr-Abl VLPs) Na základě modelových EGFP-VLPs jsme připravili chimerické Bcr-Abl VLPs nesoucí 171 aminokyselinovou sekvenci z oblasti zlomu lidského fúzního proteinu Bcr-Abl. Bcr-Abl VLPs jsme použili k imunizaci myší a studovali jsme jejich imunitní odpovědi. Prokázali jsme vysoký titr protilátek proti VP1 v sérech imunizovaných myší, avšak protilátky proti Bcr-Abl jsme nebyli schopni detekovat. Bcr-Abl VLPs aktivovaly...
|
|
|
Studium celogenomové variability lidského cytomegaloviru.
Dvořák, Jan ; Tachezy, Ruth (vedoucí práce) ; Roubalová, Kateřina (oponent)
Tato práce je součástí projektu zabývající se variabilitou HCMV, jejímž dlouhodobým cílem je zmapovat geografické rozložení genotypů, zjistit vliv variability genotypů na průběh HCMV asociovaných onemocnění a vytipovat úseky genomu s potenciálním využitím pro diagnostiku a preventivní terapii. Práce je zaměřena na metodiku přípravy materiálu z klinických izolátů HCMV pro nově vyvinutou metodu celogenomového sekvenování (next-generation sequencing, NGS) a na postupy pro vyhodnocení získaných sekvenačních dat. V práci byly použity vzorky krve a moči od pacientů po transplantaci hematopoetických kmenových buněk a od kongenitálně infikovaných dětí. Vybrané vzorky vhodné pro NGS byly sekvenovány platformou Illumina a sekvence složeny postupem anglicky označovaným jako de novo assembly v kombinaci s mapping assembly. Vzorky moči ve srovnání s krví vykazovaly vyšší výtěžnost materiálu pro NGS. Ze vzorků pozitivních na HCMV DNA (7 z 50) po amplifikaci na tkáňových kulturách měl pouze jeden vysoký podíl virové buněčné DNA (98 %), u 6 vzorků činil tento podíl méně než 7 %. Ze vzorku obsahujícího 98% virové DNA byla vytvořena sekvence celého genomu a srovnána se sekvencemi dalších klinických izolátů z Belgie v 11 polymorfních oblastech. Analýza těchto oblastí ukázala, že pouze 2 izoláty vykazují shodu ve...
|
|
|
Construction of various types of vaccines based on the structural proteins of mouse polyomavirus and analysis of immune response after their administration to mice
Hrušková, Veronika ; Forstová, Jitka (vedoucí práce) ; Roubalová, Kateřina (oponent) ; Reiniš, Milan (oponent)
Shrnutí Humorální a buněčná odpověď myší na intranasální aplikaci modelových polyomavirových VLPs nesoucích zelený fluorescenční protein Imunizovali jsme myši modelovými chimerickými EGFP-VLPs a studovali jsme jejich imunitní odpovědi. Detekovali jsme protilátky proti proteinu VP1, ale ne protilátky proti proteinu EGFP v sérech imunizovaných myší. Prokázali jsme produkci IL-2 a IFN u splenocytů z imunizovaných myší. Pozorovali jsme proliferaci CD4+, ale ne CD8+ T buněk, specifickou na VP1 i na EGFP. Nepodařilo se nám prokázat cytotoxickou aktivitu specifickou proti EGFP. Presentace EGFP-VLPs v souvislosti s MHC II třídy byla blokována inhibitory endolysosomálních i proteasomálních kompartmentu. Zaznamenali jsme změny v počtech CD25+Foxp3+ subpopulací CD4+ T buněk ve slezinách imunizovaných myší. Chimerické VLPs odvozené od myšího polyomaviru nesoucí epitopy lidského fúzního proteinu Bcr-Abl (Bcr-Abl VLPs) Na základě modelových EGFP-VLPs jsme připravili chimerické Bcr-Abl VLPs nesoucí 171 aminokyselinovou sekvenci z oblasti zlomu lidského fúzního proteinu Bcr-Abl. Bcr-Abl VLPs jsme použili k imunizaci myší a studovali jsme jejich imunitní odpovědi. Prokázali jsme vysoký titr protilátek proti VP1 v sérech imunizovaných myší, avšak protilátky proti Bcr-Abl jsme nebyli schopni detekovat. Bcr-Abl VLPs aktivovaly...
|
|
|
Gene Therapy of CML: Experimental Vaccines against Bcr-abl-transformed Cells
Lučanský, Vincent ; Vonka, Vladimír (vedoucí práce) ; Roubalová, Kateřina (oponent) ; Reiniš, Milan (oponent)
Chronická myeloidná leukémia (CML) je zhubná choroba, charakterizovaná myeloproliferačnou klonálnou expanziou hematopoietickej kmeňovej bunky. Má priamu kauzálnu súvislosť so vznikom takzvaného Philadelpského chromozómu a následnou produkciou jeho špecifického chimérneho produktu, proteínu BCR-ABL. Oblasť spoja BCR-ABL je unikátnou sekvenciou, čo z neho robí tumor špecifický antigén. V súčasnosti dominuje liečbe CML imatinib mesylát, ktorý je veľmi dobre tolerovaný a oproti iným terapeutikám výrazne predlžuje život. Bohužiaľ nie je schopný CML úplne vyliečiť. Jediným potenciálne liečebným prístupom je v súčasnosti transplantácia kostnej drene, ktorá je však spojená s relatívne vysokou úmrtnosťou, navyše je prístupná iba menšine pacientov. Za týchto okolností je pochopiteľná potreba vývoja relatívne bezpečnej liečby, ktorá by bola prístupná všetkým pacientom. Takou to liečbou by mohla byť imunoterapia. Na našom pracovisku sme vyvinuli a na myšom modely testovali niekoľko typov DNA vakcín založených na sekvencii fúzneho génu. Išlo o vakcíny nesúce sekvencie, kódujúce buď celý proteín BCR-ABL, alebo 25 aminokyselinovú oblasť spoja BCR-ABL pripojenú k rozličným produktom adjuvantných génov, ďalej o vakcíny nesúce sekvencie, kódujúce jednotlivé úseky BCR-ABL, alebo o zmesi týchto vakcín. Zatiaľ čo...
|
|
|
Somatoformní porucha a její ovlivnění fyzioterapií
Roubalová, Kateřina ; Ocmanová, Renata (vedoucí práce) ; Hejlová, Věra (oponent)
Náplní této rešeršní bakalářské práce je seznámení se somatoformní poruchou a nástin jejího postavení ve fyzioterapii. Na základě poznatků o této problematice jsou představeny možnosti fyzioterapie a navrženy některé prostředky, které lze použít pro pozitivní ovlivnění somatoformní poruchy v rámci komplexního přístupu společně se zásadami péče o somatoformní pacienty. Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)
|
|
|
Psychosomatické souvislosti u funkčních poruch horní části trávicího traktu a jejich význam pro léčebnou rehabilitaci
Roubalová, Kateřina ; Bitnar, Petr (vedoucí práce) ; Strapková, Zuzana (oponent)
Tato práce se zabývá problematikou organicky nevysvětlitelných příznaků horní části trávicího traktu Z pohledu gastroenterologie, psychiatrie a fyzioterapie, představuje psychiatrickou diagnostickou jednotku somatoformní poruchy. Dále se v rámci komplexního přístupu ve fyzioterapii u těchto poruch zaměřuje na vzájemné vztahy mezi hybným a trávicím systémem a psychikou. V praktické části byl použit psychologický sebeposuzovací dotazník SCL-90 pro screening psychopatologie u 19 pacientů s funkční poruchou trávení. Z 15 vrácených dotazníků pouze u 3 z nich odhalil celkové hodnoty psychopatologie. Pacienti byly dále fyzioterapeuticky vyšetřeni pro přítomnost tzv. viscerálních vzorců a globálních poruch hybného systému, které by mohly mít vliv na jejich obtíže. Tyto změny (viscerální vzorce i globální změny hybného systému) byly u převážné většiny z nich nalezeny. Powered by TCPDF (www.tcpdf.org)
|
host ::
RSS.