|
|
Role of systemic inflammation in Parkinson's disease
Veselá, Karolína ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Zemanová, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd University of Seville, Faculty of Pharmacy Department of Biochemistry and Molecular Biology Kandidát: Karolína Veselá Školitelé: Prof. Dr. José Luis Venero Recio, Prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. Název diplomové práce: Systémový zánět v patogenezi Parkinsonovy choroby. Parkinsonova choroba (PD) je po Alzheimerově chorobě druhé nejčastější neurodegenerativní onemocnění, a s rostoucím průměrným věkem populace prevalence stále roste. Charakteristické příznaky jsou způsobeny úbytkem nervového přenosu v dopaminergní nigrostriatální dráze, přičemž patogeneze této neurodegenerace není doposud objasněna. Rostoucí poznatky ukazují, že klíčovým mechanismem je bludný kruh oxidativního stresu a patologické aktivace mikroglií, avšak otázky, kde tento proces začíná a jak ho zastavit, zůstávají bez jasných odpovědí. Tato práce se zabývá rolí systémového zánětu jako faktoru zhoršujícího neurodegeneraci a jednou z možných příčin vyvolávajících chronický zánět v mozku spojený s úbytkem dopaminergních neuronů. Používá model intraperitoneálního podání neurotoxinu 1-methyl-4-fenyl-1,2,3,6- tetrahydropyridinu (MPTP) myším, který navozuje specifickou dopaminergní neurodegeneraci, a na rozdíl od ostatních modelů PD nezpůsobuje...
|
|
|
Evaluation of biological activity of resveratrol and its derivatives in cell cultures
Miler, Jaroslav ; Novotná, Eva (vedoucí práce) ; Zemanová, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Universita Roma TRE Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologie Katedra biochemických věd Kandidát: Jaroslav Miler Školitelé: Prof. Sandra Incerpi Mgr. Eva Novotná, Ph.D. Název diplomové práce: Hodnocení biologické aktivity resveratrolu a jeho derivátů na buněčných kulturách Záměrem práce bylo zkoumat především antioxidační a částečně i cytostatické vlastnosti resveratrolu, jeho čtyř derivátů (trimethoxyresveratrolu, pterostilbenu, oxyresveratrolu a AVD 163 - molekuly lišící se od trimethoxyresveratrolu polohou jedné methoxy skupiny) a 2,2',5-trihydroxychalkonu. Pokusy byly prováděny na dvou odlišných buněčných kulturách (L6 myoblastech získaných z kosterního svalstva krys a lidských THP-1 monocytech z periferní krve pacientů s akutní monocytickou leukémií). Byly použity čtyři metody: Fluorimetrické stanovení ROS pomocí DCF-DA (dichlorfluoresceindiacetátu); MTT test pro hodnocení cytotoxicity (provedeno pouze s L6 myoblasty); počítání množství buněk k hodnocení antiproliferační či proliferační aktivity moleku; EPR spektroskopie (elektronová paramagnetická rezonance) byla provedena jen s nejnadějšími molekulami. Hlavní metodou bylo fluorimetrické stanovení míry inhibice produkce ROS. Nejlepší výsledky prokazoval 2,2',5-trihydroxychalkon. Oxyresveratrol také...
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
|
Apoptóza a její role u vybraných chorob
Černá, Hana ; Kvasničková, Eva (vedoucí práce) ; Zemanová, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemickčh vûd Kandidát: Hana âerná ·kolitel: Prof. RNDr. Eva Kvasniãková, CSc. Název diplomové práce: Apoptóza a její role u vybrančh chorob Apoptóza, jeÏ pfiedstavuje specifickou formu programové bunûãné smrti, patfií k základním fyziologick˘m procesÛm. Je velmi dÛleÏitá pro v˘voj organismu i pro udrÏení tkáÀové homeostasy. Jedná se o vysoce regulovan˘ proces, k jehoÏ spu‰tûní dochází vÏdy na základû urãitého signálu. Ten aktivuje specifické apoptické dráhy, sled mechanismÛ, které postupnû vedou k bunûãnému zániku. Dysregulace apoptózy je spojena s fiadou patologickčh stavÛ jako jsou nádorová onemocnûní, nûkteré poruchy imunitního systému, kardiovaskulárního systému ãi neurologická onemocnûní. Mezi poslední jmenované patfií neurodegenerativní choroby charakteristické zánikem selektivních neuronálních populací. Konkrétním pfiíkladem jsou Alzheimerova a Parkinsonova choroba. PfiestoÏe patogeneze tûchto onemocnûní není doposud plnû objasnûna, fiada studií naznaãuje, Ïe by ztráta neuronÛ mohla úzce souviset s nadmûrnou apoptickou aktivitou. I pfies urãité nesrovnalosti se proto pfiedpo- kládá, Ïe by apoptóza mohla bť vžnamnou souãástí patogeneze tûchto onemocnûní. Alzheimerova a Parkinsonova choroba patfií k nejzávaÏnûj‰ím...
|
|
|
Klonování, exprese a purifikace lidské AKR1B1
Lundová, Tereza ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Zemanová, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Tereza Lundová Školitel: Prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. Název diplomové práce: Klonování, exprese a purifikace lidské AKR1B1 Aldosareduktasa (EC 1.1.1.21) AKR1B1 je jedním ze 13 lidských enzymů z AKR nadrodiny. Všechny lidské AKR jsou cytosolické a NADP(H) dependentní. AKR1B1 hraje důležitou roli v metabolismu endogenních i exogenních látek. Hlavním endogenním substrátem je glukosa. Její redukce na sorbitol je důsledně spojena se sekundárními diabetickými komplikacemi. Z xenobiotik je metabolizován pomocí AKR1B1 daunorubicin, protinádorové léčivo ze skupiny antracyklinů, které je redukováno na daunorubicinol. Tento metabolit je méně aktivní než původní léčivo a je příčinou antracyklinem způsobené kardiotoxicity. V současnosti je mnoho projektů zaměřených na zkoumání AKR1B1 jako cílového enzymu a hledání specifických inhibitorů. Rekombinantní protein byl připraven v E. coli společně s pET-28b(+) expresním vektorem. Nejprve byla izolována z E. coli cDNA pro AKR1B1 v pOTB7. Kódová sekvence AKR1B1 byla namnožena pomocí PCR. PCR byla provedena s Phusion Hot Start II polymerasou a párem forward a reverse primerů, které obsahují restrikční místa pro NdeI a XhoI. Jako vektor byl použit plasmid pET-28b(+)....
|
|
|
Vyhledání referenčních genů pro relativní kvantifikaci mRNA z Haemonchus contortus
Růžičková, Michaela ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Zemanová, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Michaela Růžičková Školitel: Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Název diplomové práce: Vyhledání referenčních genů pro relativní kvantifikaci mRNA z Haemonchus contortus Haemonchus contortus je parazitická hlístice, jejíž multirezistence k anthelminti- kům je celosvětovým problémem ohrožujícím hlavně chovy malých přežvý- kavců. V roce 2013 byl publikován její genom a transkriptom, což umožnilo rozsáhlý výzkum genové exprese. Referenční geny pro tyto studie prozatím ne- byly stanoveny. Použití vhodných referenčních genů je nezbytné pro správnou normalizaci hladin exprese genů. Cílem této práce bylo navrhnout a zhodnotit potenciální referenční geny pro studie genové exprese u dospělců H. contortus. Navrženo bylo 11 genů, stabilita jejich exprese byla hodnocena na samcích a sa- micích dvou kmenů H. contortus, jednoho na anthelmintika vnímavého (ISE) a druhého multirezistentního (WR). Z jedinců byla extrahována RNA, přepsána reverzní transkripcí do cDNA. Tato byla zředěna a analyzována kvantitativní real-time PCR s detekcí pomocí SYBR Green I. Stabilita exprese byla hodnocena počítačovými programy BestKeeper, geNorm, NormFinder a komparativní CT metodou. Nejstabilnějšími geny se jeví ncbp, ama, sodc, gapdh a...
|
host ::
RSS.